抑制核转录因子PPARα的反义寡核苷酸的抗乙型肝炎病毒活性研究  

Anti-HBV Effect Identification of Antisense Oligodeoxynucleotide Targeting PPARα

作　　者：吴小桃[1] 杨静[1] 王学军[1] 李丹丹[2] 李英[3] 鲁丹丹[1] 王升启[1] 

机构地区：[1]军事医学科学院放射与辐射医学研究所,北京100850 [2]安徽医科大学,安徽合肥230032 [3]天津中医药大学,天津300073

出　　处：《生物技术通讯》2011年第6期773-776,共4页Letters in Biotechnology

基　　金：国家传染病防治科技重大专项(2008zx10002-011)

摘　　要：目的:研究靶向过氧化物酶体增殖活化受体α(PPARα)的寡核苷酸是否具有抑制乙型肝炎病毒(HBV)复制的活性作用。方法:反义寡核苷酸作用于能稳定表达HBV丹氏颗粒的HepG2.2.15细胞,ELISA检测细胞上清中HBV表面抗原(HBsAg)及e抗原(HBeAg)的分泌;实时荧光定量PCR考察反义寡核苷酸对HBV DNA复制水平的影响;通过反转录PCR和Western印迹考察反义寡核苷酸作用于细胞后靶基因及靶蛋白的差异表达情况。结果:抑制PPARα表达的反义序列PPARα-2可剂量依赖且特异性地抑制肝癌细胞中HBsAg和HBeAg的表达,且显著降低细胞中PPARαmRNA水平和蛋白水平。结论:通过筛选初步确定了基于PPARα设计的反义寡核苷酸有较好的抗HBV活性,同时也验证确定了PPARα可能成为抗HBV药物的新型作用靶点。Objective： To study the active function for anti hepatitis B virus（HBV） of antisense oligodeoxynucleotide targeting peroxisome proliferative activated receptor α（PPARα）.Methods： The levels of HBV surface antigen（HBsAg） and e antigen（HBeAg） were measured by ELISA.The influence in the level of HBV DNA duplicate was detected with fluorescence quantitative PCR.The expression of targenting mRNA and protein was examined by reverse transcription PCR and Western blot.Results： The results indicated that antisense sequence PPARα-2 of inhabiting the expression of PPARα could dose-response inhibit the expression of HBsAg and HBeAg in liver cancer cell and significantly reduced PPARα mRNA level and protein level.Conclusion： PPARα was identified and verified in HepG2.2.15 cell as the potential cellular anti-HBV target.

关 键 词：乙型肝炎病毒 反义寡核苷酸 过氧化物酶体增殖活化受体α 

分 类 号：R373.21[医药卫生—病原生物学] R512.62[医药卫生—基础医学]