国家自然科学基金(30970058)

作品数：6被引量：9H指数：1
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提高产反式-4-羟脯氨酸工程菌产量的发酵策略被引量：1
《食品与生物技术学报》2019年第11期40-48,共9页王晓姣 杨慧敏 张震宇 孙付保 周豪 
国家自然科学基金项目（30800018,30970058）;江苏省自然科学基金项目（BK2012554）;江南大学工业生物技术教育部重点实验室开放课题基金项目（KLIB-ZR200801）
为了实现羟脯氨酸的高产,首先以缺陷型菌株E.coli JM109ΔargB/pUC19-BH作为实验菌,通过单因素优化及正交试验,优化得到新的培养基配方及培养条件。其次通过基因工程手段引入透明颤菌血红蛋白VHB基因,构建菌株E.coli JM109ΔargB/pUC19-...
关键词：反式-4-羟脯氨酸 大肠杆菌工程菌 缺陷型 透明颤菌血红蛋白 发酵优化 
大肠杆菌中顺式-3-羟脯氨酸羟化酶的定向改造被引量：1
《食品与发酵工业》2017年第1期7-11,共5页黄建华 王晓姣 魏照辉 张震宇 孙付保 
国家自然科学基金(30970058);国家自然科学基金(21176106);江苏省自然科学基金(BK2012554)
对以L-脯氨酸为底物,产顺式-3-羟脯氨酸(cis-3-hydroxyproline,H3P)的羟化酶基因进行定向改造。从重组菌E.coli BL21(DE3)/p ET21a-ptrp2-H3P出发,通过易错PCR随机突变和定点突变处理,利用多孔板和创建的简易显色法相结合的高通量方法...
关键词：重组大肠杆菌 易错PCR 顺式-3-羟脯氨酸(cis-3-hydroxyproline H3P) 脯氨酸-3-羟化酶 定向改造 
精氨酸缺陷型菌株发酵生产反式-4-羟脯氨酸被引量：2
《食品与发酵工业》2017年第1期24-30,共7页王晓姣 张震宇 孙付保 于林 
国家自然科学基金(30970058);江苏省自然科学基金(BK2012554);工业生物技术教育部重点实验室(江南大学)开放课题基金(KLIB-ZR200801)
为了获得高产反式-4-羟脯氨酸的菌株,基于大肠杆菌的代谢网络模型的指导,以大肠杆菌E.coli BL21(DE3)Δput A为出发菌株,通过基因敲除技术成功敲除arg B基因,阻断L-脯氨酸合成的前体物L-谷氨酸的分支代谢途径,增加L-脯氨酸合成的代谢流...
关键词：大肠杆菌1 反式-4-羟脯氨酸2 基因敲除3 脯氨酸4 
酶法产L-丙氨酰-L-谷氨酰胺重组大肠杆菌pepD/pepN基因的敲除及其发酵优化被引量：4
《食品与发酵工业》2016年第6期7-14,共8页刘沛沛 张震宇 孙付保 周豪 
国家自然科学基金(30970058);国家自然科学基金(21176106);工业生物技术教育部重点实验室(江南大学)开放课题基金(KLIB-ZR200801)
L-丙氨酰-L-谷氨酰胺(L-alanyl-L-glutamine,L-Ala-L-Gln),是目前国内外公认的L-谷氨酰胺载体,在临床医学和营养学等领域有广泛应用。为了减少丙谷二肽在生物酶法生产过程中菌体对其降解,利用λRed同源重组系统,敲除大肠杆菌中肽酶D和...
关键词：L-丙氨酰-L-谷氨酰胺 大肠杆菌 生物酶法 基因敲除 λ RED同源重组 发酵优化 
1株产顺式-4-羟基-L-脯氨酸基因工程菌的构建及发酵初步优化被引量：1
《食品与发酵工业》2016年第2期7-12,共6页王付才 张震宇 孙付保 姚动邦 周杨 
国家自然科学基金(30970058);江苏省自然科学基金(BK2012554);工业生物技术教育部重点实验室(江南大学)开放课题基金(KLIB-ZR200801)
顺式-4-羟基-L-脯氨酸是一种可用于合成多种药物和香料的手性结构物质。通过对L-脯氨酸顺式-4-羟化酶基因的优化设计,并引入色氨酸串联启动子,构建出1株能表达L-脯氨酸顺式-4-羟化酶的重组大肠杆菌JM109/p EHC4,从而可以将游离的L-脯氨...
关键词：L-脯氨酸顺式-4-羟化酶 密码子优化 重组大肠杆菌 微生物转化 发酵优化 
酿酒酵母rav2基因的克隆及其在大肠杆菌中的表达
《生物技术通报》2011年第3期191-195,共5页张光明 张震宇 
国家自然科学基金项目（30970058）
RAVE （regulator of the H ^＋ -ATPase of the vacuolar and endosomal membranes）复合物由Rav1p、Rav2p和Skp1p3（DE3）中进行表达。通过IPTG诱导，SDS-PAGE分析重组菌在诱导后表达出目的蛋白。目的蛋白经Ni-NTA凝胶纯化后再经质谱...
关键词：大肠杆菌 克隆表达 RAVE Rav2p 
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