金蕊

作品数：10被引量：3H指数：1
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供职机构：军事医学科学院生物工程研究所更多>>
发文主题：端粒HPOT1端粒酶免疫荧光GST更多>>
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核糖核酸酶A在端粒免疫荧光原位杂交实验中的应用被引量：1
《生物技术通讯》2017年第5期681-684,共4页于芳 金蕊 黄君健 
目的:在端粒免疫荧光原位杂交实验中,降低核仁着色对端粒图像清晰度的影响。方法:分别将0.1、0.2、0.4 mg/m L的核糖核酸酶(RNase)A与待检标本于37℃消化过夜,然后进行端粒原位杂交实验。结果:0.4 mg/m L RNase A可以消除Hep G2细胞端...
关键词：核糖核酸酶A 免疫荧光原位杂交(IF-FISH) 端粒 
Pot1通过泛素化修饰影响自身的稳定性
《生物技术通讯》2015年第2期170-173,共4页杨丹丹 金蕊 张金丁 王亚楠 黄君健 魏道智 
国家自然科学基金(81171916)
目的：研究Pot1蛋白的稳定性。方法：利用慢病毒表达载体构建表达外源Flag-Pot1的HeLa细胞稳定克隆，在该克隆中加入CHX抑制新蛋白的合成，检测外源Pot1的半衰期，确定Pot1的稳定性；将Pot1质粒与Ub质粒共转293T细胞后，加入MG132阻止...
关键词：Pot1 稳定性 泛素化 
TPP1基因慢病毒干扰载体的构建及鉴定
《生物技术通讯》2014年第6期760-764,共5页张金丁 金蕊 杨丹丹 王亚楠 黄君健 苏金为 
国家自然科学基金面上项目(81171916)
目的:构建抑制TPP1基因的短发夹RNA(sh RNA)干扰载体。方法:以人的TPP1基因为靶序列,设计并合成sh RNA序列TPP1-si1和TPP1-si2,分别与RNA干扰慢病毒载体pll3.7连接,双酶切鉴定质粒得到阳性克隆pll-TPP1-si1和pll-TPP1-si2,经测序正确后...
关键词：TPP1基因 SHRNA干扰 WESTERN印迹 免疫荧光 
MDM2与端粒保护蛋白1的相互作用及其功能
《生物技术通讯》2014年第4期497-500,共4页王亚楠 金蕊 马世良 黄君健 
国家自然科学基金面上项目(81272233)
目的:探究鼠双微体2同源体(MDM2)与端粒保护蛋白1(POT1)在细胞水平是否有相互作用,及其是否发挥E3泛素化连接酶的功能。方法:首先,用蛋白酶体抑制剂MG132处理稳定表达Flag-POT1的HeLa细胞,Western印迹检测Flag-POT1的表达情况;其次,在H...
关键词：鼠双微体2同源体 端粒保护蛋白1 HELA细胞 免疫共沉淀 
核磷蛋白NPM1的RNA干扰慢病毒载体的构建及鉴定
《生物技术通讯》2014年第1期21-24,共4页王亚楠 金蕊 张宪 马世良 黄君健 
国家自然科学基金国际(地区)合作与交流项目(81261160505)
目的:构建高效抑制核磷蛋白NPM1基因的短发夹RNA(shRNA)干扰载体。方法:以人NPM1基因为靶序列,设计并合成shRNA序列,将其连入RNA干扰慢病毒载体pll3.7;酶切鉴定插入shRNA序列片段的质粒,经测序正确后转染293T细胞;Western印迹检测得到...
关键词：核磷蛋白1 RNA干扰 慢病毒载体 
利用酵母双杂交技术筛选与hPOT1相互作用的新蛋白
《生物技术通讯》2011年第3期375-378,共4页杨平勋 马航航 金蕊 白云秀 黄翠芬 黄君健 
目的:利用酵母双杂交系统筛选与人POT1(human protection of telomeres 1,hPOT1)相互作用的蛋白。方法:以hPOT1的300～634氨基酸片段为诱饵,在人乳腺cDNA文库中筛选能与hPOT1相互作用的蛋白质;运用营养缺陷型培养基和X-α-Gal实验排除...
关键词：人POT1 酵母双杂交 NM23B GST pull-down 免疫共沉淀 
GST/MKRN1融合蛋白的表达、纯化及多克隆抗体制备
《生物技术通讯》2006年第1期31-33,共3页白云秀 金蕊 陈皓 林坚 解跃华 黄君健 
目的:利用大肠杆菌BL21(DE3)表达GST/MKRN1融合蛋白,亲和层析分离纯化目的蛋白,进行动物免疫制备多克隆抗体。方法:MKRN1cDNA全长1449bp,编码482个氨基酸残基。将其基因片段克隆到pGEX-4T-1载体上,获得pGEX-4T-1-MKRN1原核表达重组质粒...
关键词：MKRN1 端粒酶催化亚基 融合表达 多克隆抗体 
端粒酶调控机制的研究进展被引量：1
《生物技术通讯》2005年第4期420-422,共3页金蕊 黄君健 
端粒酶在细胞中的主要生物学功能是通过其逆转录酶活性复制和延长端粒DNA来稳定染色体端粒DNA的长度。近年有关端粒酶与肿瘤关系的研究进展表明,在肿瘤细胞中端粒酶还参与了对肿瘤细胞的凋亡和基因组稳定的调控过程。与端粒酶的多重生...
关键词：端粒酶 调控机制 蛋白质相互作用 
端粒单链结合蛋白hPOT1核定位结构域的鉴定
《军事医学科学院院刊》2004年第4期319-321,336,共4页林坚 陈皓 白云秀 金蕊 张彬 黄翠芬 黄君健 
国家重点基础研究发展计划 ("973"计划 )资助项目 (G2 0 0 0 0 5 70 0 1);国家自然科学基金资助项目( 3 0 3 70 70 41)
目的 :鉴定端粒单链结合蛋白hPOT1核定位结构域。方法 :通过hPOT1的不同长度缺失突变体与EGFP绿色荧光蛋白融合 ,转染细胞后用荧光显微镜观察融合蛋白在细胞内的定位。结果 :确定了hPOT1进核序列是定位于第 35 5～ 375位氨基酸之间的富...
关键词：HPOT1 进核序列 端粒 DNA结合蛋白质类 
人端粒保护蛋白hPot1的一种新选择性剪接体的克隆及鉴定被引量：1
《生物技术通讯》2004年第3期219-221,共3页林坚 陈浩 黄君健 白云秀 金蕊 张彬 韩素文 黄翠芬 
国家973项目(G2000057001);国家自然科学基金(303707041)
hPot1是端粒单链结合蛋白,在维持染色体末端的稳定性中发挥着重要作用。从前列腺癌细胞C4-2中提取总RNA,以反转录得到的cDNA为模板,扩增全长的hPot1cDNA,发现hPot1基因的一种新的剪接形式。这种新的剪接形式缺失了野生型hPot1基因的第2...
关键词：人端粒保护蛋白 HPOT1 选择性剪接 克隆 染色体 鉴定 
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