人神经生长因子β亚基的基因在P.pastoris和E.coli中的表达  

作　　者：范乔[1] 刘宏迪[1] 孙彤[1] 赫荣乔[2] 

机构地区：[1]中国科学院微生物研究所,北京100080 [2]中国科学院生物物理研究所,北京100101

出　　处：《科学通报》1999年第6期637-642,共6页Chinese Science Bulletin

摘　　要：将hNGFB基因插入甲醇营养性酵母P .pastoris分泌表达载体pHIL S1和E .coli表达载体pET 15b中 ,相应转化P .pastorisGS115 (Mut+,His- )和E .coliBL2 1(DE3 ) .在不含组氨酸平板上生长的酵母转化子通过PCR进一步筛选阳性克隆 ,P .pastoris重组菌株的蛋白电泳表明发酵液中有特异表达带 ,扫描分析占细胞外泌总蛋白的 14 .4% ,Westernblotting证实该分泌蛋白具有hNGF的免疫活性 .E .coli重组菌株在IPTG的诱导下表达融合蛋白 .电泳扫描分析表达的融合蛋白占细胞总蛋白量的 10 .3 % ,Westernblotting检测表明具有免疫活性 .

关 键 词：神经生长因子 酵母 融合蛋白 Β亚基 基因表达 

分 类 号：Q78[生物学—分子生物学] R977[医药卫生—药品]