国家自然科学基金(30772002)

作品数:22被引量:37H指数:3
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可复制型抗肿瘤DNA疫苗PSCK-2PFcGB的构建及体内外表达被引量:5
《南方医科大学学报》2011年第6期937-942,共6页张亮 阎瑾琦 王越 肖毅 高昆 董金凯 王博 于继云 
国家高技术研究发展计划(863)资助项目(2007AA02Z451);国家自然科学基金项目(30772002)~~
目的构建以塞姆利基森林病毒复制子载体为基础的可复制型抗肿瘤DNA疫苗PSCK-2PFcGB,验证其在人胚肾293T细胞及免疫小鼠肌肉组织内的表达情况。方法首先用NheI酶切既往构建的pVAX1-2PFcGB重组质粒,补平酶切后的粘末端,然后再用限制性内切...
关键词:SFV DNA疫苗 融合肿瘤抗原 体内外表达 
LINE-1编码蛋白L1-ORF1的原核表达纯化和多克隆抗体制备被引量:3
《中国生物工程杂志》2010年第10期7-11,共5页胡明明 朱运峰 王越 王宇 张亮 高旭东 董金凯 于继云 
国家科技重大专项基金(2008ZX10002-003);国家自然科学基金(30772002)资助项目
目的:制备具有肿瘤组织特异性表达的L1-ORF1蛋白多克隆抗体并进行初步应用研究。方法:采取基因工程表达方法制备L1-ORF1蛋白,免疫家兔制备多克隆抗体,间接ELISA检测抗体效价,Western blot和细胞免疫荧光方法检测抗体特异性,免疫检测验...
关键词:L1-ORF1p 原核表达 蛋白纯化 多克隆抗体 间接免疫荧光 
人前列腺干细胞抗原的原核表达、纯化及鉴定被引量:1
《解放军医学杂志》2010年第8期986-988,共3页任杰 高江平 阎瑾琦 江乐 于继云 
国家高技术研究发展计划(2006AA02A237,2007AA02Z451);国家自然科学基金(30772002)
目的构建包含人前列腺干细胞抗原(PSCA)的原核表达质粒,并进行诱导表达、蛋白纯化及鉴定。方法通过PCR扩增人PSCA基因片段,与过渡载体pGEM(-TEasy连接后进行测序鉴定,鉴定正确后,将PSCA基因片段酶切并插入含有谷胱甘肽s-转移本科GST标...
关键词:PSCA蛋白  质粒 重组融合蛋白质类 
人hCGβ真核表达载体的构建及稳定转染B16细胞系的建立被引量:2
《细胞与分子免疫学杂志》2010年第7期623-626,共4页张亮 王宇 江乐 阎瑾琦 王越 胡明明 于继云 
国家高技术研究发展计划(863)资助项目(2006AA02A237;2007AA02Z451);国家自然科学基金资助项目(30772002)
目的:构建人hCGβ真核表达载体,稳定转染入小鼠黑色素瘤B16细胞,建立稳定表达人hCGβ的小鼠黑色素瘤细胞系。方法:采用PCR方法扩增出人hCGβ全长基因的cDNA编码区序列,利用DNA重组技术将其定向插入到真核表达载体pIRES—neo中,并...
关键词:HCGΒ 稳定转染 小鼠黑色素瘤细胞 肿瘤免疫治疗 
人PSCA真核表达质粒的构建及稳定转染B16细胞系的建立被引量:1
《中国免疫学杂志》2010年第10期867-870,共4页任杰 高江平 阎瑾琦 王伟 肖毅 江乐 于继云 
国家863基金项目(2006AA02A237;2007AA02Z451);国家自然科学基金项目(30772002)
目的:构建真核表达质粒pcDNA3.1-PSCA,通过稳定转染建立高效表达人前列腺干细胞抗原(PSCA)的小鼠黑色素瘤B16细胞系。方法:利用PCR扩增出人PSCA全长基因的cDNA编码区序列,使用基因重组技术将其克隆到真核表达载体pcDNA3.1中,得到重组表...
