复合与合成培养基对大肠杆菌胞外生产α-环糊精葡萄糖基转移酶的影响  

Effect of Complex and Synthetic Medium on Extracellular Production of α-Cyclodextrin Glycosyltransferase in E.coli

作　　者：程婧[1,2] 吴丹[1,2] 陈晟[1,2] 吴敬[1,2] 陈坚[1,2] 

机构地区：[1]江南大学食品科学与技术国家重点实验室,无锡214122 [2]江南大学生物工程学院工业生物技术教育部重点实验室,无锡214122

出　　处：《中国生物工程杂志》2010年第9期36-42,共7页China Biotechnology

基　　金：国家自然科学基金(30970057);江南大学创新团队(2008CXTD01);江南大学青年基金(2009LQN24)资助项目;中央高校基本科研业务费专项资金(JUSRP20917)

摘　　要：为实现来源于Paenibacillus macerans JFB05-01的α-环糊精葡萄糖基转移酶(α-CGT酶)的高效胞外表达,以含分泌型信号肽OmpA的大肠杆菌E.coliBL21(DE3){pET-20b(+)/α-cgt}为研究对象,比较了其在不同诱导条件下复合与合成培养基中生长产酶的规律。结果表明在添加甘氨酸的条件下采用合成培养基,以0.8g/L/h的乳糖进行流加诱导所得的胞外酶活和生产强度最高。在该条件下发酵30小时后胞外α-CGT酶的环化活性达113.0U/ml(水解活性为79100.0IU/ml),是复合培养基胞外产酶的2.3倍,完全满足工业化生产的需求。In order to achieve efficient extracellular production of α-cyclodextrin glycosyltransferase （α-CGTase）,E.coli BL21 （DE3） carrying the α-cgt gene of Paenibacillus macerans JFB05-01 was investivated.By comparison of different induction conditions in complex and synthetic medium,the highest extracellular α-CGTase activity reached 113.0 U/ml （hydrolysis activity was 79 100.0 IU/ml）at 30 h of culture in synthetic medium.The optimized condition is as follows：fed 0.8 g/L/h lactose as inducer in synthetic medium,which contains glycine.The enzyme production from this condition was as 2.3 times as that in complex medium.

关 键 词：PAENIBACILLUS macerans Α-环糊精葡萄糖基转移酶 胞外生产 大肠杆菌 合成培养基 

分 类 号：Q815[生物学—生物工程]