重组PCR

作品数:44被引量:121H指数:7
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玉米陈化关键酶基因Zmlox-2的RNA干扰载体的构建%被引量:3
《华南理工大学学报(自然科学版)》2016年第3期136-141,共6页韩颖 赵寿经 杨瑜 孙尧 王乐 
吉林省科技发展计划项目(20130102041JC);吉林省教育厅科学技术研究基金资助项目(吉教科合字[2012]376)~~
脂肪酸氧化酶(LOX)催化不饱和脂肪酸过氧化反应,导致玉米(Zea mays L.)种子储藏品质的下降.为抑制玉米陈化关键酶基因Zmlox-2的表达,依据RNA干扰原理,针对玉米Zmlox-2基因进行克隆,采用重组PCR及酶切连接技术成功构建了Zmlox-2基因的RN...
关键词:生物工程 陈化 RNA干扰表达载体 重组PCR 脂肪酸氧化酶 
增强型绿色荧光蛋白eGFP基因与犬瘟热N蛋白基因重组质粒的构建
《新疆农业科学》2015年第2期349-353,共5页夏婷婷 苏晓慧 翟少华 简子健 
国家自然科学基金项目(31360623);新疆维吾尔自治区普通高校重点学科(基础兽医学)科研启动基金
【目的】构建增强型绿色荧光蛋白(e GFP)基因与犬瘟热核蛋白N基因(CDV N)的重组质粒,为获得犬瘟热重组病毒的感染性克隆奠定研究基础。【方法】设计重组PCR引物,分别扩增e GFP,CDV N基因,并融合重组基因。【结果】成功克隆了e GFP基因和...
关键词:重组PCR EGFP基因 犬瘟热N蛋白 重组基因 
狂犬病病毒SRV_9株磷酸化蛋白P基因和基质蛋白M基因重组质粒的构建
《新疆农业科学》2014年第12期2296-2300,共5页苏晓慧 夏婷婷 翟少华 简子健 
国家自然科学基金(31360623);新疆维吾尔自治区普通高校重点学科(基础兽医学)科研启动基金
【目的】重组狂犬病病毒SRV9株磷酸化蛋白的P基因和基质蛋白的M基因,为构建狂犬病毒(SRV9)全长c DNA提供技术支撑。【方法】设计重组PCR引物,分别扩增SRV9的P基因和M基因,构建重组质粒p MD18-PM,并对重组质粒进行酶切、测序鉴定。【结果...
关键词:狂犬病病毒SRV9 磷酸化蛋白 基质蛋白 重组PCR 基因融合 
线粒体DNA缺失质粒pMDD-Z的构建及鉴定
《中国兽医杂志》2014年第1期14-17,共4页张朝明 赵文霞 汤树生 靳溪 张婷 刘凤英 肖希龙 
分别以pEGFP-Mito和pAN4质粒为模板,扩增出MTS-EGFP和EcoRⅠ基因片段,利用快速体外基因重组技术-重组PCR,将两者连接得到MTS-EGFP-EcoRⅠ片段,构建克隆载体pTRE2hyg-EE,经AgeⅠ和NotⅠ双酶切得到MTS-EGFP-EcoRⅠ融合基因产物,连接克隆...
关键词:线粒体DNA Rho^0细胞 克隆 重组PCR 质粒构建 
Bloom解旋酶突变体的克隆与表达
《生物技术通报》2013年第1期123-128,共6页张金彪 许厚强 骆衡 许庆贺 陈祥 李坤 
国家重点基础研究发展计划(973计划)资助项目(2010CB534912);教育部博士点基金资助项目(200806570003);贵州省国际科技合作计划项目[黔科合外G字(2011)7008号];贵州省优秀人才省长资金资助项目(200822)
blm基因的突变可导致Bloom综合症(BS),Bloom综合症是一种罕见隐性常染色体遗传疾病,患者遗传不稳定并易患多种类型癌症。临床发现BS患者细胞中的BLM的RecQ-Ct区域的1 036位半胱氨酸残基发生突变。运用生物信息学及分子生物学技术,通过...
