活性测定

作品数:1910被引量:7287H指数:26
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肝素差向异构酶在昆虫细胞中的表达和活性测定
《药物生物技术》2020年第5期408-414,共7页张晶晶 刘纯慧 王晓 马亚卿 张桂娇 王亚利 唐凤琰 
山东省自然科学基金(No.ZR2019MH030);国家自然科学基金(No.21372146)
葡糖醛酸C5-差向异构酶(C5-epi)是肝素/硫酸乙酰肝素生物合成的关键酶之一,本文通过无缝克隆技术将人源C5-epi基因克隆至p Fast Bac1质粒构建重组载体,转化至含杆状病毒穿梭载体和辅助载体的DH10αBac感受态细胞并发生位点特异性转座,...
关键词:人肝素差向异构酶 昆虫细胞 杆状病毒表达系统 转染效率 感染复数 感染时间 酶活测定 
Klenow(exo-)的表达、活性测定及其在焦磷酸测序中的应用被引量:1
《药物生物技术》2016年第3期201-207,共7页蒋宗英 邹秉杰 刘云龙 宋沁馨 周国华 
国家自然科学基金(No.31200638;21275161;21475151;31300704);江苏省基础研究计划(自然科学基金)项目(No.BK20151445;No.BK20140656);中国博士后科学基金项目(No.2012M512179;2013T60962;No.2015M572809);中央高校基本科研业务费重点项目(No.2015ZD008);药物质量与安全预警教育部重点实验室资助项目(No.DQCP2015MS02);江苏高校优势学科建设工程资助项目;江苏省青蓝工程资助
野生的Klenow聚合酶具有3'-5'外切酶活性,会对引物进行切割而造成焦磷酸测序产生错误的延伸信号。为了制备缺失3'外切酶活性的Klenow聚合酶用于焦磷酸测序反应,该研究全合成了外切酶活性缺失突变的Klenow酶基因编码序列,将其插入到表达...
关键词:Klenow酶.夕h切酶活性 焦磷酸测序 重组表达 表达条件优化 Ni+柱亲和层析法 生物发光 
尿苷二磷酸葡萄糖焦磷酸化酶活性测定试剂盒及其方法
《药物生物技术》2016年第2期188-188,共1页
本方法公开了一种尿苷二磷酸葡萄糖焦磷酸化酶活性测定试剂盒及其方法,该试剂盒包括:由Tris、蒸馏水、HCl、乙二胺四乙酸二钠盐、DTY和蔗糖混匀后制成的提取液,由所述提取液、蒸馏水、MgCl2、UDPG混匀后制成的试剂一,由NADP组成的...
关键词:尿苷二磷酸葡萄糖 试剂盒 磷酸化 酶活性 测定 乙二胺四乙酸 葡萄糖脱氢酶 葡萄糖变位酶 
二硫键稳定的抗CD3/抗CD19微型双功能抗体的表达及活性测定被引量:1
《药物生物技术》2014年第5期389-392,共4页杨雨琪 金锐 高子璐 岳凯 李崴 
构建了抗CD3/抗CD19(Diabody)微型双功能抗体,并且为增强其稳定性进一步改造为二硫键稳定的抗CD3/抗CD19(ds-Diabody)微型双功能抗体,表达并纯化后测定其生物学活性。构建二硫键稳定的抗CD3/抗CD19表达载体p AYZds CD3CD19,转化感受态...
关键词:DIABODY 抗CD3 抗CD19 二硫键 药物稳定性 
细胞酶促转化过程中胸苷磷酸化酶(TPase)活性测定方法的研究被引量:1
《药物生物技术》2014年第3期222-225,共4页冯璐 夏晓敏 邱蔚然 周长林 
江苏省核酸药物工程技术研究中心(No.BN2009261);江苏省张友尚院士工作站(No.BN2009604)
β-胸苷在乙酰短杆菌胸苷磷酸化酶的作用下,反应生成胸腺嘧啶。该文利用紫外分光光度法建立了细胞酶促转化过程中胸苷磷酸化酶活性的测定方法。β-胸苷在胸苷磷酸化酶作用下生成胸腺嘧啶,由于β-胸苷与胸腺嘧啶在300 nm处均有吸光度,反...
