刘亚娟

作品数：5被引量：18H指数：3
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供职机构：河南农业大学生命科学学院更多>>
发文主题：重组质粒PCR方法PCRCBDNA连接酶更多>>
发文领域：生物学更多>>
发文期刊：《中国农学通报》《淮阴工学院学报》《河南科学》更多>>
所获基金：国家自然科学基金更多>>
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T4 DNA连接酶性质及其平端连接功能被引量：3
《河南科学》2016年第7期1058-1062,共5页贺添艳 刘亚娟 徐文选 刘猛 刘亮伟 
国家自然科学基金(31371831)
T4 DNA连接酶(T4Lig)在基因工程中有重要作用,科研人员对该工具酶性质了解不全面易导致平端DNA连接效率很低、甚至失败.所以对T4Lig性质功能的全面认识有助于基因重组,特别是平端DNA连接中的应用.为了提高平端DNA连接效率,以及进一步阐...
关键词：T4 DNA连接酶 性质 功能 平端连接 
PEG影响pET20b质粒转化率
《淮阴工学院学报》2016年第3期30-33,共4页刘亚娟 刘猛 徐文选 贺添艳 刘亮伟 
国家自然科学基金项目(31371831)
PEG能够提高连接酶连接效率,但是对转化率的影响被忽视,特别是基因工程操作进入到精细定量阶段。以BL21(DE3)为宿主细胞,探讨32%PEG200、75℃30min处理对p ET20b质粒转化率的影响。以不经任何处理的1 ng p ET20b转化率100%作为对照,高...
关键词：PEG 转化率 机理 
长片断引物反向PCR方法构建重复序列的重组质粒被引量：3
《河南科学》2016年第4期501-505,共5页刘猛 刘亚娟 徐文选 贺添艳 刘亮伟 
国家自然科学基金(31371831)
构建重复序列的重组质粒比较困难,因为扩增重复序列会产生多聚物.利用长片断引物反向PCR方法构建重组质粒pET20b-C1-Xyn-C1,将碳水化合物结合模块C1连接在木聚糖酶Xyn两端,为类似质粒的构建提供新方法.第一步,以C1特异性正向引物LF、载...
关键词：长片断引物 反向PCR 重组质粒 构建 
构建重组质粒的二步PCR方法被引量：10
《河南科学》2015年第8期1321-1325,共5页韩来闯 马闪闪 刘亚娟 刘猛 刘亮伟 
国家自然科学基金(31371831;30972123)
建立一种简单的重组质粒构建方法——二步PCR,不需要限制性内切酶对基因和载体进行酶切.第一步常规PCR中,用正向引物(IF)和反向杂合引物(IR)扩增黑曲霉木聚糖酶Xyn基因,IF与基因特异性匹配,IR引物3’端与基因序列匹配、5’端含有19 bp p...
关键词：重组质粒 构建 PCR 
CBM2蛋白的高密度自诱导被引量：6
《中国农学通报》2015年第18期140-145,共6页马闪闪 韩来闯 刘亚娟 刘猛 刘亮伟 
国家自然科学基金"基于结构分析的嗜热CBM拆分-易位-组合融合对木聚糖酶稳定性-活性影响"(31371831);"基于pH相关氨基酸定位分析的双功能木聚糖酶耐酸性突变研究"(30972123)
为提高外源蛋白表达量,以pET20b载体、BL21(DE3)E.coli宿主细胞,比较了乳糖和IPTG对CBM2(碳水化合物结合结构域)蛋白表达量的诱导效果。ZYM-5052自诱导培养基菌体OD600是IPTG LB培养基菌体的4.4倍。SDS-PAGE显示200μL ZYM-5052菌体细...
关键词：CBM2 高密度 自诱导 
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