尹尚莲

作品数：9被引量：63H指数：4
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供职机构：云南出入境检验检疫局更多>>
发文主题：克隆羊痘病毒小反刍兽疫病毒单克隆抗体竞争ELISA更多>>
发文领域：农业科学生物学更多>>
发文期刊：《猪业科学》《中国农学通报》《畜牧兽医学报》《中国兽医科学》更多>>
所获基金：国家质检总局科技计划项目国家科技重大专项国家高技术研究发展计划质检公益性行业科研专项项目更多>>
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小反刍兽疫病毒竞争ELISA检测试剂盒生产工艺研究被引量：2
《中国畜牧兽医》2014年第9期31-34,共4页刘晓慧 杨云庆 叶玲玲 祝贺 吕建强 赵文华 颜红 尹尚莲 花群义 杨仕标 张光培 周晓黎 董俊 艾军 
国家863项目(2012AA101301);质检公益性行业科研专项(201310093);国家质检总局科技计划项目(2007IK025)
为研究小反刍兽疫病毒(PPRV)竞争ELISA试剂盒的生产工艺,本试验利用昆虫细胞表达的PPRV核蛋白及其单克隆抗体,建立一种特异性高、敏感性强的PPRV竞争ELISA检测方法,并对该方法的各个步骤进行优化,确定该方法的最适条件,从而确定竞争ELIS...
关键词：小反刍兽疫病毒 N蛋白 单克隆抗体 竞争ELISA 
小反刍兽疫病毒核蛋白单克隆抗体的制备与初步应用被引量：4
《畜牧兽医学报》2012年第4期588-595,共8页龙云凤 周晓黎 杨俊兴 王琼 祝贺 叶玲玲 董俊 吕建强 王金萍 陈朝银 花群义 杨仕标 尹尚莲 徐维佳 艾军 
国家高新技术研究发展计划(863计划)项目(2012AA100501);国家质检总局科技计划项目(2007IK025)
针对小反刍兽疫病毒核蛋白制备特异性的单克隆抗体,并对其进行生物学特性鉴定和初步应用。以纯化的Bacmid-PPRV-N重组蛋白为抗原免疫BALB/c小鼠,取免疫小鼠的致敏脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞在PEG作用下融合,获得单克隆抗体,并通过染色体...
关键词：小反刍兽疫 单克隆抗体 生物学特性 竞争ELISA 
非洲猪瘟病毒VP73基因克隆及在大肠杆菌中的高效表达被引量：4
《中国生物工程杂志》2006年第11期8-13,共6页常华 花群义 段纲 杨云庆 周晓黎 董俊 尹尚莲 项勋 曾昭文 
国家"十五"重大科技攻关项目(2001BA804A48)
参照Genebank中非洲猪瘟VP73基因序列,人工合成的VP73全基因克隆至pMD18-T克隆载体质粒中,采用PCR扩增得到1188bp的VP73基因;将VP73基因片段亚克隆插入pBAD/Thio表达载体,经测序鉴定,筛选获得VP73基因正向插入、有正确读码框的阳性克隆...
关键词：非洲猪瘟病毒 VP73基因 克隆 表达 
小反刍兽疫病毒H糖蛋白基因原核表达载体的构建及表达被引量：11
《中国兽医科学》2006年第9期692-695,共4页刘玉洪 花群义 徐自忠 杨云庆 周晓黎 董俊 尹尚莲 许靖逸 高洪 
国家"十五"重大科技攻关项目(2001BA804A48)
参照GenBank中小反刍兽疫病毒(PPRV)H抗原基因序列,人工合成了PPRV H基因,将其克隆至pUC18-T质粒中,转化E.coliJM109感受态细胞,构建并选择PPRV H基因克隆重组质粒,经核苷酸序列分析正确,将其克隆至pBAD/Thio-TOPO载体中,转化E.coliTOP1...
关键词：小反刍兽疫病毒 H糖蛋白基因 表达 
羊痘病毒实时荧光定量TaqMan PCR检测方法的建立被引量：24
《中国兽医科学》2006年第7期529-533,共5页康文玉 徐自忠 花群义 杨云庆 周晓黎 董俊 尹尚莲 高洪 
国家质检总局重点科技项目(2004IK1113-1)
参照羊痘病毒(CaPV)P32的基因序列,设计合成了2套引物和1条探针,建立了实时荧光定量PCR技术,对细胞培养物、皮肤丘疹、痂皮等组织病料中的GPV进行了特异性检测和敏感性试验。结果显示,用300 nmol／L引物浓度和200 nmol／L探针浓度,获得...
关键词：羊痘病毒 荧光定量TaqMan PCR 检测 
羊痘病毒P32蛋白编码基因的克隆及表达被引量：13
《中国兽医科学》2006年第6期454-459,共6页康文玉 徐自忠 花群义 杨云庆 周晓黎 董俊 尹尚莲 高洪 
国家质检总局重点科技项目(20041K113-1)
为获得山羊痘病毒膜蛋白重组P32抗原,根据其基因序列设计合成了1对特异性引物, 对CaPV P32基因进行了PCR扩增,产物大小约为969 bp;产物回收纯化后,将其克隆至pBAD／ Thio-TOPO载体中,转化TOP10大肠埃希氏菌感受态细胞,与已报道的多株CaP...
关键词：山羊痘病毒 P32蛋白 克隆 表达 
生物芯片、核酸序列依赖性扩增法及荧光定量PCR在检测方面的研究进展被引量：3
《畜牧兽医杂志》2006年第3期26-28,31,共4页刘玉洪 徐自忠 花群义 高洪 杨云庆 周晓黎 董俊 尹尚莲 
最近几年才兴起的生物芯片、核酸序列依赖性扩增法(NASBA)及荧光定量PCR技术同传统的实验方法相比有灵敏性高,特异性强,快速,高通量等优点,而倍受中外学者的青睐。但仍有好多初学者对这方法的知识了解甚少,本文就生物芯片、核酸序列依...
关键词：生物芯片 NASBA 荧光定量 检测 
非洲马瘟病毒VP7基因的克隆与表达被引量：4
《中国农学通报》2006年第10期49-53,共5页曾昭文 花群义 段纲 周晓黎 董俊 杨云庆 尹尚莲 项勋 常华 
国家质检总局重点科技项目"非洲马瘟检验技术研究"(2002IK009-02)
为获得非洲马瘟病毒VP7蛋白,以用于制备AHS血清学诊断试剂并为AHS新型疫苗的构建奠定基础,笔者采用原核表达系统表达VP7蛋白。在GeneBank中查找非洲马瘟病毒VP7基因序列,人工合成VP7基因,将VP7基因片段克隆插入pBAD/Thio-TOPO表达载体,...
关键词：非洲马瘟病毒 VP7基因 克隆 表达 
检验检疫新技术研究进展
《猪业科学》2006年第2期42-44,共3页刘玉洪 徐自忠 花群义 高洪 杨云庆 周晓黎 董俊 尹尚莲 
最近几年才兴起的生物芯片、核酸序列依赖性扩增法(NASBA)及荧光定量PCR技术同传统的实验方法相比有灵敏性高,特异性强,快速,高通量等优点,而倍受中外学者的青睐。但仍有好多初学者对这方法的知识了解甚少,为了解决这一问题,本文就从生...
关键词：生物芯片 NASBA 荧光定量 检测 
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