毛细管SDS无胶筛分电泳测定小分子多肽相对分子质量  

Determination of Relative Molecular Mass of Small Polypeptide by Capillary SDS Non-gel Sieve Electrophoresis

作　　者：李响[1] 饶春明[1] 袁力勇[1] 郭莹[1] 裴德宁[1] 王军志[1] 

机构地区：[1]中国药品生物制品检定所生化室,北京100050

出　　处：《中国生物制品学杂志》2007年第2期122-124,共3页Chinese Journal of Biologicals

基　　金：国家"863"高技术发展计划项目(课题编号2003AA2Z3481)

摘　　要：目的建立快速毛细管SDS无胶筛分电泳法（SDS—NGS），测定小分子多肽相对分子质量。方法涂层毛细管（管长30cm，内径100μm）；分离电压为9kV（300V／cm），分离温度为20℃；检测波长为214nm，检测时间为18min；所用SDS-多肽相对分子质量标准范围为2512—16949；以橙G（06）为内标参照物。结果在相对分子质量2512—16949范围内，多肽相对分子质量的对数与其相对迁移率具有良好的线性关系（r=0．996）；应用该方法测定了重组人奈西立肽、重组人表皮生长因子、虎纹镇痛肽、重组人心钠肽4种重组小分子多肽的相对分子质量，所测结果变异系数CV均小于3％。结论毛细管SDS无胶筛分电泳方便快速，灵敏度高，重现性好，结果准确，可作为小分子多肽相对分子质量的检测方法。Objective To develop a capillary SDS non-gel sieve electrophoresis for rapid determination of relative molecular mass of small polypeptide. Methods Determine the relative molecular mass of small polypeptide by capillary SDS non-gel sieve electrophoresis using orange G（OG） as internal reference under the following condition：coated capillary（ length 30 cm, internal diameter 100 μm） ;separation voltage 9 kV （300 V/cm） ;separation temperature 20℃ ;detection wavelength 214 nm;detection time 18 rain; SDS-polypeptide marker（Mr 2 512-16 949）. Results The relative molecular mass at a range of 2 512-16 949 showed a good linear relationship to the migration rate of polypeptide（ r = 0. 996）. The relative molecular masses of 4 kinds of small pelypeptides, i. e. recombinant human B type natriuretic peptide （rhBNP）, recombinant human epidermal growth factor （rhEGF）, Huwen analgesic pepfide （HWAP-1） and recombinant human atrial natriuretic peptide（ rhANP）, showed a variation coefficient of less than 3%. Conclusion Capillary SDS non-gel sieve electropberesis was simple ,rapid,accurate and of good repeatability. It might be used for the determination of relative molecular mass of small polypeptide.

关 键 词：毛细管SDS无胶筛分电泳 小分子多肽 相对分子质量 

分 类 号：Q503[生物学—生物化学]