国家自然科学基金(30270990)

作品数：19被引量：198H指数：7
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相关期刊：《福建农林大学学报（自然科学版）》《中国兽医学报》《农业生物技术学报》《生物工程学报》更多>>
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M蛋白基因shRNA抑制PRRSV在Marc145细胞中复制的研究被引量：4
《中国农业科学》2008年第1期259-264,共6页黄娟 姜平 李玉峰 蒋文明 
国家自然科学基金(30471288、30270990);江苏省自然科学基金(BK2005093);教育部博士点基金项目(20030307012)
【目的】通过靶向PRRSV基因组中的M基因的siRNA来抑制PRRSV在Marc145细胞中的复制。【方法】构建4个能转录小发夹RNA(shRNA)的质粒,将其与靶蛋白表达质粒共转染HEK293A细胞,观察荧光或进行半定量PCR;或将其转染Marc145细胞,感染PRRSV后...
关键词：PRRSV RNA干扰 M蛋白基因 
猪繁殖与呼吸综合征病毒R98弱毒株的分离鉴定与ORFs3～7基因特性研究被引量：5
《中国兽医学报》2008年第1期5-8,共4页李玉峰 姜平 蔡宝祥 简中友 
国家自然科学基金资助项目(30270990);江苏省高新技术资助项目(BG2002317);教育部优秀青年教师资助项目(20030307012)
从江苏某种猪场自北美引进的猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)抗体阳性临床健康仔猪血清中分离到1株病毒,经生物学特性测定、血清学试验、分子生物学鉴定、电镜观察及猪体致病性试验,鉴定为美洲型PRRSV类弱毒株。应用RT-PCR技术对该分离株...
关键词：猪繁殖与呼吸综合征 弱毒株 结构蛋白 序列分析 
猪繁殖与呼吸综合征病毒S1株基因组序列测定和分析被引量：2
《中国病毒学》2006年第5期490-493,共4页李玉峰 姜平 许家荣 蒋文明 
国家自然科学基金(30270990);教育部优秀青年教师资助计划(20030307012);新世纪优秀人才资助计划(NCET-04-0502);教育部重点基金项目(104101)
应用RT-PCR方法分段扩增出PRRSV上海分离株S1毒株的4条基因大片段,扩增后的产物分别克隆于pCR-XL-TOPO载体鉴定后测序,同时应用RACE方法对S1毒株的3′和5′基因末端进行了成功的扩增并克隆于pMD-18T载体进行测序,按顺序将这些序列进行...
关键词：PRRSV 基因组 序列测定和分析 
猪繁殖与呼吸综合征病毒GP5蛋白重组腺病毒的构建与免疫原性测定被引量：6
《中国病毒学》2006年第4期364-367,共4页李玉峰 姜平 蒋文明 汤景元 
国家自然科学基金(30270990);江苏省高新技术项目(BG200231.7);教育部优秀青年教师资助计划(20030307012)
应用RT-PCR方法扩增出猪繁殖与呼吸综合征病毒国内分离株S1毒株的GP5基因序列,然后通过KpnI和XhoI酶切位点把该基因克隆入经过同样双酶切的穿梭载体pShuttle-CMV中。重组穿梭载体经过酶切和PCR鉴定后进行测序,证明所克隆入的基因以正确...
关键词：PRRSV GP5 重组腺病毒 
猪繁殖与呼吸综合征病毒和猪瘟病毒混合感染的检测被引量：6
《畜牧与兽医》2006年第5期15-17,共3页董信田 李玉峰 姜平 许家荣 
国家自然科学基金(30270990);浙江省科技攻关项目(021102529);教育部博士点基金项目(20030307012);教育部重点项目(104101)
2005年3月,江苏某猪场仔猪发生体温升高,呼吸困难,四肢末端、耳尖发绀,站立不稳和淋巴结出血为主要症状的疾病。4头发病仔猪的淋巴结、脾、肺脏组织用RT-PCR方法分别检测猪繁殖与呼吸综合征病毒和猪瘟病毒为阳性,用猪瘟ELISA试剂盒检测...
