杨恒

作品数:16被引量:51H指数:4
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供职机构:昆明理工大学更多>>
发文主题:猪传染性胃肠炎病毒减毒沙门氏菌S基因N基因猪传染性胃肠炎更多>>
发文领域:农业科学化学工程金属学及工艺医药卫生更多>>
发文期刊:《养猪》《畜牧兽医学报》《中国兽医杂志》《中国人兽共患病学报》更多>>
所获基金:长江学者和创新团队发展计划国家自然科学基金国家教育部博士点基金四川省重点科技攻关项目更多>>
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猪传染性胃肠炎病毒S基因B、C位点的克隆与表达及间接ELISA方法的建立被引量:2
《中国兽医杂志》2015年第1期7-10,共4页尹杰 杨恒 曹三杰 黄小波 文心田 李洁萍 余正强 周军 
国家自然科学基金项目(31072144,30901084);国家公益性行业(农业)科研专项(201203056)
针对猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)S基因B、C抗原位点编码基因片段(SBC,下同)设计合成1对引物,用PCR方法扩增SBC基因,将该基因片段定向插入到原核表达载体p ET-32a(+)中,构建原核表达载体p ET-32a-SBC。阳性质粒转化宿主菌BL21(DE3),在IPTG...
关键词:猪传染性胃肠炎病毒 克隆与表达 诊断 
传染性胃肠炎病毒(TGEV)双启动子真核表达载体pVAXD-N/S的构建与鉴定被引量:4
《农业生物技术学报》2012年第10期1207-1214,共8页黄小波 邓飞 曹三杰 文心田 杨恒 李春松 张鑫淼 张亮 
国家自然科学基金项目(No.30901084);教育部高等学校校博士点基金项目(No.20095103120006);教育部《长江学者和创新团队发展计划》创新团队项目(No.IRTO848)
猪传染性胃肠炎(TGE)是由猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)引起的高度接触性传染病。TGEV的S、N基因具有重要的免疫学功能,构建S、N双基因疫苗将能提供更好的免疫效果。本研究用RT-PCR扩增S基因抗原区(2.1kb,含A、B、C和D完整的抗原位点)和N基...
关键词:猪传染性胃肠炎病毒(TGEV) S基因 N基因 双启动子真核表达载体 
减毒沙门菌递呈的猪传染性胃肠炎病毒S基因与猪IL-6基因双启动子DNA疫苗的构建被引量:2
《中国兽医科学》2012年第9期921-926,共6页黄小波 李春松 曹三杰 文心田 张鑫淼 杨恒 张亮 
国家自然科学基金资助项目(30901084);教育部高等学校博士点基金项目(20095103120006);教育部"长江学者和创新团队发展计划"创新团队项目(IRT0848)
从猪传染性胃肠炎病毒克隆质粒pMD19T-S中扩增了2.1kb的S基因片段(含完整的A、B、C、D 4个抗原位点序列),以RT-PCR从猪外周血淋巴细胞中扩增了猪白细胞介素6(IL-6)(658bp),插入同一双启动子真核表达载体pVAXD的2个多克隆位点,构建了共表...
关键词:猪传染性胃肠炎病毒 S基因 IL-6基因 减毒鼠伤寒沙门菌 构建 鉴定 
猪传染性胃肠炎病毒S-N融合双基因疫苗的构建及其免疫原性分析被引量:5
《中国兽医科学》2012年第8期848-853,共6页黄小波 杨恒 曹三杰 文心田 李春松 廖晓丹 张鑫淼 
国家自然科学基金项目(30901084);教育部高等学校博士点基金项目(20095103120006);教育部"长江学者和创新团队发展计划"创新团队项目(IRT0848)
为了构建TGEV S-N融合双基因疫苗并分析其免疫原性,从S、N基因克隆质粒中以PCR扩增了S基因(2.1kb,含A、B、C、D抗原位点)和N基因(1.2kb),将S基因插入pVAX1载体构建了pVAX-S质粒,再将N基因插入pVAX-S中S基因末端,构建了融合表达S、N双基...
