短双歧杆菌(Bifidobacterium breve203)α-D-半乳糖苷酶的诱导合成及部分酶性质研究  

INDUCTION AND CHARACTERIZATION OF α-D-GALACTOSIDASE (EC 3.2.1.22)FROM Bifidobacterium breve 203

作　　者：肖敏[1] 刘树峰[1] 钱新民[1] 田中敬子 山本宪二 熊谷英彦 

机构地区：[1]山东大学微生物技术国家重点实验室,山东济南250100 [2]日本京都大学农学部微生物生产学,京都6068502

出　　处：《山东大学学报（自然科学版）》2000年第1期108-116,共9页Journal of Shandong University(Natural Science Edition)

基　　金：山东省自然科学基金资助!(Q99D1 2 );国家重点实验室开放课题!(A1 999E0 8)

摘　　要：研究发现 2 5株所试肠道细菌中只有 6株双歧杆菌可以利用棉子糖良好生长 ,并且在棉子糖的诱导下产生α D 半乳糖苷酶 .9种不同糖中 ,Bifidobacter iumbreve 2 0 3可以利用葡萄糖、半乳糖、果糖、麦芽糖、乳糖、蜜二糖、棉子糖良好生长 ,但只有蜜二糖和棉子糖诱导α D 半乳糖苷酶的产生 .1 0mmol/L的棉子糖和蜜二糖对于α D 半乳糖苷酶的诱导合成是最佳浓度的 ,且此浓度下 ,棉子糖的诱导能力 (比活 7.1 3units/mg)是蜜二糖 (比活 3 .4 0units/mg)的 2倍以上 .B .breve 2 0 3菌株α D 半乳糖苷酶专一性水解α D 半乳糖苷键 ,不水解β D 半乳糖苷键 .酶反应的最适温度是 3 7℃ ,酶在 4 0℃以下稳定 ,60℃时剩余 80 %的酶活 ,65℃时剩余 2 0 %的酶活 ,70℃时失去所有的酶活 .酶在 pH5.5～ 9.5稳定 ,酶反应的最适pH是 5.5～ 6.5.Hg+、Cu2 +、Ag+和PCMB强烈抑制酶的活性 ,而Co2 +、Mg2 +、Ca2 +、Mn2 +、Zn2 +、EDTA和DTT对酶活性没有抑制 .It was found that six strains of bifidobacteria could grow better on the medium containing raffinose as a carbon source than other intestinal bacteria.α D Galactosidase activity of bifidobacteria was induced by raffinose.The addition of 10mmol raffinose or melibiose in the medium was the best for inducing α D galactosidase production of Bifidobacterium breve 203.The cell free extract prepared from the B.breve 203 cultured on raffinose showed 2 fold more enzyme activity than that on melibiose (raffinose and melibiose:specific activity was7.14 units/mg and 3.40 units/mg,respectively).α D Galactosidase from B.breve 203 hydrolyzed specifically α D galactosidic band,but did not hydrolyzed β D galactosidic band.The optimum pH and temperature of the enzyme were around 5.5～6.5 and 37 ℃,respectively.The enzyme was stable up to 40 ℃ and between pH 5.5～9.5.The addition of Hg +、Cu 2+ 、Ag +and PCMB to the reaction buffer produced a strong inhibitory effect while Co 2+ 、Mg 2+ 、Ca 2+ 、Mn 2+ 、Zn 2+ 、EDTA and DTT had no effect on the enzyme.

关 键 词：双歧杆菌 Α-D-半乳糖苷酶 诱导合成 酶性质 

分 类 号：Q936[生物学—微生物学] Q556.203