家蝇Defensin基因原核表达条件的优化及其抑菌活性  

作　　者：许琴英[1] 朱家勇 金小宝 徐建华 

机构地区：[1]广东医学院寄生虫学暨临床寄生虫检验学教研室,广东湛江524023 [2]广东省生物活性药物研究重点实验室,广州510006

出　　处：《广东医学》2013年第16期2458-2461,共4页Guangdong Medical Journal

摘　　要：目的优化家蝇Defensin基因原核表达条件,并初步研究其抑菌活性。方法 Defensin基因成熟肽被克隆入pGEX-4T-1原核表达载体中,构建重组质粒pGEX-4T-1/Defensin,并转化宿主菌后诱导表达,表达过程中对菌液起始浓度、IPTG浓度、诱导温度和时间进行优化。采用亲和层析法分离纯化融合蛋白,SDS-PAGE鉴定目的蛋白的表达情况和分子量。用凝血酶切除谷胱甘肽标签,并通过体外抑菌实验检测其抗菌活性。结果成功构建重组质粒pGEX-4T-1/Defensin,目的基因能够在大肠埃希菌内高效表达,分子量为4 kD,与预期值一致,表达量约达40%。抑菌实验显示其对大肠埃希菌K12D31生长有一定的抑制作用。结论本实验为家蝇Defensin基因功能的深入研究奠定了工作基础。

关 键 词：抗菌肽 表达 活性 DEFENSIN 

分 类 号：R394[医药卫生—医学遗传学]