刘恒贵

作品数：10被引量：17H指数：3
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供职机构：中国农业科学院哈尔滨兽医研究所更多>>
发文主题：新城疫病毒病毒免疫应答原核表达HN蛋白更多>>
发文领域：农业科学医药卫生更多>>
发文期刊：《中国兽医科学》《中国预防兽医学报》《动物医学进展》《畜牧兽医学报》更多>>
所获基金：中央级公益性科研院所基本科研业务费专项国家自然科学基金国家重点实验室开放基金更多>>
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猪鼻支原体荧光PCR检测方法的建立和应用
《中国兽医科学》2023年第2期176-181,共6页孙岩 闫丽辉 史林林 关野 刘恒贵 孙建宏 
国家自然科学基金项目(32002315,32172890)。
为了建立猪鼻支原体(Mycoplasma hyorhinis)快速荧光PCR检测方法,本研究合成了该病原特异性基因P37的重组质粒,根据该基因设计荧光PCR引物和探针,并对设计的引物和探针的特异性、敏感性和重复性进行了检测。结果显示,该方法具有高度的...
关键词：猪鼻支原体 荧光PCR 方法建立 
利用酵母随机展示文库筛选与鉴定基因Ⅶ型新城疫病毒HN蛋白B细胞抗原表位被引量：1
《中国兽医科学》2020年第10期1263-1270,共8页刘欢欢 向志达 叶十一 郭利伟 刘恒贵 熊涛 
国家自然科学基金青年科学基金项目(31602099)。
新城疫病毒(Newcastle disease virus,NDV)给全世界家禽养殖业造成了严重的经济损失。HN蛋白是NDV上的重要囊膜蛋白,能诱导鸡体内的免疫系统产生保护性抗体。为了鉴定HN蛋白上的B细胞表位,本研究成功构建了基因Ⅶ型NDV HN蛋白的酵母随...
关键词：新城疫病毒 HN蛋白 B细胞表位 酵母随机展示文库 
猪肺炎支原体P97蛋白单克隆抗体的制备、表位鉴定及其初步应用被引量：4
《畜牧兽医学报》2020年第5期1110-1118,共9页王宁 谨瑾 刘璐 刘欢欢 姜立波 辛九庆 刘恒贵 
兽医生物技术国家重点实验室自主研究课题(SKLVBP201806);中央级公益性科研院所基本科研业务费专业(1610302017014)。
为了制备能够用于阻断ELISA检测的猪肺炎支原体(Mycoplasma hyopneumoniae,Mhp)单克隆抗体(MAb),本研究将原核表达的Mhp J株P97蛋白C末端包含R1区的肽段(P97CR1)作为免疫原免疫BALB/C雌鼠,筛选获得一株能稳定分泌抗Mhp P97蛋白MAb的杂...
关键词：猪肺炎支原体 单克隆抗体 P97蛋白 表位鉴定 
蛋白质硫辛酸修饰相关酶大肠杆菌研究模型的构建
《畜牧兽医学报》2019年第5期1073-1081,共9页朱可蒙 谨瑾 王宁 辛九庆 刘恒贵 
中央级公益性科研院所基本科研业务费专项(1610302017014);国家重点研发计划(2016YFD0500908)
为研究不同微生物硫辛酸修饰相关酶的功能,构建了大肠杆菌菌体内研究模型。利用Red同源重组系统对大肠杆菌的lplA、lipB基因依次进行敲除,获得大肠杆菌lplA及lipB双基因缺失株△lplA△lipB～DH5α。将lplA和lipB基因分别克隆到载体pBAD3...
关键词：大肠杆菌 蛋白质硫辛酸修饰 RED同源重组 lplA lipB 
利用酵母随机展示技术对猪肺炎支原体P97上B细胞表位的筛选和鉴定被引量：1
《畜牧兽医学报》2018年第7期1492-1499,共8页刘璐 郭杰 朱可蒙 王宁 辛九庆 刘玉芬 刘恒贵 
中央级公益性科研院所基本科研业务费专项(1610302016005;1610302017014)
构建猪肺炎支原体P97蛋白的酵母随机展示文库,并利用该文库筛选和鉴定P97蛋白上的特异性B细胞表位。设计特异性引物从Mhp基因组中扩增p97基因,通过PCR方法将基因内部的TGA密码子突变为TGG,用DNaseⅠ将p97突变基因随机消化成长度100~250b...
