方彧聃

作品数：16被引量：36H指数：3
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供职机构：上海市儿童医院更多>>
发文主题：慢病毒载体转基因小鼠慢病毒载体介导内含子山羊更多>>
发文领域：生物学医药卫生自动化与计算机技术更多>>
发文期刊：《生命科学研究》《临床儿科杂志》《医学分子生物学杂志》《自然科学进展》更多>>
所获基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划上海市自然科学基金国家重点基础研究发展计划更多>>
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孤独症谱系障碍儿童外周血ENO2基因甲基化修饰水平的研究
《中国儿童保健杂志》2020年第9期985-988,共4页姜莲 马晨欢 方彧聃 韦念堇 陈冯凤 潘丽珠 王瑜 
上海市儿童医院重点学科建设(2017ZD04);上海市科委医学引导类项目(16411970100);上海交通大学医学院转化医学项目(15ZH3005);上海残联康复项目(K2018007)。
目的探讨孤独症谱系障碍(ASD)儿童外周血ENO2基因甲基化修饰的水平,为ASD的早期筛查提供理论依据。方法2018年1-12月在上海市儿童医院儿童保健科收集5对性别和年龄分别匹配的ASD儿童和正常对照儿童的外周血,应用Medip-chip甲基化芯片分...
关键词：孤独症谱系障碍 ENO2基因 神经发育 甲基化 表观遗传 
孤独症谱系障碍儿童外周血长链非编码RNA表达的研究被引量：2
《中国儿童保健杂志》2020年第3期256-260,共5页韦念堇 方彧聃 姜莲 郑小斐 何琳 马晨欢 王瑜 
上海市科委医学引导类项目(16411970100);上海市残联康复科研项目(K2018007)。
目的观察孤独症谱系障碍(ASD)患儿外周血LncRNA表达特征,为进一步研究ASD早期预警的分子标志物提供理论依据。方法2018年1-9月在上海市儿童医院招募ASD患儿和正常对照儿童各40例,采集其外周血RNA样本,应用LncRNA Array v2.0芯片分析ASD...
关键词：孤独症谱系障碍 长链非编码RNA 同源盒基因 
乳腺生物反应器特异高效表达载体的构建
《中国生物工程杂志》2014年第7期49-55,共7页张斯敏 高越 方彧聃 张金脉 张敬之 
国家“973”计划(2010CB945202);国家自然科学基金(81271690)资助项目
乳腺生物反应器具有广阔的开发前景,而提高目的基因的表达量是该领域一个重要的研究课题。因此,选用强的非特异性启动子pCAG,而不是乳腺特异性启动子来实现高效表达;通过Cre/loxP系统和山羊β-乳球蛋白启动区(pBLG)表达Cre重组酶来实现...
关键词：乳腺生物反应器 CRE loxP系统 特异表达 报告基因lacZ 
慢病毒载体转录通读率检测方法的建立被引量：1
《生物工程学报》2013年第7期1006-1015,共10页何佳平 方彧聃 张帆 孙凤强 王娟 张敬之 
国家自然科学基金(No.81271690);国家重大基础研究发展计划(973计划)(No.2010CB945202);上海市自然科学基金(No.11ZR1429900)资助~~
慢病毒载体作为一种有效的生物研究和基因治疗载体,近年来正受到广泛关注,而转录通读现象则是限制其被使用的主要生物安全性瓶颈之一。为了评估慢病毒载体在整合入染色体后的转录通读的实际情况,需要建立一种有效的检测转录通读率的方...
关键词：慢病毒载体 自灭活慢病毒载体 转录通读率 安全性 
病毒滴度和插入子长度对慢病毒载体介导的转基因小鼠整合率的影响
《实验动物与比较医学》2013年第3期185-189,共5页郭歆冰 龚秀丽 陈雁雯 方彧聃 张敬之 
上海市自然科学基金（11ZR1429900）,上海市科委实验动物研究项目（12140900600）
目的研究病毒滴度和插入子长度对于慢病毒载体介导的转基因小鼠整合率的影响。方法制备了18种不同长度插入子的慢病毒载体，通过受精卵卵周隙注射的方法获得转基因小鼠，然后通过PCR技术检测其转基因小鼠的整合率，并对所生成的数据进...
