广东省农业科技重大专项资助项目

作品数：53被引量：339H指数：10
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相关机构：广东省农业科学院华南农业大学中国水产科学研究院珠江水产研究所仲恺农业工程学院更多>>
相关期刊：《食品科技》《动物医学进展》《畜牧兽医学报》《中国兽医杂志》更多>>
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副猪嗜血杆菌外膜蛋白P5的B细胞抗原表位鉴定被引量：4
《中国兽医学报》2014年第1期50-55,共6页李淼 李春玲 岳磊 宋帅 杨冬霞 
广东省农业科技重大专项资助项目(2011A020101008);广州市农业科技重大专项资助项目(2009A1-E041)
副猪嗜血杆菌外膜蛋白P5能诱导机体产生免疫保护反应，同时可以用于特异性的血清学诊断，本试验选取P5蛋白进行抗原表位鉴定。首先通过PCR扩增P5F1（1～204aa），P5F2（170～296aa）及P5F3（280～371aa）3个片段，PCR产物分别定向克隆...
关键词：副猪嗜血杆菌 外膜蛋白P5 抗原表位 
噬菌体展示技术筛选副猪嗜血杆菌外膜蛋白P5的抗原表位被引量：1
《中国兽医学报》2013年第12期1818-1821,1827,共5页许达 李春玲 李淼 宋帅 杨冬霞 陈金顶 
广东省农业科技重大专项资助项目(2011A020101008);广州市农业科技重大专项资助项目(2009A1-E041)
为了研究副猪嗜血杆菌(HPS)外膜蛋白P5的抗原表位,应用噬菌体展示随机12肽库,以抗HPS外膜蛋白P5的单克隆抗体作为固相分子,进行了3轮筛选。对随机挑选出的10个分离间隔良好的噬菌斑进行ELISA和Western blot等检验,最终确定了4个各结果...
关键词：副猪嗜血杆菌 外膜蛋白 噬菌体展示 模拟抗原表位 
副猪嗜血杆菌外膜蛋白P5的分段表达及免疫学性质分析被引量：3
《华北农学报》2013年第5期48-52,共5页谢乐新 李淼 宋帅 岳磊 杨冬霞 李春玲 
广东省农业科技重大专项(2009A020101006);广州市农业科技重大专项(2009A1-E041)
为获得副猪嗜血杆菌外膜蛋白P5的分段表达产物,并对各片段的免疫学性质进行鉴定。采用生物信息学软件分析Omp P5全长基因,设计3对分段引物,PCR分别从HPS汕头分离株(H0801)Omp P5中扩增出P5F1、P5F2和P5F3基因片段,构建于pET-32a(+)原核...
关键词：副猪嗜血杆菌 外膜蛋白P5 抗原性分析 
4512血清型副猪嗜血杆菌外膜蛋白提取及分析被引量：1
《中国兽医杂志》2013年第8期27-30,共4页臧莹安 李婉雁 庞木生 李淼 宋帅 李春玲 
广东省农业科技重大专项(2009A020101006);广州市农业科技重大专项(2009A1-E041);广东省兽医公共卫生公共实验室开放基金项目(GSKJ090202)
采用超声波裂解技术,用膜裂解剂十二烷基肌氨酸提取副猪嗜血杆菌(Haemophilus parasuis,Hps)3种血清型(4、5、12)的外膜蛋白(OMP),用Bradford方法测定OMP浓度,将OMP进行SDS-PAGE凝胶电泳,以观察这3种血清型OMP的蛋白质条带分布。结果显...
关键词：副猪嗜血杆菌 外膜蛋白 SDS-PAGE 
重组副猪嗜血杆菌血清5型OmpP5高免血清制备及其杀菌活性和交叉反应性分析被引量：1
《中国免疫学杂志》2013年第4期362-365,共4页秦翠丽 李春玲 高祥辉 
广东省农业科技重大专项(2009A0201006)资助
目的:探讨致病性副猪嗜血杆菌(Haemophilus parasuis,HPS)血清5型外膜蛋白Omp P5高免血清的杀菌活性和交叉反应性。方法:制备HPS血清5型外膜蛋白Omp P5抗原,免疫BALB/c小鼠制备高免血清,间接ELISA法测定效价,体外杀菌试验测定杀菌率,Wes...
