重组人脑钠素在大肠杆菌中的表达、纯化与鉴定  

作　　者：孙自勇 朱镇华 陈均勇 刘莉莉 张巍 杨庆 张菁 刘建宁 

机构地区：南京大学分子医学研究所,南京,210093

出　　处：《南京大学学报（自然科学版）》2004年第1期34-40,共7页Journal of Nanjing University（Natural Science）

摘　　要：人脑钠素(hBNP，human brain natriuretic peptide)是心室分泌的由32个氨基酸组成的多肽激素．临床研究表明，hBNP是治疗充血型心衰竭的一种安全有效的多肽药物．化学合成脑钠素全基因，以pET32a为表达载体，构建了硫氧还蛋白-脑钠素(thioredoxin—hBNP)融合蛋白表达质粒，并转化至大肠杆菌BL21(DE3)，经IPTG诱导，融合蛋白的表达量占全菌蛋白量的25％以上．融合蛋白经肠激酶裂解、Zn—Sepharose亲和层析和C4反相高效液相层析，从每升培养液中可获取4mg rhBNP，纯度达到95％．经质谱测定，rhBNP样品的分子量为3464Da．体外活性测定结果表明，rhBNP样品对兔胸主动脉条具有显著的血管舒张效应，其ED50为(2．24±0．58)×10^-6mg／mL．

关 键 词：重组人脑钠素 大肠杆菌 表达 纯化 鉴定 肠激酶 酶解 多肽激素 

分 类 号：R977.1[医药卫生—药品] Q78[医药卫生—药学]