关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒 猪瘟病毒 混合感染 诊断 
串联表达PRRSV M与GP5蛋白重组腺病毒的构建及其免疫特性研究被引量：10
《生物工程学报》2006年第4期555-560,共6页蒋文明 姜平 李玉峰 汤景元 王先炜 杜以军 
国家自然科学基金项目(No.30270990);教育部博士点基金项目(No.20030307012);新世纪优秀人才计划资助项目(NCET-04-0502)。~~
利用PCR扩增出猪繁殖与呼吸综合征病毒的M基因,按正确的读码框与GP5基因串联,成功构建穿梭载体pShuttle-CMV-M-GP5,经PCR、测序鉴定正确。PmeⅠ线性化后在BJ5183大肠杆菌内与腺病毒骨架载体pAdEasy-1同源重组,产生重组腺病毒DNA。重组...
关键词：PRRSV M GP5 重组腺病毒 体液免疫 细胞免疫 
PRRSV GP5和M蛋白重组腺病毒对猪的安全性和免疫效力被引量：4
《农业生物技术学报》2006年第3期312-318,共7页张治涛 李玉峰 姜平 汤景元 邓雨修 董信田 李军星 
国家自然科学基金(No.30471288和No.30270990);教育部博士点基金(No.20030307012);江苏省高新技术项目(No.BG2002317);教育部新世纪优秀人才支持计划(NCET-04-0502);优秀青年教师资助计划资助。
将猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)GP5重组腺病毒(recombinantAdenovirus-GP5,rAd-GP5)和M蛋白重组腺病毒(rAd‐M)分别接种4只30日龄PRRSV阴性断奶健康仔猪,结果为仔猪接种后2周内体温和食欲正常,猪血液、鼻塞、粪便和猪舍环境中重组腺...
关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒 重组腺病毒 GP5蛋白 M蛋白 安全性 免疫效力 
猪圆环病毒Ⅱ型Cap蛋白重组腺病毒的构建与鉴定被引量：11
《中国病毒学》2006年第1期29-33,共5页王先炜 姜平 李玉峰 蒋文明 汤景元 
浙江省攻关项目(021102529);国家自然科学基金(30270990);江苏省高新技术项目(BG2002317);教育部博士点基金项目(20030307012);教育部新世纪优秀人才支持计划(NCET-04-0502)
猪圆环病毒Ⅱ型(PCV2)是近年来新发现的引起仔猪多系统衰弱综合症的必需病原,含有两个主要的阅读框ORF1和ORF2,分别编码复制相关蛋白(Rep)和核衣壳蛋白(Cap),其中Cap含有病毒主要抗原表位,是研究PCV2基因工程苗的主要候选目的基因。本...
关键词：Ⅱ型猪圆环病毒 CAP蛋白 重组 腺病毒 构建 
猪繁殖与呼吸综合征病毒GP5蛋白N端信号肽对其DNA免疫应答的影响被引量：3
《病毒学报》2005年第6期478-480,共3页蒋文明 姜平 李玉峰 
国家自然科学基金(30270990);教育部博士基金(20030307012);教育部优秀中青年教师资助计划;江苏省高科技项目(BG2002317)
The GP5 gene which was spanned or truncated with hydrophobic signal peptide(tGP5) was amplified with RT-PCR and cloned into the downstream of promoter(CMV) of the pcDNA3.1,an eukaryotic expressing vector.The construct...
关键词：PRRSV GP5 中和抗体 信号肽 
PRRSV抗体竞争ELISA检测方法的建立与标准化研究被引量：8
《畜牧与兽医》2005年第11期7-10,共4页夏向荣 柏庆荣 柏坤桃 黄灿平 姜平 
国家自然科学基金(30270990);浙江攻关项目(021102529)。
以猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)核衣壳蛋白(N蛋白)基因的原核表达产物重组N蛋白为包被抗原,利用兔抗重组N蛋白血清和PRRS猪血清竞争该抗原,建立间接竞争ELISA方法检测PRRS抗体。经研究确定重组N蛋白的包被浓度为0·3μg/mL,检测血清...
关键词：PRRSV 抗体 诊断 竞争ELISA 
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