云彦

作品数：11被引量：27H指数：3
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供职机构：西北农林科技大学动物医学院陕西省干细胞工程技术研究中心更多>>
发文主题：显微注射体外转录牛卵母细胞真核表达真核表达载体构建更多>>
发文领域：农业科学生物学更多>>
发文期刊：《畜牧兽医学报》《中国农业科学》《中国兽医学报》《农业生物技术学报》更多>>
所获基金：国家高技术研究发展计划国家自然科学基金中国博士后科学基金教育部科学技术研究重点项目更多>>
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猪H1foo基因的克隆与真核表达载体的构建被引量：1
《农业生物技术学报》2012年第1期85-93,共9页李伟 吴苏君 杨文琳 史芸安 井勇 赵贵民 云彦 雷安民 
陕西省2009年13115科技创新工程重大科技专项(No.2009ZDKJ-23)
卵特异性连接组蛋白(oocyte-specific linker histone H1,Hlfoo)是在哺乳动物卵母细胞与早期胚胎内特异表达的连接组蛋白,它在卵母细胞生长成熟、受精及胚胎发育中起关键性作用。本研究旨在克隆猪H1foo基因,并构建其真核表达载体。首先...
关键词：H1foo基因 5'RACE 体外转录 显微注射 猪卵母细胞 
p21基因在牛卵成熟中的表达检测及其真核表达载体构建被引量：3
《畜牧兽医学报》2011年第8期1071-1080,共10页赵贵民 杨文琳 吴苏君 云彦 雷安民 
2009-2011年西北农林科技大学青年科学基金项目(Z109021004)
本研究旨在检测p21基因在牛卵成熟过程中的表达,并构建其真核表达载体。首先利用RT-PCR和免疫荧光染色对不同成熟阶段牛卵内p21的mRNA和蛋白表达进行检测。然后从牛成纤维细胞中克隆了p21基因并构建pVenus-P21真核表达载体。经脂质体200...
关键词：牛卵母细胞 P21基因 体外转录 显微注射 
牛卵母细胞对成纤维细胞重编程作用被引量：2
《农业生物技术学报》2011年第4期719-724,共6页吴苏君 马晓玲 赵贵民 杨文琳 云彦 雷安民 
国家高技术研究发展计划(863)项目(No.2008AA101010)资助
转录因子nanog和oct-4是细胞具有多潜能性的关键调控因子,一般认为它们的表达是细胞具有多潜能性和自我更新能力的标志。本研究将牛成纤维细胞(BEF422)分别移入GⅤ期和MⅡ期卵母细胞,体外培养24h后,RT-PCR检测其nanog和oct-4基因的表达...
关键词：成纤维细胞 GV期/MⅡ期卵母细胞 重编程 NANOG OCT-4 
牛去核卵母细胞能够被孤雌激活并发育到桑椹胚被引量：2
《农业生物技术学报》2010年第1期87-91,共5页王志伟 胡勇策 马晓玲 刘文强 殷吉庆 云彦 雷安民 
西北农林科技大学留学回国人员科研启动项目(No.Z111020723)资助
为了探讨实验牛去核卵母细胞能否被激活,及其激活后的发育能力,本研究利用化学激活法对牛去核卵母细胞进行孤雌激活,然后在体外颗粒细胞饲养层上进行培养,同时在不同的时间采用免疫荧光技术对α-微管蛋白(α-tubulin)进行染色,以观察去...
关键词：牛卵母细胞 Hoechst染色 激光共聚焦 
牛生发泡期裸卵体外成熟培养体系的建立被引量：2
《农业生物技术学报》2010年第1期198-204,共7页隋进强 云彦 刘文强 殷吉庆 胡勇策 雷安民 
西北农林科技大学留学回国人员科研启动项目(No.Z111020723)资助
本研究通过牛(Bos taurus)卵母细胞体外成熟培养不同时间(0和10h),剥除卵母细胞外周的颗粒细胞后继续培养,观察其与不脱颗粒细胞正常体外成熟培养卵母细胞之间的差异。研究结果显示:成熟培养0脱颗粒细胞的卵母细胞,与正常成熟培养的卵...
