刘兴汉

作品数:7被引量:10H指数:1
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供职机构:中国农业科学院哈尔滨兽医研究所更多>>
发文主题:基因工程菌F融合蛋白腹泻基因工程更多>>
发文领域:农业科学生物学医药卫生更多>>
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ST_1肠毒素基因的合成、克隆及其融合蛋白的高效表达被引量:1
《中国畜禽传染病》1998年第4期221-222,共2页刘兴汉 王莉林 张绍杰 初晓白 
国家自然科学基金
用DNA合成仪合成了编码ST1肠毒素第58到72位氨基酸残基的DNA片段,并将其与表达融合蛋白的载体PGEMEX-1重组,转化受体菌JM109(DE-3)。筛选出的重组克隆经过1PTG4小时诱导,ST1融合蛋白的产量...
关键词:ST1肠毒素 基因重组 融合蛋白 高效表达 
ST_1肠毒素融合蛋白的纯化及部分特性分析被引量:1
《中国畜禽传染病》1998年第1期23-26,共4页刘兴汉 王莉林 张绍杰 初晓白 
国家自然科学基金
用SephadexG150凝胶和DE32离子交换层析,从重组菌PGEMST2株内分离、纯化ST1肠毒素融合蛋白,回收的ST1肠毒素融合蛋白占细菌总蛋白量的315%。SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳条件呈一条蛋白带。S...
关键词:肠毒素 融合蛋白 纯化 免疫原性 
K_(88)、K_(99)、F_(41)三价基因工程菌的构建被引量:7
《中国畜禽传染病》1991年第6期46-49,共4页刘兴汉 王莉林 初晓白 张绍杰 
利用基因工程技术构建的带有K_(99)和F_(41)两种纤毛抗原基因的重组质粒与K_(88)抗原工程菌C_(84)的质粒转化同一受体菌,得到双质粒。同时表达K_(88)、K_(99)、F_(41)三种纤毛抗原的菌株。用小白鼠试验初步证实。该菌株生物学性质稳定,...
关键词:基因工程 三价基因菌  腹泻 
K_(99)—F_(41)双纤毛菌的构建被引量:1
《生物技术》1991年第5期26-29,共4页张绍杰 刘兴汉 
产肠毒素大肠杆菌能引起仔猪、犊牛、羔羊等新生幼畜发生急性腹泻、K_(99)和F_(41)是这类产肠毒素大肠杆菌所产生的两种在免疫性质上不同的纤毛抗原。 提取K_(99)质粒,用HindⅢ酶消化,再用低熔点琼脂糖电泳回收分子量约为11Md的K_(99)的...
关键词:纤毛抗原 双纤毛菌 基因工程菌 
用亲和层析技术鉴别布氏菌强弱毒差异抗原成分
《生物技术》1991年第4期28-32,共5页刘兴汉 
采用CDI和CCA两种方法活化Sepharose4B,制备亲和层析柱,并对这两种方法的优劣进行了比较。分别用超声液破碎和Ribi机器压榨制备布氏菌强毒M28株和疫苗M25株的可溶性抗原,作为亲和层析柱的配基。抗M28的血清经过M28和M5柱,洗脱液中的抗...
关键词:布鲁氏菌 抗原 亲和层析 
质粒pBR_(322)电注入E.coliHB_(101)的研究
《生物技术》1991年第2期9-12,共4页初晓白 刘兴汉 
常用的转化方法是用CaCl_2或CaCl_2/RbCl_2处理受体菌使成感受态。转化率约为10~3—10~6个转化子/μg质粒DNA。近年发展起来的电转化技术可使转化率提高到lC^(?)—10^(10)个转化子/μg质粒DNA。我们以质粒pBR322和大肠杆菌HB101为实验材...
关键词:质粒 电转化 大肠杆菌 
布氏杆菌M28株染色体基因库的建立
《中国畜禽传染病》1991年第1期46-49,共4页刘兴汉 
分别以PBR328和λgt11为载体建立了布氏杆菌强毒M28株染色体基因库。用超声波切割染色体 DNA,EcoRV酶切 PBR328,经平端连接重组、转化 RRI,转化率为2.5×10~1/ml,重组率为30%,得重组子1500余个.用 EccRI 人工接头将超声波切割的染色体 D...
关键词:布氏杆菌病 M28株 染色体 基因库 
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