张鹤晓

作品数：72被引量：363H指数：9
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供职机构：北京出入境检验检疫局更多>>
发文主题：荧光RT-PCR禽流感病毒荧光RT-PCR检测新城疫病毒标准物质更多>>
发文领域：农业科学轻工技术与工程生物学医药卫生更多>>
发文期刊：《动物医学进展》《畜牧兽医学报》《中国兽医杂志》《中国医药导刊》更多>>
所获基金：质检公益性行业科研专项项目国家质检总局科技计划项目国家科技基础性工作专项国家科技重大专项更多>>
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内含猪繁殖与呼吸综合征病毒保守基因序列假病毒粒子的构建及应用被引量：7
《中国兽医学报》2016年第12期2024-2029,共6页乔彩霞 张鹤晓 高志强 尹羿 蒲静 汪琳 刘环 张伟 
国家公益性行业科研专项资助项目(201310253)
为构建内含猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)保守基因序列的假病毒粒子,将MS2噬菌体基因组中5′非编码区、成熟酶蛋白基因、衣壳蛋白基因、包装位点和复制酶基因部分起始位点的cDNA序列克隆于原核表达载体pET32a,在其下游插入PRRSV ORF7和...
关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒 ORF7 3’非编码区 病毒样颗粒 
动物RNA病毒检测关键试剂—反转录酶(M-MLV RTase)的制备
《中国兽医杂志》2016年第11期26-28,共3页牛建蕊 高志强 蒲静 张伟 刘环 刘文晓 张鹤晓 
国家质检总局科技计划项目(2014IK232)
反转录酶是动物RNA病毒分子诊断用到的关键试剂之一。为获得纯度高、活性高、制备简单经济的M-MLV RTase,本试验将M-MLV RTase的基因序列进行密码子优化,合成并构建表达载体。将表达载体转化到大肠杆菌E.coli Rosetta宿主菌种,经IPTG诱...
关键词：M-MLV RTase 表达 纯化 RT-PCR 
猪传染性胃肠炎病毒S基因A、D抗原共表达的复制缺陷型重组腺病毒构建及鉴定被引量：2
《中国兽医杂志》2016年第9期3-6,共4页刘文晓 高志强 蒲静 张伟 刘环 牛建蕊 张鹤晓 
北京市优秀人才培养资助青年骨干个人项目(2015-000097607G290)
通过RT-PCR技术和重叠PCR技术扩增出含有猪传染性胃肠炎病毒S基因的A抗原表位和D抗原表位,构建复制缺陷型腺病毒穿梭质粒。穿梭质粒与腺病毒骨架质粒经PacI线性化之后,共同转染AD-293细胞,获得共表达A、D抗原表位的复制缺陷型重组腺病...
关键词：猪传染性胃肠炎 复制缺陷型腺病毒 疫苗 
猪圆环病毒2型ORF-2全基因重组腺病毒的构建与鉴定
《中国兽医杂志》2016年第1期24-26,共3页林祥超 高志强 张鹤晓 张康 郭金玉 牛建蕊 张乐萃 
质检公益性行业科研项目(201310253)
扩增猪圆环病毒2型的ORF-2全基因(702 bp),将目的片段与缺陷型腺病毒穿梭质粒pacAd5CMV K-NpA连接,构建重组穿梭质粒CMV-ORF-2。将穿梭质粒与骨架质粒pacAd5 9.2-100经限制性内切酶PacI线性化后共转染293T细胞,进行细胞内重组。7~15 d...
关键词：猪圆环病毒2型 ORF-2 缺陷型重组腺病毒 
伪狂犬病病毒核酸检测能力验证样品制备及其应用
《中国兽医杂志》2015年第12期6-9,共4页乔彩霞 尹羿 蒲静 高志强 汪琳 任彤 张伟 张利峰 张鹤晓 
质检公益性行业科研专项<动物疫病核酸标准物质制备关键技术研究>(201310253)
能力验证样品的制备是实验室病原核酸检测能力验证的难点和核心内容,本研究以伪狂犬病病毒南阳株细胞培养物为材料,通过高温处理的方式灭活病毒,研制了伪狂犬病病毒核酸检测的能力验证样品,经均匀性和稳定性检验证实样品达到中国合格评...
