人钙联蛋白S100A8原核表达载体的构建及表达  

作　　者：潘晓彦[1] 赵伟[1] 李琳[1] 刘叔文[1] 谭穗懿[1] 

机构地区：[1]南方医科大学药学院,广东广州510515

出　　处：《河南中医》2013年第B10期307-308,共2页Henan Traditional Chinese Medicine

基　　金：国家自然科学青年基金（项目编号：81102482）

摘　　要：目的：构建人钙联蛋白S100A8的原核表达栽体并进行蛋白表达及纯化，以便进一步研究。方法：从人单核巨噬细胞THP-1中提取总RNA，逆转录后进行PCR，得到目的基因，与TA克隆栽体pMD-T进行连接，得到pMD-S100A8质粒，经BamHI和XhoI双酶切产物或者PCR产物双酶切后，与大肠杆菌pGEX一6P-1表达载体进行连接，得到pGEX-S100A8重组质粒。重组质粒转入E．coliBL21（DE3）表达菌进行蛋白表达。融合GST蛋白用GST柱纯化，冷冻干燥，进行下一步研究。结果：成功构建了TA克隆质粒pMD-S100A8及阳性pGEX-S100A8重组质粒，成功诱导蛋白的原核表达。结论：纯化得到的蛋白为进一步研究S100A8钙联蛋白的结构和功能提供了参考。

关 键 词：钙联蛋白 S100A8 质粒构建 表达 纯化 

分 类 号：R453[医药卫生—治疗学]