红曲菌9903A转化体系影响因素的研究  

Influencing Factors on the Efficiency of Gene Transformation System of the Monascus purpureus 9903A

作　　者：夏永军[1] 牛丹丹[1] 王正祥[1] 许赣荣[1] 

机构地区：[1]江南大学生物工程学院,无锡214036

出　　处：《微生物学通报》2007年第2期279-282,共4页Microbiology China

摘　　要：采用PEG介导的原生质体转化方法,研究了将含有潮霉素抗性基因的质粒pMP-Hygro转入红曲菌9903A的影响因素。实验结果表明,原生质体转化最佳条件为:1.0mol/L的山梨醇为渗透压稳定剂;以含有50mmol/L的Ca2+和最终质量分数为40%的PEG4000为转化介质;最佳原生质体浓度和载体DNA用量分别为1×108个/mL、1μg/100μL原生质体;原生质体再生培养基采用不含无机盐的培养基,再生方式采用原生质体液涂布单层再生培基平板法。得到的平均DNA转化率可达160个/μgDNA。本文所研究的PEG介导的原生质体转化方法可以较好的向红曲菌细胞导入外源DNA,并使外源DNA在红曲菌细胞内大量表达。The protoplasts from Monascus purpureu s 9903A were transformed with hygromycin B resistance plasmid pMP-Hygro. The transformation medium contained 50 mmol/L Ca^2 ＋ and 40% PEC,4000 with 1.0mol/L sorbitol an osmotic stabilizer. The protoplasts concentration isl ×10^8/mL and the quantity of vectors is 1 μg/100μL protoplasts. In this study, the average transformation ratio is 160 colonies/μg DNA.

关 键 词：红曲菌 原生质体转化 PEG介导 潮霉素抗性 

分 类 号：Q78[生物学—分子生物学]