关键词：伪狂犬病病毒 核酸检测 能力验证 
猪圆环病毒2型重组腺病毒核酸扩增检测标准样品的研制被引量：2
《中国兽医杂志》2015年第12期10-12,16,I0001,共5页高志强 刘环 林祥超 张伟 乔彩霞 谷强 蒲静 张鹤晓 
质检公益性行业科研专项"动物疫病核酸标准物质制备关键技术研究"(201310253)
为研制用于猪圆环病毒2型（PCV-2）核酸扩增检测（NAT）质量控制的标准样品,本研究将猪圆环病毒2型QD/2014株ORF2连接到缺陷型腺病毒穿梭质粒pacAd5 CMV K-NpA上,构建了重组穿梭质粒CMV-PCV-2-ORF2。将其与骨架质粒pacAd5 9.2-100线性...
关键词：猪圆环病毒2型 ORF2 重组腺病毒 标准样品 
牛肠道病毒2型单克隆抗体的制备及其应用研究被引量：2
《畜牧兽医学报》2015年第11期2025-2031,共7页郭金玉 张鹤晓 吴丹 高志强 张冉 张乐萃 
国家质检总局科研项目(2013IK026)
旨在制备牛肠道病毒2型(BEV-2)单克隆抗体,建立检测BEV-2抗原的ELISA方法。将纯化的BEV-2VP1+重组蛋白质接种BALB/c小鼠,取其脾淋巴细胞与骨髓瘤细胞SP2/0用PEG4000进行融合,对杂交瘤培养上清进行筛选,获得2株稳定分泌抗BEV-2VP1+蛋白...
关键词：牛肠道病毒2型 单克隆抗体 夹心ELISA 
猪繁殖与呼吸综合征病毒N蛋白的原核表达和间接ELISA方法的建立
《中国兽医杂志》2015年第11期49-52,共4页王麒文 张鹤晓 高志强 林祥超 张乐萃 
质检公益性行业科研专项"动物疫病核酸标准物质制备关键技术研究(201310253)
根据猪繁殖与咱呼吸综合征病毒JX株编码N蛋白的ORF7基因序列设计特异性引物。采用RT-PCR方法扩增猪繁殖与呼吸综合征病毒ORF7基因片段(367 bp),将其克隆于表达载体pET-32a上。测序验证后将重组质粒pET-32a-JX-N转入宿主菌Rosetta,经0.7 ...
关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒 N蛋白 重组表达 间接ELISA 
核酸适体技术及其在兽药残留检测中的应用被引量：5
《中国兽医杂志》2015年第11期75-78,共4页段烨 高志强 王慧珊 张鹤晓 李灏 
质检公益性行业科研专项(201310253)
近年来,随着食品安全事件的频繁发生,兽药残留已逐渐成为人们普遍关注的一个社会热点问题。传统的兽药残留检测方法主要包括气相色谱法、液相色谱法、毛细管电泳法等,这些方法其具有检测灵敏度较高、稳定性较好等特点,但对样品洁净度的...
关键词：兽药残留检测 检测成本 洁净度 液相色谱法 磺胺甲基嘧啶 气相色谱法 社会热点问题 微孔板 磺胺类药物 靶分子 
水疱性口炎病毒糖蛋白的原核表达及间接ELISA诊断技术的试验被引量：1
《中国兽医杂志》2015年第7期75-78,共4页郭金玉 张鹤晓 高志强 林祥超 臧京帅 王麒文 牛建蕊 张乐萃 
青岛农业大学研究生创新计划资助项目(QYC201302)
本研究利用重组质粒p ET-32a-NJ-G666(针对新泽西型水疱性口炎病毒截断的G蛋白基因片段约666 bp),将其转化至Rosetta宿主菌,用0.6 mmol/L IPTG在30℃诱导4 h,经10%聚丙烯酰胺凝胶电泳显示,表达的重组蛋白分子质量与预期的30 k Da相符。...
关键词：水疱性口炎病毒 原核表达 间接ELISA 
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