杜金玲

作品数：13被引量：44H指数：5
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供职机构：中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室更多>>
发文主题：猪流感HA基因病毒拯救A型禽流感病毒原核表达更多>>
发文领域：农业科学生物学医药卫生更多>>
发文期刊：《中国农业科学》《生物化学与生物物理进展》《黑龙江畜牧兽医》《动物医学进展》更多>>
所获基金：黑龙江省自然科学基金国家科技支撑计划“十一五”国家科技支撑计划更多>>
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A型禽流感病毒不同拷贝数基质蛋白胞外区基因的原核表达及免疫保护力研究被引量：11
《中国预防兽医学报》2010年第10期795-799,共5页李洪涛 张新涛 刘明 刘春国 杜金玲 石薇琳 孙恩成 
国家"十一五"科技支撑计划资助项目(2006BAD06A05);黑龙江省自然科学基金项目(ZJN0702-02)
为研究含禽流感病毒(AIV)不同拷贝数基质蛋白胞外功能区(M2e)亚单位疫苗在SPF鸡体中的免疫保护效力差异,根据已发表的高致病性AIV M2基因序列设计合成两对引物,利用PCR技术扩增单个M2e基因片段,以此为基础顺次串联得到不同拷贝数的M2e...
关键词：A型禽流感病毒 M2e基因 原核表达 多克隆抗体 免疫保护力 
A型禽流感病毒M2蛋白胞外功能区(M2e)基因的原核表达和免疫原性分析被引量：1
《中国兽医科学》2010年第4期357-362,共6页张新涛 刘明 杜金玲 刘春国 李洪涛 孙恩成 石薇琳 
国家“十一五”科技支撑计划项目(2006BAD06A05);黑龙江省自然科学基金项目(ZJN0702-02)
为研究A型禽流感病毒M2蛋白胞外功能区(M2e)蛋白亚单位疫苗在鸡体的免疫保护力,利用笔者所在实验室已构建的含M2e基因的质粒pGEM-T-1459,获得顺次串联的基因片段3M2e,将其克隆到原核表达载体pMAL-C2x中,经酶切和DNA测序鉴定正确后转化...
关键词：A型禽流感病毒 M2e基因 原核表达 免疫原性 
抗猪流感病毒HA蛋白单克隆抗体重链基因的克隆及序列分析被引量：1
《中国预防兽医学报》2010年第2期151-153,共3页张新涛 李洪涛 刘明 刘春国 杜金玲 
国家科技支撑计划项目(2006BAD06A05);黑龙江省自然科学基金(ZJN0702-02)
为获得抗猪流感病毒HA蛋白单克隆抗体(MAb)重链可变区基因,提取MAb杂交瘤细胞8C4总RNA,通过RT-PCR扩增其重链可变区基因。其DNA序列与GenBank数据库和IMGT/V-QUEST软件比对,序列包含CDR1、CDR2、CDR33个高变区,CDR1含GYTFTSYY 8个氨基酸...
关键词：猪流感 重链可变区 序列分析 
H1亚型猪流感病毒HA基因DNA疫苗的构建及其对Balb/c小鼠的免疫效果评价被引量：9
《中国生物工程杂志》2009年第10期38-43,共6页刘春国 刘明 李洪涛 杜金玲 张新涛 石薇琳 
以A/Swine/Guangdong/LM/2004(H1N1)猪流感病毒HA基因为模板,通过RT-PCR技术扩增出HA基因,并将其克隆到pCI-neo真核表达载体中,成功构建重组表达质粒pCI-HA,瞬时转染vero E6和293T细胞,通过免疫过氧化物酶单层细胞试验(Immunoperoxidase...
关键词：猪流感 H1亚型 HA基因 DNA疫苗 免疫保护 
密码子优化的H5亚型流感病毒HA基因重组质粒在哺乳动物细胞中的高效表达及其免疫原性的研究被引量：1
《自然科学进展》2009年第8期813-818,共6页刘春国 刘明 孙恩成 李洪涛 杜金玲 张新涛 石薇琳 谢金鑫 刘大飞 
国家"十一五"科技支撑计划(批准号:2006BAD06A05);黑龙江省自然科学基金(批准号:ZJN-0702-02)资助项目
为了提高流感病毒血凝素(HA)基因的表达量及其免疫原性,按照哺乳动物偏爱密码子将A/Goose/HLJ/QFY/04(H5N1)流感病毒的血凝素基因进行优化改造,然后插入到真核表达载体pCI-neo中,构建了真核表达质粒pCI-opti-HA.将此质粒和含野生HA基因...
