国家高技术研究发展计划(2002AA245051)

作品数:28被引量:100H指数:6
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相关作者:毕英佐曹永长陈溥言焦新安潘志明更多>>
相关机构:扬州大学华南农业大学南京农业大学沈阳农业大学更多>>
相关期刊:《中国兽医杂志》《中国农业科学》《西北农林科技大学学报(自然科学版)》《病毒学报》更多>>
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减毒沙门菌运送的H9N2亚型禽流感病毒DNA疫苗的研制及其免疫试验被引量:5
《动物医学进展》2007年第9期1-6,共6页刘丽平 焦新安 张小荣 潘志明 
国家"863"高技术项目(2002AA245051);国家自然科学基金项目(30425031);教育部资助项目(FANEDD200358;175)
根据GenBank中已发表的H9N2亚型AIV HA基因序列设计并合成一对PCR引物,通过RT-PCR扩增A/Chicken/Shanghai/3/2002(H9N2)AIV毒株的HA基因,测序确认后,将其克隆入真核表达载体pVAX1和asd-pVAX1得到重组表达质粒pVAX1-HA和asd-pVAX1-HA。...
关键词:减毒沙门菌 DNA疫苗 H9N2亚型禽流感病毒 免疫效力 
口蹄疫病毒全衣壳前体(P1)重组T4噬菌体的构建和鉴定
《中国兽医学报》2007年第5期671-673,678,共4页田纯见 毕英佐 曹永长 
国家"863"计划资助项目(2002AA245051);广东省重大科技专项资助项目(2004A20403002)
以含完整的口蹄疫病毒全衣壳前体基因(P1)的质粒pP1-T为模板进行PCR扩增获得P1基因片段(约2 200bp),构建整合质粒pR-P1经引物对Pr.78/P1-A2进行PCR扩增筛选插入方向正确的重组质粒,EcoRⅠ酶切和T7启动子测序正确。以pR-P1质粒转化E.coli...
关键词:口蹄疫病毒 全衣壳前体基因 T4噬菌体 
携带新城疫病毒F基因DNA疫苗的减毒鼠伤寒沙门氏菌的构建及其免疫原性被引量:7
《中国兽医学报》2007年第1期17-21,共5页潘志明 焦新安 唐丽华 黄金林 张辉 张晓明 张小荣 刘秀梵 
国家"863"计划资助项目(2002AA245051);国家自然科学基金资助项目(30170700);江苏省自然科学基金资助项目(BK2003043)
根据GenBank中发表的新城疫病毒(NDV)融合蛋白(F)基因序列,设计1对引物,通过RT-PCR扩增出鹅源NDV分离株JS5F基因(约1700bp),测序确认后,将其克隆入真核表达载体pVAX1,获得重组真核表达质粒pVAX1-F。pVAX1-F经脂质体转染COS-7细胞,间接...
关键词:减毒沙门氏菌 DNA疫苗 新城疫病毒 免疫原性 
口蹄疫病毒泛亚株衣壳蛋白在大肠杆菌中高效表达和鉴定
《中国兽药杂志》2006年第9期1-5,共5页田纯见 毕英佐 曹永长 谢青梅 
国家"863"计划资助项目(2002AA245051);广东省重大科技专项2004A20403002)
以pT-P1质粒为模板,应用引物对P1-S2/P1-A2进行PCR扩增,获得口蹄疫病毒(FMDV)泛亚株全衣壳前体基因(P1)片段.用EcoRI 酶切并连接将P1克隆入表达载体pSOC中,以引物对Pr.78/P1-A2进行PCR扩增,鉴定P1基因插入方向正确.在大肠杆菌中以P1...
关键词:口蹄疫病毒 衣壳前体 原核表达 泛亚株 
含E.coli F因子的马立克氏病病毒1型(MDV1)转移载体的构建及初步应用
《中国农业科学》2006年第11期2341-2346,共6页邱亚峰 葛菲菲 陈溥言 
国家863高新技术发展项目(2002AA245051)
【目的】为了构建MDV1细菌人工染色体,以便快速有效地进行重组病毒的筛选,进行了含E.coli F因子的马立克氏病病毒1型(MDV1)转移载体的构建。【方法】利用DNA重组技术,构建了含有E.coli F因子的马立克氏病病毒1型(MDV1)转移载体,利用脂质...
