PCR-Targeting体系构建棒状链霉菌基因突变株  

Construction of Streptomyces clavuligerus mutants by PCR-Targeting system

作　　者：左志晗[1] 郑津辉[1] 赵海龙[1] 李玉珊[1] 

机构地区：[1]天津师范大学生命科学学院,天津市动植物抗性重点实验室,天津300387

出　　处：《食品与发酵工业》2013年第3期12-16,共5页Food and Fermentation Industries

基　　金：天津师范大学博士基金资助项目(52X09010);国家“973”计划项目(2012CB114405)

摘　　要：棒状链霉菌(Streptomyces clavuligerus)可产生多种β-内酰胺类化合物,其中包括克拉维酸。利用聚合酶链式反应(PCR)-Targeting体系构建棒状链霉菌突变株是获得克拉维酸高产菌株的又一可行方法。采用该体系对棒状链霉菌的lat基因进行了敲除,获得了没有抗性标记的lat基因被敲除的突变株S.clavuligerus lat::scar,其克拉维酸产量是出发菌株的2.8倍。由于最终构建的突变株没有抗性标记,因此可以将该方法应用于突变棒状链霉菌的其他基因,实现用一种抗性标记突变同一菌株不同基因的目的,为链霉菌的基因突变提供了又一种有效的方法。Streptomyces clavuligerus（S, clavuligerus） produces a number of ^-lactam compounds, including cla- vulanic acid. An efficient procedure for creating clavulanic acid high producing S. clavuligerus mutant by using the polymerase chain reaction （PCR） -targeting system was described. PCR -targeting system was applied to mutate the lat gene of S. clavuligerus to obtain lat gene knocked-out, unmarked mutant S. clavuligerus lat： ：scar. Through PCR- targeting system to knock out the lat gene of S. clavuligerus, clavulanic acid of the mutant S. clavuligerus lat： ：scar was 2.8-fold to the original strain. This procedure allows repeated use of the same resistance marker for making multi- ple knock-outs in the same strain. This provides another efficient procedure for creating Streptomyces mutants.

关 键 词：棒状链霉菌 PCR-寻靶 突变 克拉维酸 

分 类 号：TQ920.1[轻工技术与工程—发酵工程]