1株产酸性α-淀粉酶黑曲霉原生质体制备和再生条件优化  

Optimization of Protoplast Formation and Regeneration from an Aspergilli niger Strain Producing Acid-Stable α-Amylase

作　　者：王发祥[1] 俞健[1] 王建辉[1] 李向红[1] 何纪华[1] 刘永乐[1] 

机构地区：[1]长沙理工大学化学与生物工程学院,湖南长沙410114

出　　处：《食品科学》2014年第1期155-158,共4页Food Science

基　　金："十二五"国家科技支撑计划项目(2012BAD31B08);国家自然科学基金项目(31201427;31101214);湖南省自然科学基金项目(12JJ6028);湖南省科技计划项目(2012NK3061);长沙市科技局重点项目(K1201140-21)

摘　　要：通过单因素试验、Plackett-Burman(PB)试验和响应面优化获得产酸性α-淀粉酶黑曲霉孢子原生质体制备和再生的最佳工艺参数:黑曲霉种龄72 h、孢子浓度7.5×106CFU/mL、渗透压稳定剂甘露醇浓度0.85 mol/L,以10 g/L蜗牛酶+10 g/L纤维素酶+10 g/L溶菌酶为破壁酶、pH 6.8、酶解温度37℃、酶解2 h。在此条件下,原生质体制备率可达86.92%,再生率可达42.67%。The optimum conditions for formation and regeneration of protoplasts from Asperigillus niger with a high yield of acidstable α-amylase were obtained using one-factor-at-a-time experiments, Plackett-Burman design and response surface methodologyas follows： seed age of 72 h, spore concentration of 7.5 × 106CFU/mL, stabilization of the osmotic pressure using 0.85 mol/Lmannitol, and hydrolysis of cell walls with a mixture of snailase （10 g/L）, cellulose （10 g/L） and lysozyme （10 g/L） at 37 ℃, pH 6.8for 2 h. Under these conditions, the rates of protoplast formation and regeneration reached 86.92% and 42.67%, respectively.

关 键 词：原生质体 酸性Α-淀粉酶 黑曲霉 响应面法 制备 再生 

分 类 号：Q933[生物学—微生物学]