广东省农业科技重大专项资助项目(2009A020101006)

作品数：14被引量：50H指数：4
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相关作者：李春玲宋帅李淼杨冬霞臧莹安更多>>
相关机构：广东省农业科学院华南农业大学仲恺农业工程学院广东省农业科学院动物卫生研究所更多>>
相关期刊：《黑龙江畜牧兽医》《广东农业科学》《中国兽医学报》《河北科技师范学院学报》更多>>
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副猪嗜血杆菌外膜蛋白P5的分段表达及免疫学性质分析被引量：3
《华北农学报》2013年第5期48-52,共5页谢乐新 李淼 宋帅 岳磊 杨冬霞 李春玲 
广东省农业科技重大专项(2009A020101006);广州市农业科技重大专项(2009A1-E041)
为获得副猪嗜血杆菌外膜蛋白P5的分段表达产物,并对各片段的免疫学性质进行鉴定。采用生物信息学软件分析Omp P5全长基因,设计3对分段引物,PCR分别从HPS汕头分离株(H0801)Omp P5中扩增出P5F1、P5F2和P5F3基因片段,构建于pET-32a(+)原核...
关键词：副猪嗜血杆菌 外膜蛋白P5 抗原性分析 
4512血清型副猪嗜血杆菌外膜蛋白提取及分析被引量：1
《中国兽医杂志》2013年第8期27-30,共4页臧莹安 李婉雁 庞木生 李淼 宋帅 李春玲 
广东省农业科技重大专项(2009A020101006);广州市农业科技重大专项(2009A1-E041);广东省兽医公共卫生公共实验室开放基金项目(GSKJ090202)
采用超声波裂解技术,用膜裂解剂十二烷基肌氨酸提取副猪嗜血杆菌(Haemophilus parasuis,Hps)3种血清型(4、5、12)的外膜蛋白(OMP),用Bradford方法测定OMP浓度,将OMP进行SDS-PAGE凝胶电泳,以观察这3种血清型OMP的蛋白质条带分布。结果显...
关键词：副猪嗜血杆菌 外膜蛋白 SDS-PAGE 
副猪嗜血杆菌分离株hhdA和hhdB基因的克隆及同源性分析被引量：3
《中国兽医学报》2012年第11期1662-1668,共7页臧莹安 陈国开 庞木生 宋帅 李淼 李春玲 
广东省农业科技重大专项(2009A020101006);广州市农业科技重大专项(2009A1-E041);广东省兽医公共卫生公共实验室开放基金资助项目(GSKJ090202)
用预先设计好的hhdA和hhdB基因的PCR扩增引物,扩增不同血清型的副猪嗜血杆菌分离株中的hhdA和hhdB基因,将扩增产物与克隆载体pMDTM18-T连接,转化入感受态细胞DH5α,通过PCR、双酶切及序列测定,测序结果表明:扩增的16株HPS菌中有11株能...
关键词：副猪嗜血杆菌 hhdA基因 hhdB基因 克隆 序列分析 
副猪嗜血杆菌OMP P5间接ELISA抗体检测方法优化被引量：2
《动物医学进展》2012年第9期6-9,共4页臧莹安 黄彩梅 李婉雁 李淼 宋帅 李春玲 
广东省农业科技重大专项(2009A020101006);广州市农业科技重大专项(2009A1-E041);广东省兽医公共卫生公共实验室开放基金项目(GSKJ090202)
利用副猪嗜血杆菌(HPS)OMP P5基因表达并纯化复性后蛋白作为包被蛋白,通过对最佳加样作用时间的确定和最佳酶标二抗反应时间等条件的探索优化,建立针对副猪嗜血杆菌外膜蛋白P5(OMPP5)的间接ELISA抗体检测方法,通过对进行和未进行HPS免...
关键词：副猪嗜血杆菌 外膜蛋白P5 酶联免疫吸附试验 
噬菌体展示技术及其在动物病毒性疾病中的应用被引量：5
《中国畜牧兽医》2012年第5期60-63,共4页许达 黄小健 李春玲 陈金顶 李淼 宋帅 
广东省农业科技重大专项(2009A020101006);广州市农业科技重大专项(2009A1-E041)
噬菌体展示技术是在20世纪80年代中期兴起的一项技术,该技术可以实现外源蛋白质或多肽基因的表达产物与噬菌体衣壳蛋白融合,进而展示到噬菌体表面。近年来,噬菌体展示技术在动物病毒性疾病中的应用范围越来越广,在筛选动物病毒抗原表位...
