国家高技术研究发展计划(2001AA215351)

作品数：5被引量：15H指数：2
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用反式互补表达载体实现全抗体在CHO-dhfr-细胞中的高效表达被引量：2
《生物技术通讯》2007年第5期735-738,共4页安怀杰 俞炜源 孙志伟 
国家高技术研究发展计划项目(2001AA215351)
目的:通过弱化筛选基因二氢叶酸还原酶基因(dhfr),构建双顺反子全抗体表达载体,实现全抗体在CHO细胞中的高效表达。方法:将dhfr基因分为分别编码1～105和106～187氨基酸残基的2部分,分别通过linker与亮氨酸拉链GCN4融合,分别通过内部起...
关键词：双顺反子表达载体 二氢叶酸还原酶基因 弱化 全抗体 
2个表达单元间相互位置和转录方向对表达的影响
《生物技术通讯》2007年第3期377-380,共4页安怀杰 俞炜源 孙志伟 
国家高技术研究发展计划项目(2001AA215351)
目的:研究质粒表达载体中2个表达单元间相互位置和转录方向关系对表达的影响,找出利于2个表达单元表达的优化的相互关系。方法:以全抗体为研究对象,构建了轻重链方向不同的2种相互关系的单质粒表达载体pIRESdhfrA和pIRESdhfrB,转染CHO-d...
关键词：表达载体 表达盒 转录方向 
CHO/dhfr^-细胞定点整合高效表达系统的建立被引量：6
《生物工程学报》2007年第4期756-762,共7页周宏 刘志刚 孙志伟 俞炜源 
国家高技术"863"计划基金资助(No2001AA215351)~~
为了克服随机整合建立高表达细胞株时“位置效应”所带来的不可预知的后果,我们尝试建立基于定点整合的CHO高效表达系统。首先设计一个新的高效筛选载体pMCEscan。该载体含有报告基因(k2tPA)、扩增基因(dhfr)、重组酶识别序列(FRT)及筛...
关键词：CHO细胞 定点整合 高效表达 重组蛋白 
哺乳动物细胞高效表达载体的优化被引量：2
《生物技术通讯》2006年第5期692-695,共4页张国强 刘志刚 刘珊 俞炜源 
国家高技术研究发展计划项目(2001AA215351)
目的:优化哺乳动物细胞表达系统,提高目的基因的表达效率。方法:以组织型纤溶酶原激活剂(tPA)为报告基因,利用本实验室建立的CHOfrt/dhfr-细胞定点整合表达系统,对多种表达调控元件(包括hCMV和hEF-1α启动子、hCMV增强子、hEF-1α1st内...
关键词：CHO-dhfr^-细胞 表达调控元件 优化 表达载体 
重组单链抗体-低分子质量尿激酶融合蛋白在CHO细胞中的抗降解研究被引量：5
《生物化学与生物物理进展》2005年第6期544-550,共7页刘志刚 林建波 杜韫 俞炜源 
国家高技术'863'计划资助项目(2001AA215351)~~
抗人纤维蛋白单链抗体-低分子质量尿激酶(IIn-UK)融合蛋白,兼有单链抗体对纤维蛋白的亲和性和尿激酶的溶栓活性,有望开发成为新型导向溶栓药物.但基于通用连接肽(G4S)3的IIn-linker-UK融合蛋白在CHO细胞中表达时出现明显的降解.为了解...
关键词：融合蛋白 连接肽 降解 CHO细胞 
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