枯草杆菌诱导型高效表达-分泌系统的构建  

作　　者：吴青[1] 罗进贤[1] 徐柏年[1] 李文清[1] 

机构地区：[1]中山大学生物化学系

出　　处：《自然科学进展（国家重点实验室通讯）》2001年第1期40-46,共7页

基　　金：国家自然科学基金(批准号:39270011)

摘　　要：利用枯草杆菌蛋白酶缺陷突变株,sac B诱导基因及degQ,degU(Hy)正调控基因构建了诱导型表达-分泌系统以解决枯草杆菌分泌大量胞外蛋白酶和外源基因表达水平不高的问题,采用共转化方法将枯草杆菌IA95的degU(Hy)突变引入枯草杆菌蛋白酶缺陷突变株DB403,获得degU(Hy)和蛋白酶三缺陷的新菌株DB1342;利用sacB基因的启动子——信号序列及芽孢杆菌的两个正调控基因degQ和degU(Hy)构建了诱导型表达-分泌载体pURT3及pURTQ4,由DB1342突变株及pURT3及pURTQ4载体组成枯草杆菌诱导型高效表达和分泌系统.在本系统中内源基因sacB的表达量是原菌株DB403的296倍,将地衣杆菌α-淀粉酶基因引入本系统后在sacB,degQ.degU的调控和蔗糖的诱导下,α-淀粉酶的表达量是在DB403中的140倍,证实degQ及degU对基因表达的增强作用是叠加的.

关 键 词：诱导型 表达-分泌系统 枯草杆菌 基因表达 Α-淀粉酶 外源基因 表达量 诱导基因 调控基因 

分 类 号：Q786[生物学—分子生物学]