关键词:前列腺干细胞抗原 稳定转染 肿瘤免疫治疗 
人源抗HBsAg dsFv抗体靶向干扰素重组质粒的构建与表达被引量:2
《解放军医学杂志》2010年第4期391-394,共4页江乐 阎瑾琦 郭炳冉 任杰 于继云 
国家科技重大专项基金(2008ZX10002-003);国家自然科学基金(30772002)
目的构建抗体靶向干扰素的重组表达质粒pEE14.1-dsFvαpr+,并在真核细胞中验证重组质粒的表达情况。方法通过重叠延伸PCR将dsFv抗体重链基因与带正电荷的DNA负载区基因融合,并在抗体轻链α干扰素融合基因3′端连入6×His标签。先在过渡...
关键词:干扰素Α 肝炎表面抗原 乙型 二硫键稳定性Fv抗体 质粒 基因表达 
稳定表达人survivin基因的B16细胞系的建立与鉴定被引量:1
《第二军医大学学报》2010年第4期359-363,共5页张亮 李潇潇 阎瑾琦 王越 肖毅 高昆 于继云 
国家自然科学基金(30772002);国家高技术研究发展计划("863"计划;2007AA02Z451)~~
目的构建人survivin真核表达载体,稳定转染入小鼠黑素瘤B16细胞,建立稳定表达人survivin的小鼠黑素瘤细胞系。方法采用PCR方法扩增出人survivin全长基因的cDNA编码区序列,利用DNA重组技术将其定向插入到真核表达载体pIRES-neo中,并加入...
关键词:SURVIVIN 稳定转染 实验性黑素瘤 基因疫苗 肿瘤免疫治疗 
DC-SIGN真核表达载体的构建及其稳定转染BHK21细胞系的建立被引量:3
《解放军医学杂志》2010年第3期304-306,共3页王宇 阎瑾琦 张亮 王越 于继云 
国家科技重大专项基金项目(2008ZX10002-003);国家自然科学基金项目(30772002)
目的构建DC-SIGN分子真核表达载体,获得可稳定表达DC-SIGN分子的BHK21细胞系。方法以pUNO-hDC-SIGN1Aa质粒为模板,通过PCR方法扩增人DC-SIGN基因,经过NotI和BamHI双酶切之后,将其克隆入真核表达载体pIRES-neo,构建真核表达载体pIRES-neo...
关键词:基因 DC-SIGN BHK21细胞系 树突细胞 
人DC-SIGN真核表达载体的构建及表达
《军医进修学院学报》2010年第1期45-47,共3页王宇 阎瑾琦 余云舟 贾锐 张亮 张巍 李韧 高明 于继云 
国家"863"基金项目 (2006AA02A237; 2007AA02Z451);国家自然科学基金项目 (30772002)~~
目的构建含有FLAG标签的人DC-SIGN真核表达载体,并在人胚肾293T细胞中进行表达。方法通过PCR方法获得含有FLAG标签的人DC-SIGN分子基因,将其插入到真核表达载体pIRES-neo中。构建的重组质粒pIRES-neo-FLAG-DC-SIGN转染293T细胞,利用流...
关键词:DC-SIGN 基因表达 293T细胞 
不同方式递送质粒DNA诱导体内表达效果的实验研究被引量:4
《军医进修学院学报》2010年第1期48-49,60,共3页张亮 李潇潇 韩刚 董金凯 阎瑾琦 肖毅 于继云 
国家"863"基金项目(2006AA02A237; 2007AA02Z451);国家自然科学基金项目 (30772002)~~
目的比较不同途径递送质粒DNA至Balb/c小鼠体内所诱导的报告基因表达效果。方法将编码荧光素酶(1uc3蛋白的重组质粒(pGL-3-CMV)或空载体质粒pGL-3-basic以肌肉注射或电脉冲方法将10μg或100μg上述质粒注入小鼠股四头肌,基因枪法...
关键词:基因递送 质粒 DNA 荧光素酶基因 生物弹道技术 
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