国家自然科学基金(30370072)

作品数：10被引量：16H指数：2
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相关期刊：《浙江大学学报（医学版）》《畜牧兽医学报》《中国生物制品学杂志》《中国人兽共患病学报》更多>>
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靶向敲除问号钩端螺旋体鞭毛相关fliN基因及其突变株致病性变化被引量：2
《中华微生物学和免疫学杂志》2009年第8期677-682,共6页楼宏强 廖苏梅 胡野 严杰 
基金项目：国家自然科学基金资助项目（30370072）
目的了解问号钩端螺旋体（简称钩体）鞭毛相关Ⅲ型分泌系统∥洲基因产物的致病性。方法构建基因打靶载体p2NIL fliN-amp，采用基于自杀质粒与染色体同源序列重组的靶基因敲除技术构建不表达FliN的问号钩体赖型56601株突变株，采用PCR、...
关键词：问号钩端螺旋体 fliN基因 基因敲除 突变株 致病性 
fliR基因与问号钩端螺旋体黏附及损伤细胞功能相关性的研究被引量：1
《浙江大学学报（医学版）》2008年第6期572-578,共7页阮萍 王欣莹 孙爱华 李世军 严杰 
国家自然科学基金资助项目(30370072)
目的:了解问号钩端螺旋体(简称钩体)fliR基因的致病性。方法:分别从问号钩体黄疸出血群56601株DNA和pET42a质粒中扩增fliR基因和kana基因。构建fliR基因自杀质粒,并设计和合成特异性siRNA。采用分别基于自杀质粒的基因敲除、基于siRNA...
关键词：钩端螺旋体 问号/致病力 基因表达 细胞凋亡 Ⅲ型分泌系统 fliR基因 黏附 坏死 
问号钩端螺旋体鞭毛蛋白相关蛋白FliH／I／Y／N基因原核表达和膜定位被引量：1
《中华微生物学和免疫学杂志》2008年第7期597-601,共5页徐韩飞 阮萍 廖苏梅 杨平 毛亚飞 李立伟 严杰 
基金项目：国家自然科学基金面上项目（30370072）
目的克隆问号钩端螺旋体（简称钩体）鞭毛相关蛋白编码基因fliH、fliI、fliY和fliN并构建其原核表达系统，制备表达产物抗血清并了解其蛋白的定位。方法以苯酚-氯仿法提取的问号钩体黄疸出血群赖型赖株基因组DNA为模板，用PCR扩增全长f...
关键词：问号钩端螺旋体 鞭毛相关蛋白 基因克隆 原核表达 免疫原性/定位 
问号钩端螺旋体fliN基因原核表达及其产物的鉴定被引量：2
《中国人兽共患病学报》2008年第1期30-32,62,共4页孙琦 陈蔚青 孙爱华 严杰 
国家自然科学基金面上项目资助(30370072)
目的克隆问号钩端螺旋体(简称钩体)黄疸出血群赖型赖株鞭毛相关基因fliN并构建其原核表达系统,鉴定表达产物的免疫性。方法提取钩体株基因组DNA,高保真PCR扩增全长fliN基因片断,T-A克隆后测序。按常规方法构建fliN基因原核表达系统,并用...
关键词：问号钩端螺旋体 fliN基因 克隆 原核表达 鉴定 
感染细胞内问号钩端螺旋体吞噬泡形成及其与溶酶体的融合
《中华微生物学和免疫学杂志》2007年第9期792-796,共5页刘云英 罗冬娇 郑伟 李立伟 严杰 
国家自然科学基金项目(30370072)
目的了解问号钩端螺旋体(简称钩体)感染宿主细胞后吞噬泡形成、吞噬泡与溶酶体融合及感染细胞超微结构改变。方法用问号钩体黄疸出血群赖型56601株感染小鼠单核巨噬样细胞J774A.1和猴肾成纤维细胞Cos-7。采用透射电镜观察J774A.1细胞和C...
