刘少宁

作品数:13被引量:69H指数:5
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供职机构:山东省农业科学院更多>>
发文主题:鸭圆环病毒PRRSV猪繁殖与呼吸综合征病毒流行毒株原核表达更多>>
发文领域:农业科学医药卫生更多>>
发文期刊:《中国兽医学报》《中国预防兽医学报》《山东科学》《西南农业学报》更多>>
所获基金:山东省自然科学基金山东省优秀中青年科学家科研奖励基金山东省农业科学院青年科研基金山东省科技攻关计划重大科技专项更多>>
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山东省规模化猪场PRRSV NSP2变异株的感染情况调查被引量:1
《中国预防兽医学报》2013年第7期535-538,共4页成岩 赵梦娇 王美君 聂兆晶 刘少宁 周恩民 姜世金 田夫林 
转基因生物新品种培育重大专项(2009ZX08009-147B)
为了解山东省规模化猪场猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒(PRRSV)NSP2变异株的感染情况,2010~2011年本研究从山东省未免猪繁殖与呼吸障碍综合征(PRRS)疫苗猪场、免疫进口PRRS弱毒苗猪场和免疫国产PRRS弱毒苗猪场选择20个临床表观健康的规模...
关键词:重猪繁殖与呼吸综合征病毒 NSP2 变异株 弱毒苗 感染 
鸭圆环病毒核酸探针的制备与应用被引量:10
《中国兽医学报》2011年第11期1578-1581,共4页邹金峰 刘少宁 雷战 孙慧 魏宗 王鑫 姜世金 
山东省自然科学基金资助项目(Q2006D04);山东省高等学校科技计划项目(J08LF07)
用地高辛标记鸭圆环病毒(DuCV)全基因组克隆制成核酸探针,与鸭病毒性肝炎Ⅰ型病毒(DHV-Ⅰ)的cD-NA、鸭瘟病毒(DPV)的DNA和DuCV的DNA进行斑点杂交以检测核酸探针的特异性,结果该探针只与DuCV的DNA杂交呈阳性。敏感性结果表明,该探针对DuC...
关键词:鸭圆环病毒 核酸探针 检测 
多重RT-PCR检测PRRSV和CSFV及PRRSV ORF5基因遗传变异分析被引量:4
《中国兽医学报》2011年第5期633-637,共5页张金强 吴家强 孟斌 郭文龙 王希辉 李坤 于江 刘少宁 张玉玉 王金宝 
山东省自然科学基金重点资助项目(Z2007D06);山东省重大科技专项资助项目(2007ZHZX11103);山东省农科院青年基金资助项目(2005YQ039)
根据猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)和猪瘟病毒(CSFV)的基因组序列设计了2对特异性引物,建立了同时检测PRRSV和CSFV的多重RT-PCR方法。2008年1月至2009年12月期间,采集山东各地71个不同规模猪场及农村散养户212份病料,采用建立的多...
关键词:猪繁殖与呼吸综合征病毒 猪瘟病毒 多重PCR ORF5基因 
PRRSV山东变异缺失株SX-1的全基因序列分子特征分析被引量:2
《中国兽医学报》2011年第3期309-314,共6页张金强 吴家强 石峰 孟斌 刘少宁 牛钟相 
山东省自然科学基金资助项目(Z2007D06);山东省重大科技专项基金资助项目(2007ZHZX11103);山东省农科院青年基金资助项目(2005YQ039)
对从山东某发病猪场采集的猪繁殖与呼吸综合征疑似病料中分离到的PRRSV病毒(SX-1株),应用RTPCR方法分段扩增出PRRSV SX-1毒株的各基因片段,扩增后的产物分别克隆于pMD-18T载体鉴定后测序。序列号GQ875656。序列分析结果表明SX-1株基因...
关键词:PRRSV 分离 全基因组 序列与分析 
猪繁殖与呼吸综合征病毒LAMP检测方法的建立被引量:3
《家畜生态学报》2011年第2期50-54,共5页尹斐斐 吴家强 刘少宁 李坤 杜以军 孙文博 丛晓燕 王可 张玉玉 时建立 李俊 周顺 王金宝 
农业科技成果转化资金项目(2010GB2C600259);农业科技跨越计划(2009农跨18);山东省自主创新成果转化重大专项(2010ZHZX1A0417);山东省农业重大应用技术创新课题(鲁财农便〔2010〕5号)
研究针对美洲型猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)保守的N蛋白基因设计了4条LAMP的检测引物,通过优化反应条件,建立了一种检测PRRSV的LAMP诊断方法。特异性和敏感性试验结果显示,该方法能够特异地检测美洲型PRRSV,其最低检测限为1×101个拷...