关键词：猪肺炎支原体 P97黏附蛋白 酵母展示文库 B细胞表位 
猪免疫调控分子B7-H4的单克隆抗体制备及其在免疫细胞中的表达分析
《中国兽医科学》2018年第5期545-551,共7页郭杰 刘璐 朱可蒙 王宁 辛九庆 刘恒贵 
中央级公益性科研院所基本科研业务费专项(1610302016005;1610302017014)
B7-H4分子是B7家族的成员之一。在人和小鼠的研究显示,该分子对T细胞免疫学功能的发挥具有重要调节作用。但是该分子在猪免疫系统中的功能还没有报道。本研究通过PCR技术扩增到了猪的免疫调控分子B7-H4（pB7-H4）的基因片段,并将其克隆...
关键词：猪B7-H4 原核表达 单克隆抗体 免疫细胞 流式细胞检测 
肠炎沙门菌鞭毛蛋白的原核表达纯化及其多克隆抗体的制备被引量：4
《中国兽医科学》2016年第1期8-12,共5页史冰田 王高玲 郭杰 司微 李涛 王斌 刘恒贵 
中央级公益性科研院所基本科研业务费项目(0302015005)
利用PCR技术成功扩增到了肠炎沙门菌鞭毛蛋白fliC基因,将其连接到原核表达载体pET-32a(+)中,构建原核重组表达质粒pET-32a(+)-fliC。将pET-32a(+)-fliC转化到大肠杆菌BL21(DE3)菌株中,并在30℃下用终浓度为1mmol/L IPTG进行诱导表达9h...
关键词：肠炎沙门菌 鞭毛蛋白 原核表达 阳性血清 生物活性 
hilA基因两端51bp序列对示踪标记性绿色荧光蛋白在禽肠炎沙门氏菌中倍增表达效率的鉴定被引量：2
《中国预防兽医学报》2015年第6期409-413,共5页王高玲 李涛 史冰田 司微 王斌 刘恒贵 
兽医生物技术国家重点实验室基本科研业务费(SKLVBP201422)
为构建表达绿色荧光蛋白(GFP)作为示踪标记的重组禽肠炎沙门氏菌(S.enteritidis)并鉴定其遗传稳定性,本研究通过重叠延伸PCR构建5'端含有T7启动子和核糖体结合位点(RBS),3'端含有T7终止子序列的增强型GFP(e GFP)表达盒,并将e GFP表达盒...
关键词：肠炎沙门氏菌 绿色荧光蛋白 荧光标记 hilA基因 
抗新城疫病毒HN蛋白单链抗体的原核表达及其功能鉴定被引量：4
《中国预防兽医学报》2014年第5期383-386,共4页王斌 刘培欣 李涛 王高玲 修金生 胡崇伟 刘恒贵 
中央级公益性科研院所基本科研业务费专项(0302013006)
为制备抗鸡新城疫病毒(NDV)血凝素-神经氨酸酶(HN)单链抗体(scFv)并鉴定其生物学功能,本研究提取抗NDV HN单克隆抗体杂交瘤细胞株总RNA,通过RT-PCR扩增抗HN蛋白抗体的轻链可变区(VL)和重链可变区(VH)编码序列,将其插入含有Linker序列的...
关键词：单链抗体 新城疫病毒 血凝素-神经氨酸酶 
白细胞介素18生物学作用及其在病毒感染中的表达调控被引量：2
《动物医学进展》2002年第4期6-9,共4页刘恒贵 曹殿军 
白细胞介素 1 8( IL -1 8)作为一种能诱导产生 IFN-γ的因子 ,在机体产生抗微生物免疫中起着重要作用。巨噬细胞是生物活性 IL-1 8的主要来源 ,它们持续转录 IL-1 8的 m RNA并表达其前体蛋白。微生物感染可提高巨噬细胞中 IL-1 8基因的...
关键词：生物学作用 病毒感染 白细胞介素18 表达调控 巨噬细胞 免疫应答 caspase级联反应 
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