RyR1基因沉默对人肺癌细胞生物学活性的影响  

作　　者：薄龙[1] 潘泓[1] 赵冰冰[2] 黄明方[1] 刘德森[1] 

机构地区：[1]广西医科大学附属肿瘤医院胸瘤外科,南宁530021 [2]广西医科大学附属肿瘤医院妇瘤科

出　　处：《广西医科大学学报》2013年第6期856-859,共4页Journal of Guangxi Medical University

基　　金：广西卫生厅科研课题(No.重2010072)

摘　　要：目的：利用针对兰尼碱受体1（Ryanodinereceptor1，RyRl）的小干扰RNA（siRNA），研究沉默RyRl基因表达对人肺癌细胞株A549细胞生物学活性的影响。方法：（1）设计并合成针对RyRl基因的siRNA及阴性对照片段（不针对任何已知人的mRNA）和阳性对照片段（沉默GAPDH内参基因），转染肺癌细胞A549；（2）实时荧光定量一PCR（Real—timefluorogenticquanti—tativePCR，FQ-PCR）和蛋白质印迹（Westernblot）分别检测转染后RyRImRNA表达及RyRl蛋白表达的变化；（3）MTT实验检测转染前后细胞增殖能力的变化；（4）流式细胞术检测转染前后细胞周期及细胞凋亡的状态。结果：（1）FQ-PCR结果显示RyRlsiRNA-1969可下调RyRlmRNA的表达，相对表达量与阳性对照组和阴性对照组比较差异有统计学意义（P〈0．01）；（2）转染RyRlsiRNA后RyRl蛋白表达下调；（3）MTT实验显示RyRl表达沉然后的A549细胞生长缓慢，与对照组相比较差异有统计学意义（P〈0.05）；（4）转染后细胞凋亡率较空白对照组（正常培养的A549细胞）和阴性对照组（转染阴性对照小RNA片段的A549细胞株）显著增高（P〈0.001），处于G0~G1期的细胞明显增多（P〈0．001）。结论：RyR1基因可能为肺癌的基因治疗提供新策略。

关 键 词：肺癌 RYR1基因 SIRNA 转染 A549细胞株 

分 类 号：R734.2[医药卫生—肿瘤]