纤维母细胞生长因子10基因在角膜混浊小鼠中的克隆测序与表达研究  

The study on clone sequencing and expression of Fgf10 in corneal opacity mouse

作　　者：吴刘成[1] 张柳柳[2] 李瑶[1] 王胜洁[1] 季韧 倪尧尉 邵义祥[1] 

机构地区：[1]南通大学比较医学研究所,江苏南通226001 [2]南通大学医学院,江苏南通226001

出　　处：《重庆医学》2013年第36期4421-4423,共3页Chongqing medicine

基　　金：江苏省自然科学基金(BK2010279);南通大学自然科学基金(11Z052);南通大学大学生创新训练计划项目(2013093)

摘　　要：目的研究纤维细胞生长因子10(Fgf10)基因在角膜混浊小鼠(B6-Co)中的克隆测序及表达。方法正常小鼠(C57BL/6,B6)和B6-Co小鼠交配,取胚胎16.5dB6和B6-Co小鼠皮肤组织,提取总RNA并逆转录,采用逆转录聚合酶链反应(PCR)技术分段扩增目的基因,连接T载体,转化感受态细胞,筛选阳性克隆,并测序分析;采用实时荧光PCR的方法进一步检测该基因在B6-Co小鼠中的表达。结果测序发现在Fgf10基因第三外显子1 914bp和1 915bp之间插入了碱基A;实时荧光PCR结果显示Fgf10在B6-Co小鼠中的表达明显下降(P<0.05)。结论 Fgf10与B6-Co小鼠出生时眼睑开放(EOB)表型有关,其表达调控机制有待进一步研究。Objective To study the clone sequencing and expression of fibroblast growth factor 10（Fgf10） gene in corneal opaci-ty （B6-Co） mouse .Methods Normal mice mate with B6-Co mice ,the skin tissue separation from B6 and B6-Co mice at embryo 16 . 5 d ,total RNA extraction and reverse transcription ,the target gene was fragment amplification by RT-PCR ,connection with T vec-tor ,transformed to competent cells ,selection positive clone ,sequencing analysis .The gene expression in B6-Co mice was detected by real-time PCR .Results The base A inserted between 1 914 and 1 915 in Fgf10 gene by sequencing .The expression of Fgf10 was significant down regulation in B6-Co mice by real-time PCR（P〈 0 .05） .Conclusion Fgf10 is relevant with phenotype of B6-Co mouse ,and the regulation mechanism was expected further study .

关 键 词：B6-Co小鼠 角膜混浊 纤维细胞生长因子10 基因表达 突变 

分 类 号：R772.2[医药卫生—眼科]