关键词：牛 卵母细胞 显微注射 MRNA 质粒 
小鼠生殖细胞特异基因Oct4启动子片段克隆及报告载体构建被引量：1
《农业生物技术学报》2010年第1期61-65,共5页刘文强 曹晖 殷吉庆 云彦 华进联 雷安民 
留学回国人员科研启动项目(Z111020723);教育部重点科研项目(109148);中国博士后科学基金特别资助(2000801438);留学回国人员科研启动项目(14110101)共同资助
本研究通过PCR方法从小鼠(Mus musculus)基因组中扩增出Oct4启动子的CR4区和CR1区,将其克隆到真核报告载体pEGFP-1,构建了携带Oct4启动子片段的小鼠生殖细胞特异性报告载体CR1,4-pEGFP-1。用该载体转染多种细胞,在荧光显微镜下观察绿色...
关键词：OCT4 生殖细胞 转染 
微量牛卵中H1 foo CDS序列的克隆及其mRNA向卵内显微注射被引量：6
《畜牧兽医学报》2009年第11期1630-1637,共8页云彦 吴苏君 隋进强 胡勇策 雷安民 
2007年西北农林科技大学留学回国人员科研启动经费(Z111020723)
本研究旨在优化从微量卵中克隆基因的条件,并构建牛H1foo基因真核表达载体。首先将微量（1~5个）卵母细胞裂解后,用改进的RT-PCR方法扩增内参β-actin基因以检测该方法扩增基因的效率,结果表明单卵扩增成功率为80%以上（10/12）,3个、5...
关键词：微量卵母细胞 RT-PCR 牛H1 foo基因 体外转录 
牛Nanog基因真核表达载体构建及有效干扰序列筛选被引量：1
《中国农业科学》2008年第12期4180-4186,共7页云彦 郑喜邦 刘文强 窦忠英 雷安民 
国家“863”项目(2005AA219050);陕西省重大科技专项(2006kz05-G1)
【目的】构建牛Nanog基因的真核表达载体pVenus-Nanog,筛选对其有效的干扰序列。【方法】以含有牛Nanog基因的PMD-18T-Nanog重组质粒为模板,经PCR扩增目的片段,将其克隆到真核表达载体pVenus上,酶切及测序鉴定正确后命名为pVenus-Nanog...
关键词：牛 NANOG基因 真核表达 RNAI 
牛nanog基因原核表达载体构建及其在大肠杆菌中的表达被引量：2
《农业生物技术学报》2008年第5期770-774,共5页郑喜邦 云彦 胡勇策 王华岩 窦忠英 
国家高技术研究与发展计划(863)项目(No.2005AA219050);教育部重大项目(No.03160);国家自然科学基金(No.36071067);陕西省重大科技专项(No.2006kz05-G1)资助
从6周龄的胎牛(Bostaurus)原始生殖嵴中提取总RNA,通过RT-PCR扩增nanog基因,将其克隆到PMD-18T载体,然后再亚克隆到pGEX-KG表达载体上,获得原核表达质粒pGEX-KG-nanog,限制性内切酶分析和DNA测序证明所插入片段为牛nanog基因编码序列。...
关键词：nanog分子克隆 原核表达 牛 
牛Nanog基因克隆及其在皮肤成纤维细胞中的表达被引量：4
《畜牧兽医学报》2008年第5期547-554,共8页郑喜邦 云彦 胡勇策 李勇 王华岩 窦忠英 
科技部“863”项目(2005AA219050);教育部重大项目(03160);陕西省重点项目(2006kz05-G1)资助
本研究克隆了牛Nanog基因,构建其真核表达载体,并转染皮肤成纤维细胞,获得能够用作核移植供核细胞的稳定转染细胞株。从6周龄的胎牛原始生殖嵴中提取总RNA,通过RT-PCR扩增Nanog基因,将其克隆到pMD-18T载体,再从酶切鉴定和测序正确的质...
关键词：牛 NANOG 分子克隆 真核表达 
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