关键词:马立克氏病病毒 细菌人工染色体 F因子 
表达GFP基因的马立克氏病病毒(MDV)转移载体的构建及初步应用被引量:2
《中国生物工程杂志》2006年第5期11-16,共6页邱亚峰 葛菲菲 张雪莲 陈溥言 
国家"863"计划资助项目(2002AA245051)
利用Primerprimer5.0软件设计两条引物,将loxP位点分别引入正、反向引物,以质粒载体pIRESgpt为模板,扩增获得LoxPCMVgptIRESLoxP基因表达盒(约2.9kb),将其克隆入质粒pBUS10(含有MDVUS10区)的BalI位点,获得重组质粒pUSgptIRES(L);对重组...
关键词:马立克氏病病毒 绿色荧光蛋白 LOXP位点 重组病毒 
囊素三肽的基因克隆和表达被引量:11
《中国兽医杂志》2006年第4期7-10,共4页李萍 毕英佐 曹永长 刘铀 谢青梅 马静云 
国家863计划(2002AA245051);广东省重点攻关项目(2003C20203)
以合成的BS1、BS2为引物扩增囊素三肽(BS)8串联片段(BS8),克隆至pBAD/Thio-TOPO载体,用pBAD/TOPO○RThio大肠杆菌表达系统进行表达,含BS8融合蛋白的分子量大小约为19kD,BS8融合蛋白主要以可溶形式存在。用蛋白质纯化树脂50%Ni-NTA纯化...
关键词:囊素三肽 克隆 表达 
表达IBDV VP2融合蛋白的重组MDV的构建及其免疫特性被引量:6
《生物工程学报》2006年第3期391-396,共6页刘红梅 秦爱建 刘岳龙 金文杰 叶建强 陈鸿军 邵红霞 李迎晓 
国家高技术研究与发展计划项目(No.2002AA245051);高等学校全国优秀博士学位论文作者专项基金项目(No.200256)资助~~
将增强型绿色荧光蛋白基因(eGFP)与鸡传染性法氏囊病病毒(IBDV)的VP2基因融合,插入马立克氏病毒(MDV)CVI988/Rispens的非必需区US10片段中,成功构建表达VP2融合蛋白的MDVCVI988转移载体pUC18-US10-VP2。将转移载体质粒与CVI988/Rispens...
关键词:CVD88/Rispens 传染性法氏囊病病毒 重组病毒 VP2 
减毒鼠伤寒沙门氏菌介导的H5亚型禽流感病毒DNA疫苗的实验免疫效果研究被引量:15
《病毒学报》2006年第1期6-10,共5页焦凤超 焦新安 潘志明 黄金林 张小荣 刘秀梵 
国家"863"高技术项目(2002AA245051);国家自然科学基金项目(30425031);教育部资助项目(FANEDD200358;175)
将运送H5亚型禽流感病毒DNA疫苗重组减毒鼠伤寒沙门氏菌以1.0×1010CFU剂量口服接种1日龄SPF雏鸡,结果表明重组菌对雏鸡具有良好的安全性。将重组菌SL7207(pVAX1-HA)和X4550(asd-pVAX1-HA)以2×109CFU的剂量两次口服免疫1日龄商品代伊...
关键词:减毒沙门氏菌 DNA疫苗 禽流感病毒 免疫效力 
不同异源启动子与MDVgB启动子及其复合启动子的活性比较被引量:1
《微生物学报》2006年第2期314-317,共4页邱亚峰 葛菲菲 徐学清 陈溥言 
国家"863计划"(2002AA245051)~~
为了选择适宜的启动子调控外源基因的表达,以改善马立克氏病病毒为载体的重组病毒的免疫保护力。将hCMV立即早期启动子及增强子、SV40早晚期启动子及增强子或hCMV立即早期增强子的部分序列分别与马立克氏病病毒(MDV)自身的囊膜糖蛋白B基...
关键词:马立克氏病病毒 复合启动子 虫荧光素酶 
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