关键词：副猪嗜血杆菌 OmpP5 高免血清 杀菌活性 交叉反应性 
副猪嗜血杆菌分离株hhdA和hhdB基因的克隆及同源性分析被引量：3
《中国兽医学报》2012年第11期1662-1668,共7页臧莹安 陈国开 庞木生 宋帅 李淼 李春玲 
广东省农业科技重大专项(2009A020101006);广州市农业科技重大专项(2009A1-E041);广东省兽医公共卫生公共实验室开放基金资助项目(GSKJ090202)
用预先设计好的hhdA和hhdB基因的PCR扩增引物,扩增不同血清型的副猪嗜血杆菌分离株中的hhdA和hhdB基因,将扩增产物与克隆载体pMDTM18-T连接,转化入感受态细胞DH5α,通过PCR、双酶切及序列测定,测序结果表明:扩增的16株HPS菌中有11株能...
关键词：副猪嗜血杆菌 hhdA基因 hhdB基因 克隆 序列分析 
副猪嗜血杆菌OMP5单克隆抗体的制备与鉴定被引量：2
《中国兽医学报》2012年第10期1468-1472,共5页秦翠丽 高祥辉 李春玲 
广东省农业科技重大专项资助项目(2009A0201006);广州市农业科技重大专项资助项目(2009A1-E04)
用副猪嗜血杆菌(HPS)血清5型灭活菌液免疫BALB/c小鼠,取其脾细胞与Sp2/0骨髓瘤细胞融合,以HPS外膜蛋白5(OMP5)为抗原,经间接ELISA法筛选阳性融合孔,并用有限稀释法对筛选的阳性孔进行亚克隆,获得2株分泌抗HPS OMP5单克隆抗体的杂交瘤细...
关键词：副猪嗜血杆菌 OMP5 单克隆抗体 杂交瘤技术 
副猪嗜血杆菌OMP P5间接ELISA抗体检测方法优化被引量：2
《动物医学进展》2012年第9期6-9,共4页臧莹安 黄彩梅 李婉雁 李淼 宋帅 李春玲 
广东省农业科技重大专项(2009A020101006);广州市农业科技重大专项(2009A1-E041);广东省兽医公共卫生公共实验室开放基金项目(GSKJ090202)
利用副猪嗜血杆菌(HPS)OMP P5基因表达并纯化复性后蛋白作为包被蛋白,通过对最佳加样作用时间的确定和最佳酶标二抗反应时间等条件的探索优化,建立针对副猪嗜血杆菌外膜蛋白P5(OMPP5)的间接ELISA抗体检测方法,通过对进行和未进行HPS免...
关键词：副猪嗜血杆菌 外膜蛋白P5 酶联免疫吸附试验 
噬菌体展示技术及其在动物病毒性疾病中的应用被引量：5
《中国畜牧兽医》2012年第5期60-63,共4页许达 黄小健 李春玲 陈金顶 李淼 宋帅 
广东省农业科技重大专项(2009A020101006);广州市农业科技重大专项(2009A1-E041)
噬菌体展示技术是在20世纪80年代中期兴起的一项技术,该技术可以实现外源蛋白质或多肽基因的表达产物与噬菌体衣壳蛋白融合,进而展示到噬菌体表面。近年来,噬菌体展示技术在动物病毒性疾病中的应用范围越来越广,在筛选动物病毒抗原表位...
关键词：噬菌体展示技术 病毒 抗原表位 抗病毒多肽 疫苗 
广东部分猪场副猪嗜血杆菌病的流行病学调查被引量：8
《中国兽医杂志》2012年第4期18-20,共3页臧莹安 庞木生 黄彩梅 李淼 宋帅 李春玲 
广东省农业科技重大专项(2009A020101006);广州市农业科技重大专项(2009A1-E041);广东省兽医公共卫生公共实验室开放基金项目(GSKJ090202)
为了解副猪嗜血杆菌病(Haemophilus parasuis,HPS)在广东省部分地区的流行情况,通过针对副猪嗜血杆菌外膜蛋白P2(OMPP2)的间接ELISA法对广东省部分猪场的376份猪血清样本进行了抽样检测。结果显示,副猪嗜血杆菌的阳性率为23.8%,其中母...
关键词：副猪嗜血杆菌 ELISA 流行病学 阳性率 
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