关键词:猪传染性胃肠炎病毒 S-N融合基因 DNA疫苗 免疫原性 
携带猪传染性胃肠炎病毒S/N融合双基因的减毒沙门氏菌的构建与鉴定被引量:1
《畜牧兽医学报》2012年第8期1273-1280,共8页黄小波 李春松 杨恒 曹三杰 文心田 廖晓丹 张鑫淼 
国家自然科学基金项目(30901084);教育部高等学校校博士点基金项目(20095103120006);教育部《长江学者和创新团队发展计划》创新团队项目(IRTO848)
旨在构建携带猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)S/N融合双基因的减毒沙门氏菌,并鉴定该疫苗菌株的生物学特性,为开展TGEV口服免疫研究奠定材料基础。采用PCR方法从克隆质粒19T-S和19T-N中分别扩增了TGEV的S基因(含主要抗原位点,2.1kb)和N基因(1....
关键词:减毒沙门氏菌 猪传染性胃肠炎病毒 融合双基因 构建 生物学特性 
猪传染性胃肠炎病毒基因工程疫苗研究进展被引量:2
《生物技术通报》2011年第2期28-32,共5页杨恒 夏雪山 李盛陶 陈伟 
云南省自然科学基金项目(2010ZC058)
猪传染性胃肠炎是由猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)引起猪的一种高度接触性肠道疾病,可导致仔猪发生严重的呕吐、腹泻与脱水,死亡率可达100%。口服疫苗是TGEV基因工程疫苗研究的主要方向,目前已在腺病毒、细菌、转基因植物及DNA疫苗中对TGEV...
关键词:猪传染性胃肠炎病毒 基因工程疫苗 口服免疫 
减毒沙门氏菌作为DNA疫苗载体的研究进展被引量:3
《生物技术通报》2010年第4期38-42,共5页陈伟 杨恒 
随着沙门氏菌基因组学的深入研究以及DNA重组技术的发展,使得对沙门氏菌进行精确的不可回复性的基因缺失减毒成为可能。减毒沙门氏菌可作为DNA疫苗载体,特异性地将其携带的质粒DNA靶向性的传递给巨噬细胞、树突细胞等抗原递呈细胞,从而...
关键词:减毒沙门氏菌 基因缺失 疫苗载体 DNA疫苗 
猪传染性胃肠炎病毒重组N蛋白单克隆抗体的制备及鉴定被引量:1
《中国兽医科学》2009年第11期994-998,共5页黄小波 李娜 文心田 曹三杰 余慧 杨恒 秦学远 尹杰 
教育部"长江学者和创新团队发展计划"创新团队项目(IRT0848);四川省教育厅资助项目(08zb075)
以纯化的猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)重组N蛋白免疫BALB/c小鼠,取免疫小鼠的脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞进行融合,通过间接ELISA法对融合细胞进行筛选,采用有限稀释法对阳性细胞进行4次亚克隆,获得了3株能稳定分泌N蛋白单克隆抗体的杂交瘤细...
关键词:猪传染性胃肠炎病毒 重组N蛋白 单克隆抗体 杂交瘤 
TGEV双基因嵌合表达质粒pVAX-S-N的构建及体外表达被引量:2
《中国兽医学报》2009年第3期254-257,共4页杨恒 曹三杰 黄小波 文心田 秦学远 
教育部长江学者和创新团队发展计划资助项目(IR-T0555)
采用RT-PCR扩增猪传染性肠胃炎病毒(TGEV)SC-H株S基因5′端主要抗原位点片段和N基因,插入pMD19-T载体,经酶切与测序鉴定后,构建重组质粒19T-N与19T-S。从T载体上将S、N基因切下,以亚克隆方法插入真核表达载体pVAX1,构建嵌合表达S、N基...
关键词:猪传染性胃肠炎病毒 S基因 N基因 构建 真核表达 
猪粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(pGM-CSF)基因的克隆与原核表达被引量:4
《农业生物技术学报》2009年第2期206-211,共6页杨恒 文心田 曹三杰 黄小波 
教育部长江学者和创新团队发展计划项目(No.IRT0555-9);四川省重点公益项目(No.2007NGY007)资助
通过RT-PCR方法,从经ConA刺激的猪外周血淋巴细胞中扩增出猪粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(pGM-CSF)编码区的cDNA并将其克隆至pMD-19T载体,序列测定表明pGM-CSF基因的长度为435bp,编码144个氨基酸。通过PCR方法获得缺失其N端17个氨基酸...
关键词:猪粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子 基因克隆 原核表达 生物活性测定 
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