关键词:BLM解旋酶 重组PCR 多位点突变 基因克隆表达 
黑曲霉果胶裂解酶基因的克隆与原核表达被引量:2
《河南农业科学》2013年第1期82-85,共4页谢茂芳 薛保国 吴坤 
科技部"十二五"国家科技支撑计划项目(2012BAD19B04)
根据NCBI上果胶裂解酶(PL)基因在黑曲霉基因组上的分布特点设计特异引物,通过重组PCR扩增出黑曲霉编码PL的结构基因。将PL基因连接到大肠杆菌表达载体pET-28a上,得到重组质粒pET-28a-PL,转化大肠杆菌(E.coli)BL21后,用IPTG进行诱导表达...
关键词:黑曲霉 果胶裂解酶 重组PCR 原核表达 
温度对大肠埃希菌Mn-SOD基因启动子调控条件的优化被引量:1
《中国微生态学杂志》2012年第10期886-888,892,共4页邵海刚 侯亚文 张莹 刘奕彦 许海峰 张洪勤 应俊 
温州医学院2011年学生科研立项课题(wyx201101077)
目的构建大肠埃希菌BL21 Mn-SOD-RFP报告基因载体,并探讨温度对大肠埃希菌Mn-SOD基因启动子的调控。方法利用重组PCR技术,构建以Mn-SOD启动子调控的红色荧光蛋白(RFP)报告基因载体,将融合基因与T载体连接导入大肠埃希菌中,在不同温度(20...
关键词:超氧化物歧化酶 启动子 重组PCR 红色荧光蛋白 报告基因 温度 
dsRNA介导的抗ToMV和CMV植物表达载体的构建被引量:1
《新疆农业科学》2012年第7期1250-1255,共6页张伟 刘炜炜 秦荣 张建云 黄家风 
国家自然科学基金(30860162)
[目的]构建通过表达dsRNA,诱导植物基因沉默机制可抗2种病毒的表达载体。[方法]根据已报道番茄花叶病毒(ToMV)的运动蛋白基因(MP)和黄瓜花叶病毒(CMV)的沉默抑制子基因(2b)的核苷酸序列设计特异性引物,扩增到部分△MP和2b基因;然后通过...
关键词:重组PCR 融合基因 RNA沉默 载体构建 双价抗性 
特异性表达siRNA的新型乙肝核酸药物的研究
《生物技术通报》2012年第4期181-185,共5页杨磊 曹以诚 高强 葛洪 
旨在研究靶向于HBsAg的肝脏特异性siRNA,实现核酸药物高靶向性、高特异性基因治疗乙肝。通过重组PCR的方法构建靶向于HBsAg的肝脏特异性表达的siRNA的核酸药物。将目标载体转染HepG2 2.2.15细胞,用ELISA的方法测定转染细胞培养液内HBsA...
关键词:RNAI 肝脏特异性siRNA 重组PCR HepG22.2.15细胞 ELISA 
抗水稻黑条矮缩病毒和南方水稻黑条矮缩病毒的双价RNA沉默载体的构建被引量:4
《江苏农业学报》2012年第2期290-295,共6页徐秋芳 张金凤 张晓霞 熊如意 周益军 
国家自然科学基金项目(31000841);公益性行业(农业)科研专项(201003031);转基因生物新品种培育重大专项(2009ZX08001-013B;2009ZX08001-019B)
为利用RNAi技术获取抗水稻黑条矮缩病毒(RBSDV)和南方水稻黑条矮缩病毒(SRBSDV)植株,分别针对两种病毒的S6和S10基因构建RNA沉默载体。采用重组PCR方法将RBSDV S6基因片段(R6)和SRBSDVS6基因片段(SR6)进行融合,获得600 bp的R6-SR6融合基...
关键词:水稻黑条矮缩病毒 南方水稻黑条矮缩病毒 重组PCR 融合基因 RNA沉默载体 
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