反向PCR

作品数：74被引量：253H指数：9
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侧翼序列获取技术研究进展被引量：5
《遗传》2022年第4期313-321,共9页徐纪明 朱建树 李梦真 胡晗 毛传澡 
国家自然科学基金项目(编号:32002121)资助。
侧翼序列是指染色体中特定位点两侧的DNA序列,包含着候选基因、转录调控、染色体结构、生物安全等信息,在基因组学研究中具有重要的作用。侧翼序列获取技术主要应用于启动子和增强子等调控序列的克隆、鉴定T-DNA或转座子插入位点、染色...
关键词：侧翼序列 质粒拯救 反向PCR 外源接头PCR 半随机引物PCR 基因组重测序 
例析未知序列的PCR扩增
《生物学教学》2022年第3期87-88,共2页马学乔 
本文例析并介绍了未知序列的PCR扩增方法。要对已知序列两侧的未知序列进行测序分析,可将其连成环状,利用已知序列设计引物,进行反向PCR。为减少随机片段的含量,可再进行巢式PCR。未知序列也可用热不对称交错PCR来扩增。
关键词：未知序列扩增 反向PCR 热不对称交错PCR 
利用优化的反向PCR策略高效构建多位点突变体被引量：2
《生物工程学报》2020年第4期801-809,共9页徐碧林 朱庆 陈岩岩 郑永良 
黄冈师范学院博士科研启动基金(No.201802103);黄冈师范学院高级别科研项目培育基金(No.201816503)资助。
蛋白质的突变体是研究其结构和功能的基础,文中旨在建立一种高效、快捷的多位点突变体构建方法。当要突变4个及以上相邻的氨基酸残基时,设计两长两短(长引物Ⅰ/Ⅰ、短引物Ⅱ/Ⅱ) 4条引物:长引物包含突变位点,且突变碱基数≤20 bp,短引...
关键词：引物 反向PCR 定点突变 多位点突变体 
解淀粉芽孢杆菌Bs-18生防功能相关基因的初步鉴定被引量：2
《山东农业科学》2019年第3期13-15,23,共4页孙淑琴 杨秀荣 孙冰冰 张惟 
天津市自然科学基金项目"解淀粉芽孢杆菌Bs-18生防相关基因的鉴定及功能分析"(16JCYBJC29500)
本研究利用平板筛选法,从转座子TnYLB-1转化的解淀粉芽孢杆菌Bs-18的突变体文库中筛选到生防作用发生明显变化的3株突变株。以这3株突变株为材料,通过反向PCR技术对突变体中转座子插入位点的侧翼序列进行BLAST比对分析,发现它们与野生...
关键词：解淀粉芽孢杆菌 突变体文库 反向PCR 
临床分离变形杆菌不典型第1类整合子结构分析被引量：5
《中华微生物学和免疫学杂志》2018年第6期440-445,共6页魏取好 肖林林 胡庆丰 李万翔 刘维薇 
浙江省自然科学基金（LY15H190006）;奉贤区（社会类）科技发展基金（20151001）
目的确定临床分离变形杆菌中不典型第1类整合子的结构。方法在26株第1类整合酶基因阳性可变区扩增失败的变形杆菌临床分离株中，选取6株通过反向PCR扩增第1类整合酶基因周围DNA片段，PCR产物测序结果通过BLAST进行比对分析，确定同源目...
关键词：整合子 基因盒 反向PCR 耐药性 变形杆菌 
一种基于RNA结合蛋白的RNA loop检测方法被引量：1
《医学分子生物学杂志》2018年第2期93-95,共3页苏中静 张田伟 刘广宇 黄东阳 
广东省创新强校工程人才培育项目计划（No.2016KTSCX044）,汕头市科技计划项目（No.2016-8）
目的探索检测细胞内RNA loop存在的实验方法。方法活细胞状态下交联蛋白核酸复合物、RNA免疫沉淀后在RNA不同位置设计引物，通过定量PCR结果间接检测RNA loop;另外，活细胞状态下交联蛋白核酸复合物后超声断裂核酸片段，相邻断端RNA连...
关键词：RNA LOOP RNA结合蛋白 RNA免疫沉淀 反向PCR 
P因子介导mir-2基因簇原位过表达调节Yki的活性分析被引量：1
《南开大学学报（自然科学版）》2017年第3期54-59,共6页李珊珊 林晓惠 吴世安 
自然科学基金面上项目(31471319)
Hippo信号通路在动物器官大小发育和肿瘤发生过程中发挥关键性作用.为了发掘新的Hippo信号通路活性调节因子,通过P因子插入介导基因原位过表达,在果蝇表型修饰筛选中鉴定了1株可以显著增强Hippo信号通路下游效应因子Yki活性的果蝇株MS0...
关键词：mir-2基因簇 Hippo信号通路 反向PCR P因子 
基于PCR技术进行侧翼序列分离的方法比较
《科学与信息化》2016年第32期5-7,共3页曾满 谢志雄 
国家自然科学基金(NO.3157009021272182).
利用PCR分离已知序列的侧翼序列是分子生物学相关研究工作中经常用到的技术。本文综述比较了常用的热不对称交错PCR(TAIL-PCR)、反向PCR(IPCR)、接头介导的PCR(LM-PCR)等方法。评估了各自的优缺点,旨在为研究者选择合适的技术解决相关...
关键词：侧翼序列 TAIL-PCR 反向PCR 接头介导PCR 
运用CRISPR/Cas系统敲除大肠杆菌磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶基因及其对脂肪酸代谢的影响被引量：9
《微生物学通报》2016年第8期1864-1871,共8页夏军 郑明刚 王玲 孙承君 郑立 祝建波 
中央级公益性科研院所基本科研业务费专项资金资助项目(No.2015T05);海洋可再生能源专项资金项目(No.GHME2001SW02)~~
【目的】CRISPR/Cas是目前基因编辑的一个重要的新兴技术,拟通过该技术,对大肠杆菌进行快速、高效的基因编辑,获取脂肪酸代谢工程菌。【方法】利用一个二元载体构建出CRISPR/Cas偶联λ-Red重组酶的系统,重叠PCR扩增出敲除的Donor,最后...
关键词：CRISPR/Cas 反向PCR GC-MS λ-Red重组酶 PEPC(磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶) 脂肪酸含量 
长片断引物反向PCR方法构建重复序列的重组质粒被引量：3
《河南科学》2016年第4期501-505,共5页刘猛 刘亚娟 徐文选 贺添艳 刘亮伟 
国家自然科学基金(31371831)
构建重复序列的重组质粒比较困难,因为扩增重复序列会产生多聚物.利用长片断引物反向PCR方法构建重组质粒pET20b-C1-Xyn-C1,将碳水化合物结合模块C1连接在木聚糖酶Xyn两端,为类似质粒的构建提供新方法.第一步,以C1特异性正向引物LF、载...
关键词：长片断引物 反向PCR 重组质粒 构建 
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