J亚群禽白血病病毒的LTR体外启动活性分析  

In vitropromoter activity analysis of long terminal repeat from avian leukosis virus subgroup J

作　　者：张伟伟[1] 王超[2] 杨宗伟[2] 陈宗艳[3] 李传峰[3] 刘光清[3] 

机构地区：[1]浙江师范大学化学与生命科学学院,浙江金华321004 [2]甘肃农业大学动物医学学院,甘肃兰州730070 [3]中国农业科学院上海兽医研究所,上海200241

出　　处：《中国兽医科学》2011年第2期121-125,共5页Chinese Veterinary Science

基　　金：中央级公益性科研院所基本科研业务费项目(2009JB01);公益性行业(农业)科研专项(201003012)

摘　　要：为分析J亚群禽白血病病毒LTR基因的体外启动活性,将其克隆至含有萤光素酶报告基因的pGL3载体中,构建了LTR重组质粒及其缺失不同区段的重组质粒,转染DF-1细胞测定萤光素酶的表达情况。结果显示,缺失U3时萤光素酶的表达量明显降低,缺失U5时萤光素酶的表达反而上升,这表明U3区可能具有强启动子功能,而U5区可能具有负调控功能。在此基础上,为鉴定LTR各区段是否具有增强子作用,将U3、RU5基因分别插入pGL3-promoter载体,转染DF-1细胞,测定萤光素酶的表达情况。结果显示,含有U3序列的重组质粒萤光素酶的表达量最高,而含有U5序列的重组质粒萤光素酶的表达量很低,表明U3区具有增强子作用,而U5区含有负调控功能。To analyze and identify the transcription activity of the long terminal repeat（LTR）of avian leukosis virus subgroup J（ALV-J）,LTR was inserted into pGL3 vector with Luciferase Reporter.Deletion analysis and sequence comparison showed that in the LTR sequence linked to the luciferase gene,the U3 region could express the enzyme efficiently in DF-1 cells as a combination of strong promoter and enhancer,but the U5 region can not express the enzyme efficiently,as the negative transcription regulation control unit in the LTR.

关 键 词：J亚群禽白血病病毒 长末端重复序列 强启动子 负调控 萤光素酶 

分 类 号：S852.659.3[农业科学—基础兽医学]