毕世樑

作品数:14被引量:27H指数:3
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供职机构:四川大学华西第二医院妇产科更多>>
发文主题:阴道毛滴虫基因腺苷酸激酶真核表达载体PCR更多>>
发文领域:医药卫生生物学更多>>
发文期刊:《四川动物》《四川医学》《预防医学情报杂志》《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》更多>>
所获基金:国家自然科学基金更多>>
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四川地区阴道毛滴虫内人型支原体的PCR检测被引量:3
《四川动物》2009年第6期874-876,共3页朱晓燕 王雅静 毕世樑 张仁刚 
从临床上分离获得20株阴道毛滴虫虫株,经纯化培养后,提取基因组DNA。以人型支原体16S rDNA序列设计特异性引物,利用PCR技术检测阴道毛滴虫内的人型支原体,结果有13株为人型支原体阳性,感染率为65%,表明阴道毛滴虫与人型支原体的共生关...
关键词:阴道毛滴虫 人型支原体 PCR 
阴道毛滴虫AK基因原核表达质粒的构建及在大肠埃希菌中的表达
《预防医学情报杂志》2009年第11期889-891,共3页帖超男 王雅静 谢辉 毕世樑 刘佩娜 廖琳 
国家自然科学基金(No.39970667)
目的构建阴道毛滴虫氢化酶体腺苷酸激酶(adenynate kinase,以下简称AK)基因原核表达质粒并予以表达。方法AKDNA的克隆载体PMD-18T-AK经限制性内切酶BamHI和XbaI双酶切,得到含这2个酶切位点之AKDNA片段,T4连接酶连接到含有2个酶切位点的...
关键词:阴道毛滴虫 氢化酶体 腺苷酸激酶 基因 原核表达质粒 
阴道毛滴虫粘附蛋白65-3基因真核表达载体的构建与鉴定
《四川医学》2009年第4期460-462,共3页朱晓燕 王雅静 毕世樑 张仁刚 
目的构建并鉴定阴道毛滴虫粘附蛋白65-3基因的真核表达载体。方法Trizol试剂提取阴道毛滴虫株基因组总RNA,RT-PCR扩增粘附蛋白65-3基因,定向克隆入pMD-18T线性质粒,重组子经双酶切、PCR鉴定及测序分析。鉴定正确的重组质粒pMD-18T-ap65-...
关键词:阴道毛滴虫 粘附蛋白65-3基因 真核表达载体 
阴道毛滴虫氢化酶体腺苷酸激酶基因真核表达载体的构建与鉴定被引量:1
《预防医学情报杂志》2008年第11期862-865,共4页帖超男 王雅静 谢辉 毕世樑 刘佩娜 廖琳 
国家自然科学基金(No.39970667)
目的构建阴道毛滴虫氢化酶体腺苷酸激酶(adenynate kinase,AK)基因真核表达载体并予以鉴定。方法根据AK基因已知序列设计合成一对引物,应用PCR技术从阴道毛滴虫基因组DNA中扩增出AK基因,并将其克隆入pMD18-T Simple载体。阳性克隆的重...
关键词:阴道毛滴虫 氢化酶体 腺苷酸激酶 基因 克隆 序列分析 真核表达载体 
阴道毛滴虫黏附蛋白65-3基因原核表达质粒的构建及表达
《四川动物》2008年第2期273-276,共4页朱晓燕 王雅静 杨树国 毕世樑 廖琳 
质粒pMD-18T-ap65-3经XhoI和BamHI双酶切,1.0%凝胶电泳后纯化回收阴道毛滴虫黏附蛋白65-3基因,定向克隆至原核表达载体pET-32a(+),构建原核表达质粒pET32a-ap65-3。重组质粒转化大肠埃希菌JM109感受态细胞中,筛选阳性克隆,进行PCR、酶...
关键词:阴道毛滴虫 黏附蛋白65-3 原核表达质粒 基因表达 
阴道毛滴虫黏附蛋白65-3基因的cDNA克隆与序列分析被引量:1
《热带医学杂志》2007年第8期715-717,725,共4页朱晓燕 王雅静 杨树国 毕世樑 廖琳 
国家自然科学基金(No.39970667)
目的对阴道毛滴虫黏附蛋白65-3基因进行cDNA克隆与序列分析。方法Trizol试剂提取阴道毛滴虫基因组RNA。以总RNA为模板,RT-PCR扩增黏附蛋白65-3基因,定向克隆入pMD-18T线形载体,构建pMD-18T-ap65-3重组质粒,并进双行酶切﹑PCR鉴定及测序...
关键词:阴道毛滴虫 黏附蛋白65-3 基因克隆 序列分析 
阴道毛滴虫黏附蛋白33基因真核表达载体的构建与鉴定
《热带医学杂志》2006年第10期1068-1070,1119,共4页杨树国 王雅静 帖超男 谢辉 毕世樑 刘佩娜 廖琳 
目的构建并鉴定阴道毛滴虫黏附蛋白33基因(adhesionprotein33gene,ap33gene)真核表达载体。方法提取阴道毛滴虫分离株基因组DNA,PCR扩增黏附蛋白33基因,克隆入pMD-18T线性质粒,重组子经双酶切、PCR鉴定及测序分析。鉴定出的重组质粒pMD-...
关键词:阴道毛滴虫 黏附蛋白33 真核表达载体 
阴道毛滴虫多克隆抗体的制备及Fd基因的原核表达
《四川动物》2006年第4期692-694,共3页谢辉 王雅静 帖超男 毕世樑 刘佩娜 廖琳 
目的-将阴道毛滴虫铁氧还蛋白(ferredoxin,Fd)基因在大肠埃希菌中诱导表达。方法-制备阴道毛滴虫可溶性抗原,多点注射免疫家兔,获得的血清用ELISA测定其抗体效价。将原核表达重组质粒pET3C-Fd转化入大肠埃希菌BL21(DE3)感受态细胞中,异...
关键词:阴道毛滴虫 铁氧还蛋白 多克隆抗体 基因表达 
阴道毛滴虫铁氧还蛋白基因真核表达质粒的构建
《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》2006年第1期72-73,共2页谢辉 王雅静 帖超男 毕世樑 刘佩娜 
作者用螯合树脂(Chelex-100)提取阴道毛滴虫基因组DNA,PCR扩增出阴道毛滴虫铁氧还蛋白(ferredoxin,Fd)基因,克隆入pMD-18T载体,亚克隆至pcDNA3·1(+)真核表达质粒。经PCR及酶切鉴定,Fd基因体外扩增产物为306bp,与已知序列吻合。成功构建...
关键词:阴道毛滴虫 铁氧还蛋白 真核表达 质粒 基因克隆 
阴道毛滴虫铁氧还蛋白基因的克隆和序列分析被引量:2
《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》2005年第1期24-26,共3页谢辉 王雅静 帖超男 毕世樑 刘佩娜 
目的 构建阴道毛滴虫铁氧还蛋白 (ferredoxin ,Fd)基因重组质粒 ,并进行克隆及序列分析。 方法 根据Fd基因已知序列 ,设计合成 1对引物 ,应用螯合树脂 (Chelex 10 0 )提取基因组DNA ,用聚合酶链反应 (PCR)扩增出Fd基因 ,克隆入pMD 18...
关键词:阴道毛滴虫 蛋白基因 克隆 吻合 PCR 序列分析 测序 酶切 增产 引物 
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