关键词：H5亚型 流感病毒 HA 密码子优化 DNA疫苗 免疫效果 
H3N2亚型猪流感病毒的拯救及HA与NA基因的替换
《微生物学报》2009年第6期813-819,共7页杜金玲 刘明 刘春国 杨涛 李洪涛 
国家"十一五"科技支撑计划资助项目(2006BAD06A05);黑龙江省自然科学基金项目(ZJN0702-02)~~
【目的】为研究流感病毒突破种间屏障分子机制,筛选流感基因工程疫苗株。【方法】本试验以猪流感病毒A/Swine/Henan/S4/01(H3N2)为亲本株,利用反向遗传学操作技术,采用RT-PCR技术对该病毒的8个基因片段分段进行扩增,通过与双向转录载体p...
关键词：猪流感 反向遗传 RT-PCR H3N2亚型 病毒拯救 
H3N8亚型马流感病毒拯救体系的建立
《中国兽医科学》2009年第5期377-382,共6页杜金玲 刘明 刘春国 李洪涛 张新涛 石薇琳 
国家"十一五"科技支撑计划项目(2006BAD06A05);黑龙江省自然科学基金项目(ZJN-0702-02)
利用反向遗传学操作技术,以马流感病毒(EIV)A/Equine/Fuyun/2008/(H3N8)为亲本株,采用RT-PCR技术对该毒株的8个基因片段分段进行扩增,通过与双向转录载体pHW2000连接,重组质粒转染293T和MDCK共培养细胞,成功拯救出全部基因均来自亲本株...
关键词：马流感病毒 反向遗传 反转录聚合酶链式反应 H3N8亚型 病毒拯救 
A型流感病毒核蛋白结构和功能的研究进展被引量：2
《黑龙江畜牧兽医》2009年第9期17-19,共3页杜金玲 刘春国 刘明 李洪涛 张新涛 石薇琳 
"十一五"国家科技支撑计划项目(2006BAD06A05);黑龙江省自然科学基金项目(ZJN-0702-02)
A型流感病毒为重要的传染性病原。流感病毒核蛋白是病毒转录装置中的结构成分,在病毒生活周期中执行多种重要功能,文章简要综述了核蛋白在流感病毒结构和功能方面的研究进展,以便为促进疫苗的设计和抗病毒治疗药物的研制提供借鉴。
关键词：流感病毒 核蛋白 结构与功能 
H1N1亚型猪流感病毒反向遗传操作系统的建立及高产细胞型疫苗株的拯救被引量：5
《中国农业科学》2009年第5期1797-1804,共8页刘大飞 刘明 刘春国 杨涛 万春和 陈浩 齐金龙 杜金玲 李洪涛 孙恩成 刘大程 
国家“十一五”科技支撑计划资助项目(2006BAD06A05);黑龙江省自然科学基金项目(ZJN-0702-02)
【目的】建立H1N1亚型猪流感病毒反向遗传学操作系统及拯救出能够在动物传代细胞中高水平复制的H1N1亚型猪流感疫苗株。【方法】利用反向遗传操作技术,对猪流感病毒广东分离株进行拯救。【结果】首次成功拯救出全部片段均来自于亲本株...
关键词：猪流感 H1N1亚型 反向遗传操作技术 细胞培养型流感疫苗 
重组H5N3亚型禽流感细胞毒灭活疫苗免疫佐剂效果的评价被引量：1
《中国预防兽医学报》2009年第3期217-222,共6页刘春国 刘明 万春和 陈浩 李洪涛 孙恩成 杜金玲 刘大飞 
科技支撑计划(2006BAD06A05);黑龙江省自然科学基金(ZJN0702-02)
为评价佐剂对疫苗免疫效果的影响,本试验以反向遗传学技术拯救的重组H5N3亚型禽流感病毒为种毒,对国产矿物油以及赛比克公司提供的MontanideTM ISA 70MVG(简称70M)和MontanideTM ISA 206 VG(简称206)3种佐剂制备的灭活疫苗进行了SPF鸡...
关键词：禽流感 H5N1亚型 细胞苗 佐剂 
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