活性测定

作品数:1910被引量:7287H指数:26
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具核梭杆菌CarRS双组分系统组氨酸激酶CarS的表达、纯化及生化活性测定被引量:4
《生物工程学报》2023年第4期1596-1608,共13页李竺婷 师舷 范若辰 王路路 卜婷婷 郑维 张旭强 权春善 
辽宁省自然科学基金民族创新联合基金(2020-MZLH-07)。
具核梭杆菌(Fusobacterium nucleatum)是一种条件致病菌,能够在结直肠癌组织中富集,影响结直肠癌发生发展的多个阶段。双组分系统在病原菌耐药性、致病性相关基因的调控和表达中起重要作用。本文以具核梭杆菌CarRS双组分系统为研究对象...
关键词:具核梭杆菌 CarRS双组分系统 蛋白激酶活性 磷酸转移酶活性 
重组人PLCζ蛋白在昆虫细胞/杆状病毒表达系统内的表达、纯化及活性测定被引量:1
《生物工程学报》2019年第6期1135-1142,共8页陈鑫 胡玥玥 徐鸿毅 王晓燕 邓锴 
国家自然科学基金(No.81401200);湖北省自然科学基金(Nos.2018CFB219,2013CFB479);湖北省教育厅科学技术研究项目(Nos.B2015478,B2015493)资助~~
PLCζ是PLC家族的一种新型同工酶,在哺乳动物卵母细胞激活中起着极其重要的作用。近年来,体外大量表达和纯化有活性的PLCζ蛋白用于结构生物学研究一直未能获得成功。本研究首次在杆状病毒表达系统中表达和纯化重组人PLCζ蛋白,首先将人...
关键词:PLCζ蛋白 昆虫细胞 杆状病毒表达系统 表达 纯化 鉴定 
重组flap核酸内切酶1的表达及活性测定方法的建立被引量:3
《生物工程学报》2016年第10期1433-1442,共10页盛楠 马寅姣 王建平 邹秉杰 周国华 
国家科技重大专项(No.2013ZX10004103);江苏省临床科技专项(No.BL2012061);国家自然科学基金(Nos.31300704;21475151;21405176;21275161);中国博士后基金特别资助项目基金(Nos.2013T60938;2014T71011);江苏省六大人才高峰项目(No.2015-WSN-085)资助~~
Flap核酸内切酶1(Flap endonuclease 1,FEN1)是一种能催化核酸侵入反应的核酸内切酶,可应用于信号放大检测方法,但该酶详细的表达纯化工艺尚无报道,并且活性难以准确测定,限制了其应用。通过合成嗜热古球菌Archaeoglobus fulgidus来源的...
关键词:flap核酸内切酶1 信号放大 活性测定 
重组阳离子抗肿瘤肽AIK的原核表达、纯化及活性测定被引量:6
《生物工程学报》2015年第12期1753-1763,共11页范芳芳 孙慧莹 徐晖 刘佳玮 张海员 李亦兰 宁雪莲 孙悦 白静 傅松滨 周春水 
国家自然科学基金(No.81272582)资助~~
利用Gateway克隆技术构建重组抗瘤肽AIK的原核表达体系,建立表达及纯化重组AIK的最优条件,为深入研究和利用AIK奠定基础。首先,设计含AttB重组位点的引物,通过重叠PCR技术扩增出Att B-TEV-FLAG-AIK序列,利用BP重组反应将目的序列TEV-FLA...
关键词:阳离子多肽 位点特异性重组 GST融合蛋白 诱导表达 亲和层析 抑瘤活性 
豹蛙抗瘤酶的毕赤酵母高效表达、纯化及活性测定被引量:1
《生物工程学报》2015年第11期1632-1642,共11页杨刚刚 马诚凯 张全义 史世会 王泽 吕中原 王绪洋 许晓亚 崔晴晴 张继红 张瑞刚 徐存拴 
国家自然科学基金(No.31201093);河南省自然科学基金(Nos.142300413212;142300413227);河南省重大科技攻关项目(No.111100910600)资助~~
豹蛙抗瘤酶(Onconase,ranpirnase,ONC)对体内外多种肿瘤有很强的杀伤作用,是当前全球重点研究的100种新药之一,为获得高表达与高活性的重组豹蛙抗瘤酶(Recombination onconase,rONC),根据成熟ONC的cDNA序列和毕赤酵母密码子偏好性设计...
