重组人胸腺肽α1在大肠杆菌中的表达纯化和鉴定  

作　　者：吴盛 陈新园 陈均勇 刘莉莉 朱镇华 孙自勇 张燕 刘建宁 

机构地区：南京大学分子医学研究所,南京,210093

出　　处：《南京大学学报（自然科学版）》2004年第1期49-57,共9页Journal of Nanjing University（Natural Science）

摘　　要：用PCR将化学合成的人胸腺肽α1基因扩增并克隆到pMD18-T载体中，经过KpnI／SacI酶切、连接将胸腺肽基因插入到表达载体pET32b中硫氧还蛋白下游．将重组质粒转化至表达宿主BL21(DE3)中，经IPTG诱导，Zn—Sepharose亲和层析纯化以及复性处理，从每升菌液中可获得35mg硫氧还蛋白-胸腺肽α1融合蛋白．经凝血因子Xa酶切、Zn—Sepharose亲和层析以及反相高效液相色谱纯化获得3．8mg重组人胸腺肽．小鼠胸腺细胞凋亡实验表明，重组人胸腺肽能显著地抑制地赛米松诱导的小鼠胸腺细胞的凋亡，且该抑制作用与重组人胸腺肽的浓度呈剂量依赖关系．

关 键 词：胸腺肽 大肠杆菌 表达 纯化 鉴定 酶解 

分 类 号：Q51[生物学—生物化学] Q786