目的基因全长cDNA合成及克隆技术进展  

The Technical Progress in Generating and Isolating Full-length cDNA

作　　者：张光祥[1] 马正强[1] 

机构地区：[1]南京农业大学作物遗传与种质创新国家级重点实验室,南京210095

出　　处：《生物技术通报》2003年第5期1-5,共5页Biotechnology Bulletin

基　　金："973"前期专项 ( 2 0 0 2CCA0 13 0 0 )资助

摘　　要：在基因克隆、基因功能和表达调控研究中 ,获得目的基因尤其是表达丰度低的基因全长cDNA仍然是一个技术难题。本文对近年来有关反转录过程中影响全长cDNA合成的因素与对策的研究进行了总结 ,特别对消除mRNA二级结构阻碍的方法及其效果、较高反应温度和金属离子对模板mRNA完整性的影响、RNA分子伴侣在反应温度不变的情况下改善cDNA第一链质量的效果等作了较为详细的介绍。此外 ,还介绍了确保具有完整5′端的cDNA进入后续研究的几种新方法。Full length (or at least full ORF) cDNAs are required in identifying, cloning and characterizing functionally important genes. However, it is still a technical challenge to isolate full length cDNAs for many genes because of their size, abundance, special secondary structure and so on. This paper summarized the current state of the arts in generating full length cDNAs, including a variety of measures attempted to improve the quality of first strand synthesis.

关 键 词：反转录 RNA分子伴侣 目的基因 全长CDNA 克隆 

分 类 号：Q785[生物学—分子生物学]