李克宇

作品数：7被引量：30H指数：3
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供职机构：河南农业大学牧医工程学院更多>>
发文主题：克隆及原核表达克隆志贺氏菌IPAC蛋白更多>>
发文领域：农业科学生物学医药卫生更多>>
发文期刊：《黑龙江畜牧兽医》《中国兽医学报》《江苏农业科学》《河南农业科学》更多>>
所获基金：国家自然科学基金更多>>
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利用免疫沉淀法对鸡源志贺菌IpaC蛋白受体候选蛋白的初步筛选被引量：1
《中国兽医学报》2016年第11期1869-1874,共6页韩志霞 刘芳 蒋大伟 许兰菊 孔江南 李克宇 
国家自然科学基金资助项目(31272568)
为筛选鸡源志贺菌IpaC蛋白的受体。利用生物素标记试剂盒标记IpaC蛋白，分离培养原代鸡肠上皮细胞和。利用ProteoExtract？天然膜蛋白提取试剂盒提取鸡肠上皮细胞的膜蛋白；应用免疫沉淀、免疫磁珠法分离富集与IpaC蛋白结合的蛋白质；利...
关键词：鸡源志贺菌 IpaC蛋白 鸡肠上皮细胞 免疫沉淀 LC—MS/MS 受体 
鸡源志贺菌IpaC基因表达载体的构建及其在毕赤酵母中的表达
《江苏农业科学》2016年第8期39-42,共4页韩志霞 马金玉 王雪云 蒋大伟 刘芳 许兰菊 李克宇 
国家自然科学基金(编号:31272568)
为使IpaC基因表达产物保持天然的生物学活性,实现在酵母表达系统中高效表达,本研究在不改变IpaC蛋白氨基酸序列的情况下,根据酵母密码子偏爱性优化合成IpaC#基因,分别构建真核表达载体pGAPZαA-IpaC和pGAPZαA-IpaC#,然后将线性化重组...
关键词：鸡源志贺菌 IpaC基因 毕赤酵母 优化密码子 pGAPZαA 真核表达 
鸡源志贺菌IpaC基因变构体重组酵母表达载体的构建及初步表达被引量：1
《中国兽医学报》2015年第10期1631-1635,共5页李克宇 刘一尘 蒋大伟 张春杰 许兰菊 张彬 王雪云 马金玉 韩志霞 
国家自然科学基金资助项目(31272568)
为使IpaC基因表达产物保持天然的生物学活性,实现在酵母表达系统中高效表达,本研究首先采用反向PCR将IpaC基因358～360位和361～363位酵母菌低频密码子突变为偏嗜性密码子,并进一步构建了克隆载体pMD18-T-IpaC＊和酵母表达载体pPICZαA-...
关键词：鸡源志贺菌 IpaC基因 毕赤酵母 表达载体 构建 表达 
鸡肠上皮细胞原代培养与鉴定被引量：7
《黑龙江畜牧兽医》2015年第11期10-12,284,共4页王雪云 刘芳 蒋大伟 韩志霞 马金玉 李克宇 张彬 许兰菊 
国家自然科学基金项目(31272568)
为了探讨鸡肠上皮细胞体外分离培养方法,进一步研究鸡源志贺菌Ipa C毒力蛋白在鸡肠上皮细胞上的受体蛋白分子,试验分别无菌取14,16,18日龄鸡胚肠组织,用300 U/m LⅪ型胶原酶和0.1 mg/m LⅠ型中性蛋白酶混合搅拌消化25 min,用壁差法纯化...
关键词：鸡肠上皮细胞 鸡胚 肠隐窝单位 分离培养 鉴定 
河南省部分地区鸡大肠杆菌的分离鉴定及耐药性研究被引量：17
《河南农业科学》2015年第2期127-131,共5页张彬 韩志霞 马金玉 王雪云 许兰菊 李克宇 
国家自然科学基金项目(31272568)
为了解河南省鸡场大肠杆菌的流行情况,对采自周口、商丘、安阳等6个地区的腹泻鸡病料进行病原的细菌学检验和药敏试验,经分离培养、形态染色镜检、生化试验、血清学试验和动物试验,共分离鉴定出11株鸡大肠杆菌,有5种血清型,分别为O14、...
关键词：鸡 大肠杆菌 分离 鉴定 耐药性 
鸡源志贺菌IpaC基因的克隆及原核表达被引量：3
《中国兽医学报》2013年第9期1352-1357,共6页苗银萍 蒋大伟 许兰菊 王川庆 尤晓楠 李克宇 
国家自然科学基金资助项目(31272568)
应用PCR方法从ZMD-01株鸡源志贺菌中扩增IpaC目的基因,并将IpaC基因克隆至载体pET32α（＋）中,构建原核表达载体pET32α（＋）-IpaC,然后转化至大肠杆菌BL21（DE3）中诱导表达并优化表达条件,最后进行目的蛋白的可溶性鉴定及Western-b...
关键词：鸡源志贺菌 IpaC基因 克隆 
鸡腹泻病原菌的分离鉴定及药敏试验研究被引量：2
《河南农业科学》2012年第4期148-153,共6页苗银萍 蒋大伟 许兰菊 张光辉 尤晓楠 李克宇 
为了对来自河南省部分地区的腹泻病(死)鸡进行病原确诊及了解病原对药物的敏感性,恰当采集动物病料进行细菌常规分离鉴定和药敏试验。结果共鉴定出5株鸡白痢沙门氏菌和17株鸡源志贺氏菌。分离的志贺氏菌中,痢疾Ⅰ型5株,痢疾Ⅱ型3株,鲍...
关键词：鸡 腹泻 志贺氏菌 沙门氏菌 分离鉴定 药敏试验 
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