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机构地区:[1]中国科学院遗传研究所,中国北京100101 [2]北京师范大学生物系,中国北京100875
出 处:《Developmental and Reproductive Biology》1998年第1期1-10,共10页发育与生殖生物学报(英文版)
摘 要:研究证明:许多化学药物的治疗都是以诱导细胞凋亡的方式杀伤癌细胞的。有关细胞凋亡的研究已成为肿瘤生物学研究中的一个新焦点。IgY-ricinA为本实验室新研制的一种免疫毒。与其它种类的免疫毒一样,它能够特异地杀伤靶细胞。推测:免疫毒IgY-ricinA也是以诱导细胞凋亡的方式杀死癌细胞的。我们已经研究了免疫毒对靶细胞的杀伤能力和效果,本文则着重对细胞的杀伤机理进行探讨。本实验以胃癌细胞MGC-803为靶细胞,HeLa细胞为非特异识别细胞,二倍体2BS细胞为正常对照细胞,进行IgY-ricinA处理,观察其诱导细胞凋亡的可能性。同时进行IgY和ricin处理,以期探明引起细胞凋亡的有效成分。OlympusBX荧光显微镜下观察到(Fig,2,.5&6):在细胞培养液中加入IgY-ricinA后,MGC-803细胞表现出典型的凋亡形态变化,即染色质浓缩,细胞皱缩并放出凋亡小体。细胞凋亡时DNA被降解寡核体长度的片段,在琼脂凝胶电泳上形成DNA梯带,成为药物处理后确定细胞凋亡过程中细胞降解的一种生化指标。Fig.3表明,用IgY-ricinA处理MGC-803细胞24小时、用ricin处理MGC-803和Hela细胞后,均出现明显的寡核体长度的DNA梯带,但是用IgY处理的细胞无DNA梯带出现。用特异性DNA的染色探针(如propidium iodide)标记细胞、经流式细胞光度仪测定,可以得到凋亡细胞的apo峰,即图形中G1峰前的一个次峰。Fig.4表明:用10μg/mL的IgY-ricinA处理MGC-803细胞24小时,其凋亡率大大增高,apo峰很明显,214小时后接近80%。同样处理条件下,HeLa细胞凋亡率很低,apo峰不显著;2BS细胞则没有apo峰出现。同样方法、用ricin处理MGC-803和HeLa细胞,都出现明显的apo峰。IgY-ricinA和ricin两者的差别是使细胞凋亡达到最大比例所需时间的不同,后者较短。IgY不能够诱导细胞凋亡。结论:IgY-ricinA能够选择性
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