纳豆激酶基因的克隆及其在大肠杆菌和枯草芽孢杆菌中的表达  

Molecular Clone and Expression of Nattokinase Gene in Escherichia coli and Bacillus subtilis

作　　者：黄磊[1] 谢玉娟[1] 李申[1] 李丹[1] 梁凤来[1] 刘如林[1] 

机构地区：[1]南开大学生命科学学院,天津300071

出　　处：《食品科学》2007年第5期199-202,共4页Food Science

摘　　要：以纳豆芽孢杆菌HL-1全基因组DNA为模板,PCR分别扩增编码信号肽、前导肽及成熟肽的前纳豆激酶原基因序列(pre-pro-NK),编码前导肽、成熟肽的纳豆激酶原基因序列(pro-NK)和只编码成熟肽的纳豆激酶基因序列(NK),构建了大肠杆菌表达质粒pET28a-NK表达前纳豆激酶原基因及大肠杆菌-枯草杆菌穿梭质粒pHT315-NK表达纳豆激酶原基因和纳豆激酶基因,实现了纳豆激酶基因在大肠杆菌及枯草芽孢杆菌中的表达,并进行了活性分析。Chromosome DNA was isolated from Bacillus subtilis （natto. var）. Pre-pro-ok （encoding signal peptide, propeptide and mature peptide）, pro-ok （encoding propeptide and mature peptide） and ok（encoding mature peptide） were then amplified from chromosome by PCR. The expression vector pET28a-nk and pHT315-nk was constructed and transformed into Escheri- chia coli and Bacillus subtilis to actively express nattokinase and be purified through ion-exchange chromatography. Key words： nattokinase gene： Escherichia coli; Bacillus subtilis; active expression

关 键 词：纳豆激酶基因 大肠杆菌 枯草芽孢杆菌 表达 

分 类 号：Q814[生物学—生物工程]