鸡源志贺菌IpaC基因表达载体的构建及其在毕赤酵母中的表达  

作　　者：韩志霞[1] 马金玉[1] 王雪云[1] 蒋大伟[1] 刘芳[1] 许兰菊[1] 李克宇[1] 

机构地区：[1]河南农业大学牧医工程学院,河南郑州450002

出　　处：《江苏农业科学》2016年第8期39-42,共4页Jiangsu Agricultural Sciences

基　　金：国家自然科学基金(编号:31272568)

摘　　要：为使IpaC基因表达产物保持天然的生物学活性,实现在酵母表达系统中高效表达,本研究在不改变IpaC蛋白氨基酸序列的情况下,根据酵母密码子偏爱性优化合成IpaC#基因,分别构建真核表达载体pGAPZαA-IpaC和pGAPZαA-IpaC#,然后将线性化重组质粒电转化至毕赤酵母X-33中,对阳性转化子用SDS-PAGE及Westernblot检测其表达产物。结果表明,经SDS-PAGE及Westernblot检测,仅在pGAPZαA-IpaC#/X-33重组菌表达产物菌体沉淀中检测到大小为70ku的目的蛋白,实现了鸡源志贺菌IpaC#基因在毕赤酵母中的胞内表达,从而验证毕赤酵母表达系统与外源基因序列的相关性,为进一步提高鸡源志贺菌IpaC基因在毕赤酵母中的高效表达提供科学依据,对研究该病的发病机制具有重要意义。

关 键 词：鸡源志贺菌 IpaC基因 毕赤酵母 优化密码子 pGAPZαA 真核表达 

分 类 号：Q786[生物学—分子生物学] S852.61[农业科学—基础兽医学]