国家自然科学基金(30170835)

作品数：8被引量：26H指数：3
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相关期刊：《Acta Biochimica et Biophysica Sinica》《南京医科大学学报（自然科学版）》更多>>
相关主题：淡色库蚊抗药性克隆克隆与序列分析溴氰菊酯更多>>
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淡色库蚊抗性相关基因——NYD-GBE基因的克隆与分析被引量：2
《南京医科大学学报（自然科学版）》2006年第7期477-480,共4页孙静 钱瑾 孙立新 胡小邦 孙艳 马磊 朱昌亮 
国家自然科学基金资助(NO30170835)
目的:获取淡色库蚊抗药性相关NYD-GBE基因cDNA全长序列并验证其在抗性品系和敏感品系中的表达差异。方法:根据抑制性差减杂交(SSH)结合cDNA芯片分离获得的淡色库蚊抗性相关NYD-GBE基因片段设计引物,采用快速扩增cDNA末端法(rapidamplifi...
关键词：淡色库蚊 抗药性 NYD-GBE基因 RACE 克隆 定量PCR 
用荧光半定量RT-PCR检测蚊溴氰菊酯抗性被引量：3
《南京医科大学学报（自然科学版）》2005年第7期447-449,共3页马磊 沈波 李秀兰 胡小邦 朱昌亮 
国家自然科学基金资助项目(30170835);南京师范大学生命科学学院江苏省资源生物技术重点实验室开放研究课题资助项目(164070300801)
目的:建立蚊对菊酯类杀虫剂抗性的PCR检测方法。方法:应用荧光半定量RT鄄PCR,检测经SSH结合cDNA芯片分离鉴定的淡色库蚊对溴氰菊酯抗性相关基因NYD鄄Tr在抗性品系与敏感品系中的表达水平。结果:经荧光半定量RT鄄PCR检测,NYD鄄Tr进入指...
关键词：淡色库蚊 抗药性 溴氰菊酯 荧光半定量RT-PCR 
淡色库蚊抗药性相关胰蛋白酶基因稳定转染细胞系的建立与表达鉴定被引量：1
《中国人兽共患病杂志》2005年第6期454-457,共4页公茂庆 顾燕 胡小邦 孙艳 马磊 李秀兰 朱昌亮 
国家自然科学基金资助项目(No.30170835);江苏省高校自然科学基金资助项目(03KJB180082)
目的为进一步研究胰蛋白酶基因与抗药性的关系。方法采用PCR方法,以淡色库蚊抗性品系cDNA文库为模板,扩增出抗药性品系高表达的胰蛋白酶(trypsin)基因编码区。T/A克隆测序鉴定后,亚克隆到昆虫细胞表达载体pIE13,构建重组昆虫细胞表达载...
关键词：胰蛋白酶基因 昆虫细胞表达载体 抗药性 基因转染 C6/36细胞 
淡色库蚊抗药性相关新基因——视蛋白基因的克隆与分析被引量：3
《南京医科大学学报（自然科学版）》2005年第5期321-323,共3页孙艳 杨明夏 马磊 李秀兰 公茂庆 胡小邦 顾燕 朱昌亮 
国家自然科学基金资助项目(30170835)
目的:获取淡色库蚊抗药性相关视蛋白基因(NYD鄄OP)全长cDNA序列。方法:根据抑制性差减杂交(SSH)结合cDNA芯片分离获得的淡色库蚊抗药性相关视蛋白基因的289bp片段,设计上、下游引物,分别以cDNA文库和反转录二链产物为模板,采用快速扩增c...
关键词：淡色库蚊 抗药性 克隆 视蛋白基因 
蚊抗药性相关糜蛋白酶基因稳定转染细胞系的建立与表达鉴定被引量：1
《中国寄生虫病防治杂志》2005年第2期81-84,共4页顾燕 公茂庆 胡小邦 孙艳 马磊 李秀兰 朱昌亮 
国家自然科学基金资助项目(No.30170835);江苏省高校自然科学基金资助项目(No.03KJB180082);江苏省资源生物技术重点实验室开放研究课题资助项目。
目的建立抗药性相关糜蛋白酶基因稳定转染细胞系。方法采用PCR方法,以淡色库蚊抗药性品系cD NA文库为模板,扩增出抗药性品系高表达的糜蛋白酶基因编码区;经T/A克隆测序鉴定后,亚克隆到真核表达载体pIE13,构建重组昆虫细胞表达载体pIE13/...
关键词：糜蛋白酶基因 昆虫细胞表达载体 抗药性 基因转染 C6/36细胞 
淡色库蚊抗溴氰菊酯品系CYP4家族新成员基因克隆及序列分析被引量：4
《中国寄生虫病防治杂志》2004年第2期65-67,共3页滕达 李秀兰 公茂庆 马磊 陆洵蔚 孙艳 朱昌亮 
国家自然科学基金资助项目 (No .30 1 70 835) ;江苏省教育厅自然科学基金资助项目 (No.0 1KJB31 0 0 0 6) ;南京师范大学生命科学学院江苏省资源生物技术重点实验室开放研究课题资助项目
目的　获取淡色库蚊CYP4家族新基因。　方法　根据CYP4氨基酸保守序列设计一对简并引物 ,采用RT PCR的方法 ,从淡色库蚊抗溴氰菊酯品系四龄幼虫总RNA中扩增出与设计相符的基因片段。利用T/A克隆方法 ,将获得的基因片段克隆入 pGEM Teas...
关键词：淡色库蚊 细胞色素P450 基因克隆 CYP4 
淡色库蚊β-肌动蛋白基因克隆与序列分析被引量：8
《中国寄生虫病防治杂志》2003年第2期65-68,共4页胡莺 沈波 杨明夏 马磊 李秀兰 田海生 朱昌亮 
国家自然科学基金资助课题 (No.39970 666和 No.30 1 70 835)
目的　获取淡色库蚊 β-肌动蛋白全长基因。　方法　采用 RACE法筛选淡色库蚊溴氰菊酯抗性品系 c DNA表达文库 ,获得 β-肌动蛋白基因的 5′和 3′RACE序列 ,然后通过 T/ A克隆插入 p GEM- T质粒载体 ,经过测序、拼接获取全长序列。用 B...
关键词：淡色库蚊 Β-肌动蛋白 克隆 序列分析 cDNA快速末端扩增 
淡色库蚊抗药性相关胰蛋白酶基因cDNA全长克隆与序列分析被引量：6
《生物化学与生物物理学报》2002年第1期28-32,共5页沈波 田海生 马磊 李秀兰 郑仕中 周大虎 朱昌亮 
国家自然科学基金资助项目 (No .39970 6 6 6和No .30 170 835 )~~
用逆Northern印迹和Northern印迹法进一步鉴定淡色库蚊对溴氰菊酯抗药性和敏感性品系胰蛋白酶的表达差异 ,结果显示 ,胰蛋白酶基因在抗药性品系中的表达量分别是敏感性品系的 4.3和 3.9倍。采用RACE法筛选cDNA文库 ,获得总长度为 90 9b...
关键词：淡色库蚊 抗药性 胰蛋白酶基因 逆Northern印迹 NORTHERN印迹 cDNA 全长克隆 序列分析 
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