关键词：问号钩端螺旋体 J774A.1细胞/Cos-7细胞 吞噬泡/溶酶体 融合 超微结构改变 
问号钩体lipL32/1-lipL41/2融合基因的构建及其表达产物免疫性的鉴定(英文)
《中国人兽共患病学报》2007年第5期427-432,共6页周金成 罗冬娇 严杰 
This subject was supported by Chinese National Natural ScienceFoundation (No .30370072);Key Project of Science and Tech-nique Plan of Zhejiang Province (2006C24003)
目的构建问号钩端螺旋体(简称钩体)lipL32/1-lipL41/2融合基因及其原核表达系统并鉴定其表达产物的免疫性。方法采用连接引物PCR构建lipL32/1-lipL41/2融合基因,常规方法构建其原核表达系统。采用SDS-PAGE和BioRad凝胶图象分析系统检测...
关键词：问号钩端螺旋体 lipL32基因 lipL41基因 融合基因 构建/表达 免疫性 
问号钩端螺旋体病人血清中LipL21抗体检测被引量：1
《中华微生物学和免疫学杂志》2007年第3期291-292,共2页罗冬娇 郭宗琪 孙百莉 蒋晓崎 周金成 严杰 
国家自然科学基金项目（30370072）;浙江省科技计划国际合作重点项目（2006C24003）;浙江省教育厅科研基金（20050716）
寻找钩体属特异性保护抗原，对于研制通用型钩体疫苗及实验室诊断试剂盒均有重要价值。Cullen等首先报告了致病性问号钩体均具有属特异性lipL21脂蛋白基因。我们也曾证实我国15群15型问号钩体参考标准株均含有序列保守的lipL21基因。已...
关键词：抗体检测 病人血清 问号钩端螺旋体 lipL21基因 显微镜凝集试验 特异性保护 钩体疫苗 免疫保护作用 
我国主要问号钩端螺旋体血清群lipL21基因序列及其产物免疫反应性分析被引量：7
《中华微生物学和免疫学杂志》2006年第11期979-984,共6页罗冬娇 胡野 孙百莉 田菊霞 胡美多 严杰 
国家自然科学基金项目(30370072);浙江省教育厅科研基金(20050716)
目的分析我国15群15型问号钩端螺旋体(简称钩体)参考标准株外膜脂蛋白lipL21基因序列,构建该基因原核表达系统并鉴定表达产物的免疫原性,了解lipL21基因自然表达状况。方法高保真PCR扩增上述问号钩体株及双曲钩体Patoc型PatocⅠ株基因组...
关键词：钩端螺旋体 lipL21基因 属特异性蛋白抗原 重组表达 外膜蛋白 免疫原性 
利用SYBR Green检测衣原体Real-Time PCR方法的建立被引量：2
《畜牧兽医学报》2006年第1期84-90,共7页杨建民 郝永新 赵德明 何诚 
国家自然科学基金项目(30370072);北京自然科学基金项目(6052014)
利用SYBR Green建立了检测种特异性衣原体的Real-Time PCR方法。本方法应用衣原体种特异性的高度保守特异引物，能够扩增627bp特异片段；使用定量标准基因组DNA，本方法能准确检测最少250fg衣原体DNA。Real-TimePCR方法与免疫荧光方法...
关键词：SYBR Green 衣原体 REAL-TIME PCR 检测 
问号钩端螺旋体鞭毛相关基因flhA、flhB_2和fliR的克隆及原核表达系统的构建被引量：1
《中国生物制品学杂志》2006年第1期5-7,11,共4页王欣莹 范洪学 严杰 
国家自然科学基金资助项目(30370072)
目的克隆问号钩端螺旋体鞭毛相关基因flhA、flhB2和fliR,并构建其原核表达载体。方法按常规苯酚-氯仿法提取问号钩端螺旋体黄疸出血群赖型56601株基因组DNA,高保真PCR扩增flhA、flhB2和fliR基因片段,T-A克隆后测序,构建原核表达载体,采...
关键词：问号钩端螺旋体 鞭毛相关基因 克隆 表达 
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