关键词:猪繁殖与呼吸综合征病毒 LAMP 核酸染料 现地检测 
Ⅰ型鸭肝炎病毒SG株的分离鉴定及全基因组序列测定与分析
《山东农业大学学报(自然科学版)》2010年第4期539-544,共6页刘标 高继明 姜世金 司兴奎 辛英豪 刘少宁 谢之景 朱岩丽 周恩民 
国家自然科学基金(30871878);山东省高等学校科技计划项目(J08LF07)
自山东寿光地区疑似鸭病毒性肝炎的病鸭肝组织中分离到一株鸭肝炎病毒,命名为SG株DHV-Ⅰ。该病毒能被DHV-Ⅰ标准抗血清中和,该病毒第5代病毒尿囊液对12日龄鸭胚的ELD50为10-5.58/0.2 mL,对7日龄雏鸭的LD50为10-4.68/0.2 mL。全基因组序...
关键词:Ⅰ型鸭肝炎病毒 分离鉴定 全基因组 
金黄色葡萄球菌聚集因子A基因与牛IL-18基因真核共表达载体的构建与表达被引量:1
《中国兽医学报》2010年第6期766-769,788,共5页陈智 刘少宁 曹丙蕾 孔娜 李宏梅 胡敬东 赵宏坤 
教育部高校科技创新工程重大培育资金项目(CNO706039)
参照聚集因子A(Clumping factor A,ClfA)和牛白介素18(BoIL-18)cDNA序列分别设计引物进行扩增,将ClfA基因和BoIL-18基因分别插入到真核双表达载体pBUDCE4.1的CMV和EF-1α2个启动子的下游,构建携带2个目的基因的重组真核双表达载体pBUDCE...
关键词:金黄色葡萄球菌 乳腺炎 聚集因子A 牛白介素18 真核表达 
猪繁殖与呼吸综合征病毒WF-1株的分离鉴定及NSP2和ORF5基因的变异分析被引量:2
《西南农业学报》2010年第4期1264-1270,共7页李坤 吴家强 张金强 李俊 于江 刘洋 张玉玉 刘少宁 王兆 周顺 王金宝 
山东省自然科学基金重点项目(Z2007D06);山东省重大科技专项(2007ZHZX11103);山东省农科院青年基金项目(2005YQ039)
从山东某大型猪场患"猪高热病"的病料中分离到1株病毒,该病毒可在Marc-145细胞上增殖,产生细胞病变。经RT-PCR鉴定证明,该病毒为美洲型猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV),将其命名为WF-1株。用RT-PCR法分别扩增该分离株的NSP2基因和ORF5基...
关键词:猪繁殖与呼吸综合征病毒 分离 NSP2基因 ORF5基因 变异分析 
副猪嗜血杆菌荧光定量PCR检测技术的建立与应用被引量:18
《家畜生态学报》2010年第4期77-81,共5页于江 吴家强 张玉玉 王兆 李俊 丁鹏 李坤 刘洋 张金强 徐绍建 刘少宁 周顺 王文志 王金宝 
国家转基因生物新品种培育科技重大专项(2009ZX08009-143B);山东省自然科学基金重点项目(Z2007D06);山东省中青年科学家科研奖励基金(2009BSC02016);山东省留学回国人员科技活动择优资助项目(鲁人社函[2009]341号)
根据GenBank中的副猪嗜血杆菌(HPS)的infB基因的序列(DQ781808.1),利用分子生物学软件Premier 5.0设计一对特异性引物,建立基于SYBR Green I荧光定量PCR检测HPS的技术。试验采用煮沸法从HPS培养物中提取DNA,进行PCR扩增。将鉴定正确的...
关键词:副猪嗜血杆菌 infB基因 SYBR Green I 荧光定量PCR 
鸭圆环病毒FJ0601株Rep蛋白的原核表达及其抗血清制备被引量:5
《中国兽医学报》2010年第1期10-12,18,共4页刘少宁 杨金保 张兴晓 陈智 高继明 孔义波 朱岩丽 姜世金 
山东省优秀中青年科学家基金资助项目(2004BS06002);山东省自然科学基金资助项目(Q2006D04)
通过PCR方法扩增鸭圆环病毒(Duck circorirus,DuCV)FJ0601株Rep基因的完整ORF,按正确的阅读框架将其克隆入原核表达载体pGEX-6P-1中,重组质粒转化BL21宿主菌后,经IPTG诱导表达。诱导菌体裂解物经SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)后,将...
关键词:鸭圆环病毒 REP 原核表达 IFA 
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