关键词：慢病毒载体 转基因小鼠 整合率 滴度 插入子长度 
稳定表达牛催乳素基因的小鼠乳腺上皮细胞系的建立被引量：1
《生命科学研究》2013年第2期100-105,共6页方彧聃 何佳平 张斯敏 王娟 任晓叶 张金脉 张敬之 
国家自然科学基金资助项目(81271690);国家重点基础研究发展计划(973计划)项目(2010CB945202);上海市自然科学基金资助项目(11ZR1429900)
在乳腺上皮细胞体外培养时,为了使其状态接近泌乳期,需要在培养基中添加催乳素.由于催乳素价格昂贵,使得乳腺上皮细胞的体外培养成本颇高.建立在体外培养过程中不需要添加催乳素蛋白的乳腺上皮细胞系,能为在细胞水平研究乳腺细胞相关基...
关键词：HC11细胞系 催乳素 慢病毒载体 乳腺特异性基因 乳腺生物反应器 
以HIV-1为骨架的慢病毒载体在其假病毒的转录本中保留其内含子不被剪切
《生命科学研究》2011年第3期195-202,共8页张帆 方彧聃 张敬之 
国家自然科学基金资助项目(30870943);上海市自然科学基金资助项目(11ZR1429900)
通过在FUGW中克隆入各外源基因表达盒,如红系特异表达人β珠蛋白(HBG),或山羊乳腺特异表达人血清白蛋白(pBLG-ALB)等,研究以HIV-1为骨架的慢病毒载体FUGW在其假病毒的转录本中内含子的剪切情况.将慢病毒载体制备成假病毒后抽提其病毒RNA...
关键词：艾滋病毒 慢病毒载体 内含子 剪切 剪切保护 
汉族儿童扩张型心肌病与LMNA基因的相关性研究被引量：2
《临床儿科杂志》2011年第6期542-546,共5页袁迎第 谢利剑 黄敏 方彧聃 赵鹏军 张帆 
教育部博士点基金资助项目(No.20090073120109);上海市卫生局青年科研课题资助项目(No.2008Y004)
目的研究核纤层蛋白(LMNA)基因在汉族扩张型心肌病(dilated cardiomyopathy,DCM)患儿中的突变情况。方法对70例DCM患儿和70名健康对照儿童进行LMNA基因突变筛查,用聚合酶链反应分别扩增LMNA基因功能区12个外显子及附近部分内含子,双脱...
关键词：扩张型心肌病 核纤层蛋白基因 单核苷酸多态性 
HIV－1载体中存在着提高转录和翻译基因的元件
《医学分子生物学杂志》2010年第5期377-381,共5页孙凤强 方彧聃 王娟 张帆 马海燕 张敬之 
国家高技术研究发展计划（863计划）（No.2007AA021206）,国家自然科学基金（No.30870943）,上海市自然科学基金（No.08ZRl412100）
目的研究HIV-1载体中的一些元件如Rev和Tat蛋白对其骨架的转录及外源基因表达水平的影响。方法将HIV-1表达GFP载体（FUGW）单独或分别与Rev蛋白表达质粒（pLP2）、Tat蛋白表达质粒（pcDNA3.1-Tat），及表达Rev和Tat蛋白的质粒（△8．9...
关键词：HIV-1载体 Rev蛋白 TAT蛋白 Rev应答元件 转录启动反应因子 
应用荧光实时定量PCR方法检测重组慢病毒滴度及其感染效率被引量：14
《生命科学研究》2009年第5期394-398,共5页马海燕 方彧聃 张敬之 
国家高技术研究发展计划项目(2007AA021206);国家自然科学基金资助项目(30870943);上海市自然科学基金资助项目(08ZR1412100)
慢病毒载体已经广泛应用于动物模型中基因治疗的研究和转基因动物的制备,而准确地测定重组慢病毒的滴度和感染效率是其关键步骤.通过荧光实时定量PCR的方法定量分析重组慢病毒的颗粒数以及病毒的活性滴度,并以GFP报告基因的方法作为对...
关键词：慢病毒载体 荧光实时定量PCR 病毒滴度 整合拷贝数 感染效率 
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