应用荧光原位杂交技术筛选bcr基因探针及分析微小残留病  

Identifying a probe of bcr gene and analyzing minimal residual disease by fluorescence in situ hybridization

作　　者：刘晓力[1] 周淑芸[1] 刘孟珉[2] 牛超[2] 郑维扬[1] 宋兰林[1] 曹琪[2] 苏欣莹[2] 陈赛娟[2] 

机构地区：[1]第一军医大学南方医院血液科,广州510515 [2]上海第二医科大学瑞金医院上海血液学研究所

出　　处：《中华医学检验杂志》1999年第4期213-216,共4页

基　　金：国家自然科学基金;广东省自然科学基金

摘　　要：目的　定量检测慢性髓细胞白血病（ Ｃ Ｍ Ｌ） 造血干细胞移植（ Ｈ Ｓ Ｃ Ｔ） 后ｂｃｒ 基因重排。方法　应用荧光原位杂交（ Ｆ Ｉ Ｓ Ｈ） 技术，从 Ｃ Ｅ Ｐ Ｈ 酵母人工染色体（ Ｙ Ａ Ｃ） 文库的３ 个ｂｃｒ 相关候选克隆中筛选探针，并对７ 例造血干细胞移植后病人进行检测，同时进行细胞遗传学和逆转录聚合酶链反应（ Ｒ Ｔ Ｐ Ｃ Ｒ） 分析。结果　确定了定位于２２ｑ１１ ｂｃｒ 基因区域且可在 Ｐｈ 染色体阳性细胞中易位至９ｑ３４的 Ｙ Ａ Ｃ 克隆７６５ Ｅ３ ，应用该 Ｙ Ａ Ｃ Ｄ Ｎ Ａ 探针进行荧光原位杂交，发现７ 例病人中５ 例存在ｂｃｒ 易位阳性细胞（６ ％ ～９８ ％ ） ，常规 Ｇ 显带检出３ 例， Ｐ Ｃ Ｒ 检出６ 例。结论　 Ｆ Ｉ Ｓ Ｈ 可能成为白血病造血干细胞移植后疗效观察和微小残留病定量监测的重要手段。Objective To detect bcr gene rearrangement in chronic myeloid leukemia (CML) after hematopoietic stem cell transplantation (HSCT) in quantity.Methods As candidate probes, three of yeast artificial chromosome (YAC)clones in connection with bcr gene from CEPH were examined, then 7 cases were analyzed by fluorescence in situ hybridization(FISH). Cytogenetics and RT PCR were simultaneously performed.Results By FISH, 765E3,a YAC clone probe flanking the breakpoint within bcr gene was identified, and could translocate to chromosome 9q34 from 22q11 in Ph(+) cells.With the YAC DNA probe 5 out of 7 cases demonstrated bcr gene translocation in 6%～98% of evaluated metaphases, but 3 cases were Ph(+),6 cases expressed bcr/abl mRNA.Conclusion FISH is likely an important tool for monitoring treatment and revealing minimal residual disease in CML after HSCT.

关 键 词：白血病 慢性 髓细胞性 荧光原位杂交 BCR基因 

分 类 号：R733.720.4[医药卫生—肿瘤] R730.43[医药卫生—临床医学]