表皮生长因子受体跨膜区编码序列的克隆  

Cloning of transmembrane domain sequence of EGFR gene

作　　者：马文学[1] 余海[1] 易平勇[1] 金洪传[1] 严杰[2] 

机构地区：[1]浙江大学医学院肿瘤研究所,杭州310009 [2]浙江大学医学院微生物学教研室,杭州310006

出　　处：《浙江大学学报（医学版）》2002年第4期235-238,共4页Journal of Zhejiang University(Medical Sciences)

基　　金：浙江省自然科学基金资助项目 (399131和 30 15 80 )

摘　　要：目的 :克隆表皮生长因子受体跨膜区 ( Transm em brane,TM )编码序列 ,为构建跨膜型超抗原和细胞因子的表达载体奠定基础。方法 :以表达 c- erb- B2癌基因的中国卵巢癌细胞系 HO- 8910细胞的 RN A逆转录产物( c DNA)为模板 ,用两条针对 c- erb- B2全长基因序列中编码 TM区序列特异性的引物 ,采用 RT- PCR方法克隆 T M区片段并测序。结果 :实验克隆的 TM编码序列 ,经测序证实与 Genbank中接受号为 M11730的 TM区序列完全一致 ;与接受号为 X0 336 3的 TM区序列存在 G→ A的多态性。结论 :成功地克隆了 TM编码序列 ,并证实源于中国的卵巢癌细胞系 H O- 8910中所包含的表皮生长因子受体基因中编码的 TM区序列存在多态性。Objective: To clone the transmembrane(TM)domain sequence of EGFR gene and lay a good foundation for constructing the transmembrane expresssion vector of recombinant superantigens and cytokines. Methods: A pair of primers special to the sequence encoding TM domain of EGFR gene were synthesized, TM domain fragment was cloned by RT PCR, and the PCR product of TM domain sequence was ligated with the pGEM T vector and confirmed by DNA sequencing. Results: TM domain sequence was successfully cloned and verified by DNA sequencing. Conclusion: The successful cloning of TM domain sequence provides a basis for the construction of transmembrane fusion protein of Superantigen TM or Cytokines TM in cancer biotherapy.

关 键 词：表皮生长因子受体 跨膜区 编码 克隆 原癌基因 序列分析 基因表达 C-ERB-B2 

分 类 号：R730.231[医药卫生—肿瘤]