关键词:胸苷磷酸化酶 乙酰短杆菌 紫外分光光度法 细胞酶 酶活性 表观米氏常数 
酿酒酵母磷酸胆碱胞苷转移酶基因(cct)的克隆表达及活性测定被引量:3
《药物生物技术》2014年第2期99-102,共4页李晓丹 夏冰 汪仁 
江苏省科技支撑计划-社会发展(No.BE2012751);国家高技术研究发展计划("863")子课题(No.2011AA-10A206)
以酿酒酵母(Saccharomyces cervisiae)基因组DNA为模板,克隆并表达了编码磷酸胆碱胞苷转移酶的基因cct。根据NCBI提供的序列信息,设计扩增cct基因的引物,经PCR扩增、酶切后,将cct插入到表达载体pET-29a(+)中,构建了重组质粒pET-29a-cct...
关键词:酿酒酵母 磷酸胆碱胞苷转移酶基因 表达 CDP-胆碱合成 
海蛇丝氨酸蛋白酶Harobin的原核表达及其活性测定被引量:1
《药物生物技术》2013年第3期198-202,共5页董濠鋆 张敏仪 黎卓键 吴国艺 麦迪思 沈巍 徐明芳 陈小佳 
广东省教育部产学研结合项目(No.2009B090300284);广州市科技计划项目(No.2010J-E261)
本文利用原核系统表达海蛇丝氨酸蛋白酶Harobin,并纯化和鉴定其活性。首先PCR法从模板分别扩增SUMO以及Harobin基因,再重叠PCR方法获得SUMO-Harobin融合基因,经NdeI、BamHI双酶切后,连入pET3C质粒,构建pET3C-SUMO/Harobin重组质粒。重...
关键词:Harobin SUMO 原核表达 蛋白纯化 纤维蛋白原 降解 
重组蛋白A在大肠杆菌中的分泌表达及活性测定被引量:1
《药物生物技术》2012年第1期11-15,共5页张秀华 刘素丽 刘彬 邢芸 范豪 曹荣月 刘景晶 
国家自然科学基金(30772570;30872393);中央高校基本科研业务费专项资金资助(JKY2009021;JKQ2009022)
利用大肠杆菌表达系统表达金黄色葡萄球菌蛋白A,根据大肠杆菌密码子偏好性对金黄色葡萄球菌蛋白A的基因序列进行密码子优化,在N端加入L-门冬酰胺酶(L-AsPsII)信号肽简并基因序列使其分泌表达,将全合成的蛋白A基因片段插入到pET-28a载体...
关键词:重组蛋白A 大肠杆菌 分泌表达 酶联免疫反应 
一种新型重组人复合α干扰素的表达、分离纯化及活性测定被引量:1
《药物生物技术》2011年第1期1-5,共5页金茜 陈紫娟 徐旭东 
为提高重组复合α干扰素的活性和半衰期,在现有复合α干扰素结构基础上进行氨基酸替换,合成了新型干扰素(N-cIFN)基因,将该基因克隆到温控表达质粒pBV220,转化大肠杆菌BL21获得工程菌BL21/pBV220-cIFN,经过诱导表达、包涵体变性、DEAE S...
关键词:重组人cIFN 温控表达 分离纯化 活性 
融合蛋白(GLP-1_(A2G))_2-HSA的分离纯化及其活性评价被引量:4
《药物生物技术》2010年第6期487-492,共6页李现丽 窦文芳 张晓梅 许泓瑜 邱丽颖 金坚 许正宏 
国家重大新药创制专项(No.2009ZX09102-221);江苏省自然科学基金(企业博士创新项目)(No.BK2009518);江苏省科技支撑计划(No.BE2009629)
建立简便、快速、高效的重组人血清白蛋白与胰高血糖素样肽-1(GLP-1)突变串联体融合蛋白(GLP-1A2G)2-HSA(GGH)的分离纯化方法。重组毕赤酵母菌株发酵产生的融合蛋白GGH的上清液通过超滤、染料配体亲和层析、凝胶过滤层析、离子交换层析...
关键词:胰高血糖素样肽-1 融合蛋白 纯化 活性测定 
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