关键词：噬菌体展示技术 病毒 抗原表位 抗病毒多肽 疫苗 
广东部分猪场副猪嗜血杆菌病的流行病学调查被引量：8
《中国兽医杂志》2012年第4期18-20,共3页臧莹安 庞木生 黄彩梅 李淼 宋帅 李春玲 
广东省农业科技重大专项(2009A020101006);广州市农业科技重大专项(2009A1-E041);广东省兽医公共卫生公共实验室开放基金项目(GSKJ090202)
为了解副猪嗜血杆菌病(Haemophilus parasuis,HPS)在广东省部分地区的流行情况,通过针对副猪嗜血杆菌外膜蛋白P2(OMPP2)的间接ELISA法对广东省部分猪场的376份猪血清样本进行了抽样检测。结果显示,副猪嗜血杆菌的阳性率为23.8%,其中母...
关键词：副猪嗜血杆菌 ELISA 流行病学 阳性率 
应用抑制性差减杂交筛选副猪嗜血杆菌4型菌株可能毒力基因被引量：2
《华北农学报》2012年第1期57-62,共6页李淼 李春玲 宋帅 杨冬霞 
广东省农业科技重大专项(2009A020101006);广州市农业科技重大专项(2009A1-E041);广东省农科院兽医研究所所长基金
为了寻找副猪嗜血杆菌可能毒力基因,采用抑制性差减杂交技术,以HPS有毒力菌株SW124(血清4型)和无毒力菌株H465(血清11型)为研究对象,构建差减杂交文库,利用Southern Blot分析和PCR鉴定进行差异基因片段的筛选。从构建的文库中共筛选得到...
关键词：副猪嗜血杆菌 抑制性差减杂交 毒力基因 
应用抑制性差减杂交技术构建副猪嗜血杆菌基因组差减文库被引量：3
《广东农业科学》2011年第13期128-130,共3页李淼 李春玲 宋帅 杨冬霞 
广东省农业科技重大专项(2009A020101006);广州市农业科技重大专项(2009A1-E041)
为构建副猪嗜血杆菌(Haemophilus parasuis,HPS)有毒力菌株SW124(血清4型)和无毒力菌株H465(血清11型)间的差异表达基因文库,采用抑制性差减杂交技术(Suppression subtractive hybridization,SSH)分析SW124和H465菌株细菌基因组的表达差...
关键词：副猪嗜血杆菌 抑制性差减杂交 差异基因文库 
基于重组外膜蛋白P2的副猪嗜血杆菌抗体间接ELISA方法的建立被引量：7
《华北农学报》2011年第4期61-66,共6页李淼 李春玲 叶严锋 宋帅 杨冬霞 
广东省农业科技重大专项(2009A020101006);广州市农业科技重大专项(2009A1-E041)
旨在建立一种基于重组副猪嗜血杆菌(HPS)外膜蛋白(Omp)P2的检测副猪嗜血杆菌抗体的间接ELISA方法。将重组表达的Omp P2纯化后作为ELISA包被抗原,建立了一种基于重组P2蛋白的间接ELISA方法,并对此方法的反应条件进行了优化。确定ELISA的...
关键词：副猪嗜血杆菌 重组OmpP2 间接ELISA 
副猪嗜血杆菌外膜蛋白P5对豚鼠树突状细胞成熟及功能影响被引量：3
《畜牧兽医学报》2011年第7期967-973,共7页佘志成 范红结 李春玲 王贵平 贾爱卿 杨冬霞 
广东省农业科技重大专项(2009A020101006);广州市科技重大专项(2009A1-E041);广州市科技计划项目(2010Y1-C311)
为研究副猪嗜血杆菌(Haemophilus parasuis,Hps)外膜蛋白P5对豚鼠骨髓来源的树突状细胞(Dendriticcell,DC)刺激淋巴细胞增殖功能及细胞因子分泌的影响,以GM-CSF、IL-4联合诱导骨髓细胞生成未成熟DC,加入不同剂量副猪嗜血杆菌外膜蛋白P5...
关键词：副猪嗜血杆菌 树突状细胞 外膜蛋白P5 细胞因子 
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