关键词:豹蛙抗瘤酶 高效表达 双水相萃取 活性测定 
蛋白激酶D1催化结构域在昆虫细胞/杆状病毒表达系统内的表达、纯化和活性测定被引量:3
《生物工程学报》2014年第8期1291-1298,共8页李志红 Qiming Jane Wang 
三峡大学人才科研启动基金(No.KJ2008B054)资助~~
蛋白激酶D(Protein kinase D,PKD)是一种新的丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶家族和甘油二酯(Diacylglycerol,DAG)受体,参与细胞内多种生理生化过程。为获得高纯度的PKD1的催化结构域(PKD1-cat)用于晶体学结构的研究,将带有GST标签的PKD1-cat基...
关键词:蛋白激酶D 催化结构域 昆虫细胞 杆状病毒表达系统 表达 纯化 
布氏锥虫苯丙氨酰-tRNA合成酶在大肠杆菌中的克隆、表达、纯化及活性测定
《生物工程学报》2010年第1期130-135,共6页姚璎 杲光伟 李大伟 
苯丙氨酰-tRNA合成酶是布氏锥虫蛋白合成过程中的一类重要酶,以其为靶点的抑制剂可能发展成为新一代的抗锥虫药物,但此前并没有分离锥虫苯丙氨酸-tRNA合成酶的报道。本研究用大肠杆菌成功克隆表达并纯化了布氏锥虫苯丙氨酰-tRNA合成酶...
关键词:布氏锥虫 苯丙氨酰 TRNA合成酶 原核表达 纯化 酶活测定 
二硫键稳定的抗CD3/抗Pgp微型双功能抗体的构建、表达及活性测定被引量:1
《生物工程学报》2009年第7期1042-1048,共7页苏晔 刘娟妮 高瀛岱 秦立 杨铭 王金宏 许元富 邵晓枫 纪庆 熊冬生 杨纯正 
国家自然科学基金(No.30400558);津市科技发展计划项目(No.08ZCKFSH04100)资助~~
向抗CD3/抗Pgp(P-glycoprotein)微型双功能抗体(Diabody)中引入二硫键,使diabody两条链以共价键交联,增强其稳定性。用重叠PCR(Overlap PCR)和PCR方法,将抗CD3/抗Pgp diabody中抗CD3或抗Pgp轻重链可变区的适当部位定点突变成半胱氨酸,...
关键词:基因工程抗体 DIABODY 二硫键 药物稳定性 
Flt-1胞外Ⅲ区蛋白的可溶性表达、纯化及活性测定被引量:1
《生物工程学报》2009年第4期580-586,共7页谢印良 谷岳 黄蕊 李雪霞 杜雪 王金宏 熊冬生 杨纯正 许元富 
国家自然科学基金(No.30400405);天津市自然科学基金(No.05YFJZJC01200)资助~~
本研究旨在克隆和表达人血管内皮生长因子受体-1胞外Ⅲ区蛋白,并测定其生物学活性。应用RT-PCR法从人脐静脉内皮细胞中克隆Flt-1胞外Ⅲ区基因片段,经测序鉴定后再克隆到原核表达载体pAYZ中,构建出的表达载体pAYZflt-1Ⅲ转化大肠杆菌16C9...
关键词:血管内皮生长因子受体-1 血管新生 血管内皮生长因子165 克隆 单抗 
北极狐γ-干扰素cDNA的克隆、表达及活性测定被引量:2
《生物工程学报》2008年第9期1625-1630,共6页张海玲 柴秀丽 罗国良 王凤雪 易立 邵西群 闫喜军 
吉林省科技发展计划项目(No.20060550)资助~~
为研究狐γ-干扰素的生物学活性,应用反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)从北极狐外周血淋巴细胞中扩增出γ-干扰素(VuIFN-γ)cDNA。序列分析表明VuIFN-γcDNA全长501bp,编码23个氨基酸的信号肽和144个氨基酸的成熟肽蛋白,与已发表的银黑狐和...
关键词:北极狐 干扰素-Γ 抗病毒活性 
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