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作 者:许灿新[1] 王春[1] 朱炳阳[1] 颜涛[1] 罗迪贤[1] 梁磊[1] 李凯[1] 罗其富[1] 廖端芳[1]
机构地区:[1]南华大学药物药理研究所,湖南省衡阳市421001
出 处:《中国动脉硬化杂志》2008年第3期173-176,共4页Chinese Journal of Arteriosclerosis
基 金:国家自然科学基金(30470719);湖南省教委青年重点课题(99B11);湖南省教育厅科研基金(06C710)
摘 要:目的观察高压培养对内皮细胞E选择素表达的影响及其可能的分子机制。方法在自制的可调压力培养箱中,用高于1个标准大气压的不同压力培养人脐静脉内皮细胞,运用间接免疫荧光技术、流式细胞术检测血管内皮细胞粘附分子E选择素蛋白的表达,Western blot检测核因子κB抑制因子α的表达,间接免疫荧光法观察核因子κB的表达分布。结果高压培养和大气压培养细胞形态无明显差异;高压培养E选择素表达明显增加,180 mmHg培养24 h E选择素的表达升高1.5倍;180 mmHg培养6 h和12 h核因子κB抑制因子α的表达降低2倍多;180 mmHg培养24 h激活核因子κB,使其转位于细胞核。结论高压培养促进E选择素表达,核因子κB信号通路参与调控。Aim To investigate the effect and possible mechanisms of high pressure on the expression of E-selectin in vascular endothelial cells. Methods Human umbilical vein endothelial cells were cultured under 0, 120, 150, 180, 210 mmHg in a custom-made pressure incubator for 24 h or treated under 180 mmHg of static pressure for 0, 3, 6, 12, 24h. Western blot, flow cytomety and immunofluorescence were used to detect the expression of E-selectin, inhibitor of nuclear factor kappaB alpha ( IκBa) and nuclear factor kappaB ( NF-κB ) respectively. Results High pressure significantly up-regulated the level of E-selectin. E-selectin level was increased about 1.5 times at 180 mmHg for 24 h, IκBa was downregulated more than 2 times following 180 mmHg culturing for 6 h and 12 h, NF-κB was transferred from cytoplasm to nuclear by 180 mmHg culture for 24 h. Condusion High pressure significantly upregulates E-selectin expression by activating the NF-κB signaling pathway.
关 键 词:病理学与病理生理学 高压培养 E选择素 核因子ΚB 核因子κB抑制因子α
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