周圆

作品数:9被引量:35H指数:4
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发文主题:提纯干扰素大肠杆菌修饰抗病毒活性更多>>
发文领域:医药卫生生物学更多>>
发文期刊:《科学通报》《病毒学报》《生物工程学报》更多>>
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重组人α2b型干扰素的纯化与鉴定被引量:6
《生物工程学报》1994年第1期61-65,共5页周圆 金冬雁 曾庆 李玉英 迟捷 侯云德 
本工作为国家863高技术研究发展计划生物领域资助项目;已于1992年5月通过专家鉴定
采用单克隆抗体亲和层析一步纯化法对大肠杆菌表达的重组人a2b型干扰素进行了纯化,然后利用凝胶过滤高压液相层析、SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳和N端25个氨基酸的序列测定等方法对纯化产品进行了鉴定。表明一步纯化的IFN-a...
关键词:a2b型 干扰素 提纯 鉴定 重组 
人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子cDNA 5'端的修饰提高其在大肠杆菌的表达被引量:16
《病毒学报》1993年第2期136-143,共8页张智清 张颖 路秀华 王世骢 邵魁 马丽娟 李玉英 周圆 姚立红 贺秉坤 侯云德 
国家863高科技生物技术领域资助
应用聚合酶链反应(PCR)法和人工合成的寡聚DNA引物,对人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)的cDNA作了修饰。在不改变氨基酸的前提下,将一些G或C改成A或T,以避免形成不利的二级结构,并将一些密码子换成大肠杆菌喜用的密码子。修饰后的...
关键词:粒细胞 巨噬细胞 集落刺激因子 
重组人白细胞介素4的纯化及N端氨基酸序列分析被引量:1
《生物化学杂志》1993年第2期158-161,共4页李晨 张智清 周圆 姚智 陈慰峰 侯云德 
本文对重组人白细胞介素4高效表达克隆pBV220/hIL-4a的表达产物进行了纯化,升对纯化的人IL-4进行了N端氨基酸序列分析。人IL-4基因表达产物在大肠杆菌中以不溶性包涵体形式存在,经过超声破菌、包涵体抽提、复性浓缩、离子交換和凝胶过...
关键词:提纯 氨基酸 分析 重组 白细胞介素 
一种重组人α1型干扰素突变体IFN-α1/86D的纯化与鉴定被引量:4
《病毒学报》1993年第1期37-42,共6页周圆 金冬雁 张智清 王伟 黎志良 迟捷 李玉英 侯云德 
国家863高科技生物技术领域资助
本文研究了重组人α1型干扰素突变体IFN-α1/86D在摇瓶培养和分批发酵培养的重组大肠杆菌DH5α株中的表达动态,并采用阳离子交换层析和抗α1型干扰素单克隆抗体亲和层析的两步流程对其进行了纯化,得到SDS-PAGE纯及高效液相层析(HPLC)纯...
关键词:干扰素 蛋白 提纯 抗病毒活性 
一种兼具抗病毒活性及pHSA结合活性的蛋白——乙型肝炎病毒前S2肽段与人α2a型干扰素的融合蛋白
《科学通报》1993年第2期181-183,共3页金冬雁 曾庆 周圆 徐荣辉 李玉英 侯云德 
国家"863"高技术研究发展计划生物技术领域资助项目
α型干扰素(IFN-α)是一类具有广谱抗病毒活性的蛋白质,是当前研究资料较为充分而应用前景较为广阔的生物治疗药物之一。本实验室研制的重组人α2a型干扰素(IFN-α2a)已获国家批准进入临床验证。已有资料表明,α型干扰素对于慢性肝炎具...
关键词:抗病毒活性 α2a型干扰素 抗病毒活性 PHSA 
直组人嗜中性白细胞活化蛋白-1/白细胞介素-8的纯化与鉴定
《生物化学杂志》1992年第6期719-723,共5页周圆 金冬雁 徐荣辉 侯云德 
本文利用SDS-PAGE及蛋白质电泳印迹技术,从带有相应表达质粒的重组大肠杆菌裂解液中,将所表达的重组人嗜中性白细胞活化蛋白-1/白细胞介素-8(NAP-1/IL-8)转移至聚偏二氟乙烯膜上,直接进行N-末端15个氨基酸的序列分析,从而确证该目标蛋...
关键词:NAP-1/IL-8 提纯 鉴定 
人嗜中性白细胞活化蛋白-1/白细胞介素-8基因的半化学半酶促合成及在大肠杆菌的表达被引量:1
《中国科学(B辑)》1992年第9期951-957,共7页金冬雁 徐荣辉 周圆 王平 侯云德 
本文采用半化学半酶促法合成了人嗜中性白细胞活化蛋白-1/白细胞介素-8(NAP-1/IL-8)的全基因,并在大肠杆菌系统中利用P_RP_1串联启动子进行了温控型的高效表达,通过SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)检测表明,在摇瓶培养的大肠杆菌中,NAP...
关键词: NAP-1 IL-8 基因 化学合成 
人α2b型干扰素基因的修饰合成及其在大肠杆菌中的表达被引量:7
《病毒学报》1992年第3期205-209,共5页曾庆 金冬雁 金奇 胡钢 周圆 李玉英 王珣章 侯云德 
采用寡核苷酸介导的定位诱变技术,将现有的人α2a型干扰素基因中编码K23的密码子AAA定向诱变为R的密码子CGT,以构建可表达人α2b型干扰素的修饰基因。经DNA全序列分析表明,定位诱变的结果符合设计要求。在此基础上,利用原核高效表达载体...
关键词:干扰素 修饰因基 大肠杆菌 表达 
基因工程产品的N末端均一性及其中残留的痕量杂质蛋白的分析被引量:2
《生物工程学报》1991年第2期108-113,共6页金冬雁 张智清 周圆 侯云德 
利用Edman降解法,辅之以邻苯二甲醛阻断等技术,在蛋白/多肽测序仪-PTH氨基酸分析仪上微量自动测定了在大肠杆菌系统获得高效表达的重组人γ干扰素、α 2干扰素和白细胞介素-2等多种基因工程产品的N末端氨基酸序列。根据氨基酸色谱分析...
关键词:基因工程产品 N端均一性 杂质蛋白 
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